产品货号：P71640
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一键复制产品信息
| 名称: | pLV3-GFAP(mouse)-Promoter-Kdm6b(mouse)-EF1a-CopGFP |
|---|---|
| 别称: | NM_001017426.2;1700064E03Rik; Jmjd3 |
| 基因长: | 4923bp |
| 质粒宿主： | 哺乳细胞,慢病毒 |
| 质粒用途： | 蛋白表达 |
| 片段类型： | ORF |
| 片段物种： | 小鼠 |
| 原核抗性： | Amp |
| 筛选标记： | |
| 荧光标记： | 绿色 |
| 启动子: | GFAP |
| 复制子: | pUC |
| 拷贝数: | |
| 感受态: | Stbl3 |
| 温度: | 37度 |
| 背景载体: | pCDH-CMV-MCS-EF1-copGFP |
| 正向引物: | CMV-F |
| 反向引物: | |
| 诱导方式: |
1、本平台所有产品仅供科研使用，不能用于临床试验，包括人体口服、注射或者体外用药；
2、小包装质粒以模板价格出售，只保证基因部分测序正确，不保证质粒的表达等实验效果；
3、某些质粒即使是出品公司亦没有完整测过序，如关键部位的序列测序正确，亦认为是正确质粒；
4、小包装质粒产品的售后期为您收到产品之日起3个月，收到质粒后请及时转化操作，过期需重新购买；
5、质粒构建皆收取的是成本费用，所有质粒会分享给其他实验者，保密性质粒请提前告知并缴纳保密费用；
6、因科学研究为探索未知的活动，存在较大不确定性，故在任何情况下淼灵都不承担额外的连带责任；
7、发表[中文论文]请标注：产品名称(产品货号) 由武汉淼灵生物科技有限公司提供；
8、发表[英文论文]请标注：Product Name (Product Item Number) was obtained from MiaoLingBio,China.
pLV3-GFAP(mouse)-Promoter-Kdm6b(mouse)-EF1a-CopGFP是适用于哺乳细胞蛋白表达的质粒。质粒携带的GFAP启动子能启动下游小鼠源Kdm6b基因在星形胶质细胞中特异性表达。此外，质粒带有HIV-1 Ψ和3'/5'LTR元件可用于慢病毒包装，便于基因稳定整合至宿主细胞。携带的CopGFP绿色荧光蛋白EF1a启动子启动转录，用来检测目的基因的表达和定位情况
操作说明
一、质粒干粉（负20度保存，保质期90天，常温运输）
1、收到干粉质粒后请先5000rpm离心1min,再加入20μl无菌水溶解质粒；
2、将相应的感受态于冰盒上解冻，取2μl质粒加至100μl感受态中，冰浴 30min；
3、42度热激60s，冰浴2min，加入900μl无抗LB培养基，180rpm震荡培养45min；
4、6000rpm离心3min，留100μl上清重悬，再涂至对应抗性的LB平板上；
5、倒置培养过夜后，如菌落过多则稀释质粒转化，如没有菌落则取10ul质粒转化；
6、挑单菌落至对应抗性的LB液体培养基中过夜震荡培养，根据需要提取质粒。
二、液体质粒（负20度保存，保质期90天，冰袋运输）
1、收到液体质粒后请甩动保存管，让液体质粒不要吸附在管壁上；
2、根据实验需求取适量质粒，其余保存于负20度冰箱。
三、甘油菌种（负80度保存，保质期90天，冰袋运输）
1、收到甘油菌种后请甩动保存管，让菌液不要吸附在管壁上；
2、用接种环在固体平板上四区划线，如有抗性就加对应抗性；
3、恒温培养箱倒置培养12~16h；
4、务必挑取单菌落接种于液体培养基中，如有抗性就加对应抗性；
5、摇床震荡培养过夜，根据实验需要培养菌种。
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GAGTGAGCTA
ACTCACATTA
ATTGCGTTGC
GCTCACTGCC
CGCTTTCCAG
TCGGGAAACC
TGTCGTGCCA
GCTGCATTAA
TGAATCGGCC
AACGCGCGGG
GAGAGGCGGT
TTGCGTATTG
GGCGCTCTTC
CGCTTCCTCG
CTCACTGACT
CGCTGCGCTC
GGTCGTTCGG
CTGCGGCGAG
CGGTATCAGC
TCACTCAAAG
GCGGTAATAC
GGTTATCCAC
AGAATCAGGG
GATAACGCAG
GAAAGAACAT
GTGAGCAAAA
GGCCAGCAAA
AGGCCAGGAA
CCGTAAAAAG
GCCGCGTTGC
TGGCGTTTTT
CCATAGGCTC
CGCCCCCCTG
ACGAGCATCA
CAAAAATCGA
CGCTCAAGTC
AGAGGTGGCG
AAACCCGACA
GGACTATAAA
GATACCAGGC
GTTTCCCCCT
GGAAGCTCCC
TCGTGCGCTC
TCCTGTTCCG
ACCCTGCCGC
TTACCGGATA
CCTGTCCGCC
TTTCTCCCTT
CGGGAAGCGT
GGCGCTTTCT
CATAGCTCAC
GCTGTAGGTA
TCTCAGTTCG
GTGTAGGTCG
TTCGCTCCAA
GCTGGGCTGT
GTGCACGAAC
CCCCCGTTCA
GCCCGACCGC
TGCGCCTTAT
CCGGTAACTA
TCGTCTTGAG
TCCAACCCGG
TAAGACACGA
CTTATCGCCA
CTGGCAGCAG
CCACTGGTAA
CAGGATTAGC
AGAGCGAGGT
ATGTAGGCGG
TGCTACAGAG
TTCTTGAAGT
GGTGGCCTAA
CTACGGCTAC
ACTAGAAGGA
CAGTATTTGG
TATCTGCGCT
CTGCTGAAGC
CAGTTACCTT
CGGAAAAAGA
GTTGGTAGCT
CTTGATCCGG
CAAACAAACC
ACCGCTGGTA
GCGGTGGTTT
TTTTGTTTGC
AAGCAGCAGA
TTACGCGCAG
AAAAAAAGGA
TCTCAAGAAG
ATCCTTTGAT
CTTTTCTACG
GGGTCTGACG
CTCAGTGGAA
CGAAAACTCA
CGTTAAGGGA
TTTTGGTCAT
GAGATTATCA
AAAAGGATCT
TCACCTAGAT
CCTTTTAAAT
TAAAAATGAA
GTTTTAAATC
AATCTAAAGT
ATATATGAGT
AAACTTGGTC
TGACAGTTAC
CAATGCTTAA
TCAGTGAGGC
ACCTATCTCA
GCGATCTGTC
TATTTCGTTC
ATCCATAGTT
GCCTGACTCC
CCGTCGTGTA
GATAACTACG
ATACGGGAGG
GCTTACCATC
TGGCCCCAGT
GCTGCAATGA
TACCGCGAGA
CCCACGCTCA
CCGGCTCCAG
ATTTATCAGC
AATAAACCAG
CCAGCCGGAA
GGGCCGAGCG
CAGAAGTGGT
CCTGCAACTT
TATCCGCCTC
CATCCAGTCT
ATTAATTGTT
GCCGGGAAGC
TAGAGTAAGT
AGTTCGCCAG
TTAATAGTTT
GCGCAACGTT
GTTGCCATTG
CTACAGGCAT
CGTGGTGTCA
CGCTCGTCGT
TTGGTATGGC
TTCATTCAGC
TCCGGTTCCC
AACGATCAAG
GCGAGTTACA
TGATCCCCCA
TGTTGTGCAA
AAAAGCGGTT
AGCTCCTTCG
GTCCTCCGAT
CGTTGTCAGA
AGTAAGTTGG
CCGCAGTGTT
ATCACTCATG
GTTATGGCAG
CACTGCATAA
TTCTCTTACT
GTCATGCCAT
CCGTAAGATG
CTTTTCTGTG
ACTGGTGAGT
ACTCAACCAA
GTCATTCTGA
GAATAGTGTA
TGCGGCGACC
GAGTTGCTCT
TGCCCGGCGT
CAATACGGGA
TAATACCGCG
CCACATAGCA
GAACTTTAAA
AGTGCTCATC
ATTGGAAAAC
GTTCTTCGGG
GCGAAAACTC
TCAAGGATCT
TACCGCTGTT
GAGATCCAGT
TCGATGTAAC
CCACTCGTGC
ACCCAACTGA
TCTTCAGCAT
CTTTTACTTT
CACCAGCGTT
TCTGGGTGAG
CAAAAACAGG
AAGGCAAAAT
GCCGCAAAAA
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GGCGACACGG
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TACTCATACT
CTTCCTTTTT
CAATATTATT
GAAGCATTTA
TCAGGGTTAT
TGTCTCATGA
GCGGATACAT
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CGCACATTTC
CCCGAAAAGT
GCCACCTGAC
GTCTAAGAAA
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CATGACATTA
ACCTATAAAA
ATAGGCGTAT
CACGAGGCCC
TTTCGTCTCG
CGCGTTTCGG
TGATGACGGT
GAAAACCTCT
GACACATGCA
GCTCCCGGAG
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CTTGTCTGTA
AGCGGATGCC
GGGAGCAGAC
AAGCCCGTCA
GGGCGCGTCA
GCGGGTGTTG
GCGGGTGTCG
GGGCTGGCTT
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TGAAATACCG
CACAGATGCG
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GCGGGCCTCT
TCGCTATTAC
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GTGCCAAGCT
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