名称: | psiCHECK2-ICAM-1-3'UTR-2(缺失) |
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别称: | |
基因长: | |
质粒宿主: | 哺乳细胞 |
质粒用途: | 启动子检测 |
片段类型: | UTR |
片段物种: | 人 |
原核抗性: | Amp |
筛选标记: | |
荧光标记: | Fluc,Rluc |
启动子: | SV40 |
复制子: | pUC |
拷贝数: | |
感受态: | DH5a |
温度: | 37度 |
背景载体: | P0197 |
正向引物: | psiCHECK-2-F: |
反向引物: | psiCHECK-2-R: |
诱导方式: |
1、本平台所有产品仅供科研使用,不能用于临床试验,包括人体口服、注射或者体外用药;
2、小包装质粒以模板价格出售,只保证基因部分测序正确,不保证质粒的表达等实验效果;
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操作说明
一、质粒干粉(负20度保存,保质期90天,常温运输)
1、收到干粉质粒后请先5000rpm离心1min,再加入20μl无菌水溶解质粒;
2、将相应的感受态于冰盒上解冻,取2μl质粒加至100μl感受态中,冰浴 30min;
3、42度热激60s,冰浴2min,加入900μl无抗LB培养基,180rpm震荡培养45min;
4、6000rpm离心3min,留100μl上清重悬,再涂至对应抗性的LB平板上;
5、倒置培养过夜后,如菌落过多则稀释质粒转化,如没有菌落则取10ul质粒转化;
6、挑单菌落至对应抗性的LB液体培养基中过夜震荡培养,根据需要提取质粒。
二、液体质粒(负20度保存,保质期90天,冰袋运输)
1、收到液体质粒后请甩动保存管,让液体质粒不要吸附在管壁上;
2、根据实验需求取适量质粒,其余保存于负20度冰箱。
三、甘油菌种(负80度保存,保质期90天,冰袋运输)
1、收到甘油菌种后请甩动保存管,让菌液不要吸附在管壁上;
2、用接种环在固体平板上四区划线,如有抗性就加对应抗性;
3、恒温培养箱倒置培养12~16h;
4、务必挑取单菌落接种于液体培养基中,如有抗性就加对应抗性;
5、摇床震荡培养过夜,根据实验需要培养菌种。
TTTTCGGCAG
GAGGACGCTC
CAGATGAAAT
GGGTAAGTAC
ATCAAGAGCT
TCGTGGAGCG
CGTGCTGAAG
AACGAGCAGT
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GACCTATCCC
GGGACAGGGC
CTCTTCCTCG
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ATTGGTGGCA
GTGGTGCCAC
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GTGGAAGACA
TATGCCATGC
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GGACGCCGGA
GGACAGGGCA
TTGTCCTCAG
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CTCCATAGAC
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