名称: | pMO9075-PL+PR-Tnf(mouse) |
---|---|
别称: | NM_013693.3;DIF; TNF-a; TNF-alpha; Tnfa; TNFalpha;Tnfsf1a; TNFSF2; Tnlg1f |
基因长: | 708bp |
质粒宿主: | 脱硫弧菌 |
质粒用途: | 蛋白表达 |
片段类型: | ORF |
片段物种: | 小鼠 |
原核抗性: | Spe |
筛选标记: | |
荧光标记: | |
启动子: | PL+PR |
复制子: | PUC |
拷贝数: | |
感受态: | DH5a |
温度: | 37度 |
背景载体: | Pmo9075 |
正向引物: | G53976-F1 |
反向引物: | |
诱导方式: |
1、本平台所有产品仅供科研使用,不能用于临床试验,包括人体口服、注射或者体外用药;
2、小包装质粒以模板价格出售,只保证基因部分测序正确,不保证质粒的表达等实验效果;
3、某些质粒即使是出品公司亦没有完整测过序,如关键部位的序列测序正确,亦认为是正确质粒;
4、小包装质粒产品的售后期为您收到产品之日起3个月,收到质粒后请及时转化操作,过期需重新购买;
5、质粒构建皆收取的是成本费用,所有质粒会分享给其他实验者,保密性质粒请提前告知并缴纳保密费用;
6、因科学研究为探索未知的活动,存在较大不确定性,故在任何情况下淼灵都不承担额外的连带责任;
7、发表[中文论文]请标注:产品名称(产品货号) 由武汉淼灵生物科技有限公司提供;
8、发表[英文论文]请标注:Product Name (Product Item Number) was obtained from MiaoLingBio,China.
操作说明
一、质粒干粉(负20度保存,保质期90天,常温运输)
1、收到干粉质粒后请先5000rpm离心1min,再加入20μl无菌水溶解质粒;
2、将相应的感受态于冰盒上解冻,取2μl质粒加至100μl感受态中,冰浴 30min;
3、42度热激60s,冰浴2min,加入900μl无抗LB培养基,180rpm震荡培养45min;
4、6000rpm离心3min,留100μl上清重悬,再涂至对应抗性的LB平板上;
5、倒置培养过夜后,如菌落过多则稀释质粒转化,如没有菌落则取10ul质粒转化;
6、挑单菌落至对应抗性的LB液体培养基中过夜震荡培养,根据需要提取质粒。
二、液体质粒(负20度保存,保质期90天,冰袋运输)
1、收到液体质粒后请甩动保存管,让液体质粒不要吸附在管壁上;
2、根据实验需求取适量质粒,其余保存于负20度冰箱。
三、甘油菌种(负80度保存,保质期90天,冰袋运输)
1、收到甘油菌种后请甩动保存管,让菌液不要吸附在管壁上;
2、用接种环在固体平板上四区划线,如有抗性就加对应抗性;
3、恒温培养箱倒置培养12~16h;
4、务必挑取单菌落接种于液体培养基中,如有抗性就加对应抗性;
5、摇床震荡培养过夜,根据实验需要培养菌种。
CTTTCCTGCG
TTATCCCCTG
ATTCTGTGGA
TAACCGTATT
ACCGCCTTTG
AGTGAGCTGA
TACCGCTCGC
CGCAGCCGAA
CGACCGAGCG
CAGCGAGTCA
GTGAGCGAGG
AAGCGGAAGA
GCGCCCAATA
CGCAAACCGC
CTCTCCCCGC
GCGTTGGCCG
ATTCATTAAT
GCAGCTGGCA
CGACAGGTTT
CCCGACTGGA
AAGCGGGCAG
TGAGCGCAAC
GCAATTAATA
CGCGTACCGC
TAGCCAGGAA
GAGTTTGTAG
AAACGCAAAA
AGGCCATCCG
TCAGGATGGC
CTTCTGCTTA
GTTTGATGCC
TGGCAGTTTA
TGGCGGGCGT
CCTGCCCGCC
ACCCTCCGGG
CCGTTGCTTC
ACAACGTTCA
AATCCGCTCC
CGGCGGATTT
GTCCTACTCA
GGAGAGCGTT
CACCGACAAA
CAACAGATAA
AACGAAAGGC
CCAGTCTTCC
GACTGAGCCT
TTCGTTTTAT
TTGATGCCTG
GCAGTTCCCT
ACTCTCGCGT
TAATTCCCCT
TGGTGGAGTT
GAGTGGTTTT
AAAAACTGGA
GAGGAGTCCA
TGAAACGAAA
GCAGCTGAGG
ATTGAAACGA
AGTAACAGCG
CATACTAATT
GTATTTTTTG
GGTGGGGGAG
GAGCCTTGCG
ACGGGCGGCG
AGCGTAGCGA
GGGGCCTCTA
TAGCGCGCGC
ATACGCGCGC
GCGCGCGCAT
ACGCGCGCGC
TTCTTCTTTT
CTTTCTTTTC
TCTTTTCCCC
CTCGTTTTTC
GTCAGTTATT
TCGGCAACCT
ACAGACCTAA
AAGTGACCAA
AAGTACGTCT
AAAGGTGACC
AAAAGTACGT
CTAAAGGTGA
CCAAAAGTAC
GTCTAAAGGT
GACCAAAAGT
ACGTGGTGTA
GCCTTTGGGT
GACCAATTTG
ACAAGTGGTC
ACCTTTAGCC
ATAAAGGCAA
AAGAACAGCC
CGAAAAGGTG
CGGTAACACC
TCAACGGGCC
TAACCTCTCA
CAAGCCCTAA
AATGGAGGGT
CTGCAATGGT
TGACAGGCAA
TTAACCTTAC
CCGGCGAGAT
AGTCAAAAAG
TCAAACGCAC
TGGCTAGGGC
CAAGTGGTCC
CCTAAGTCCG
TGTGGGAACC
GCGCATGGTC
GCGCTGGTAG
CTTCCATGGT
CCGTCAGGAC
GATGCGGACT
TTCAGGAATA
CCGCTTTCCT
GTCTCCACCC
TTTGCGATGA
GCAAGAGCTA
TCCGGCAAGA
GGTACAAGGA
CATTAAGGCC
GCTGTAGAAA
ATGTGATGAA
AGCCTATGTG
ATGATTGAGG
AAGGCAAAAA
TTACGTGGCG
TATAGCATCT
TCTCAAAGTG
TGGCTATGAA
AACGGTGTCA
TGGTCGCCGC
CTTCCATCCC
GATCTGAAAC
CCCATTTTCT
CGGCCTTCAA
AAGCAGTTCA
CAAGGTATAG
CCTCATGGAA
TTTCTGGTGC
TGCCTAGCAC
CTACAGCCAA
AGGGTTTTCG
AGGTTTTGAG
GTCGTGGGAC
GACAAGCCGG
AAGTGACCAT
TTCACTTGTC
GATCTTCATG
AAATGGTGGG
TACGCCTCCT
TCTCTGCGGA
AGAAGTACCC
CGACTTTCGC
CGTAAGGTTC
TTGAGAAGGC
CCACAAGGAC
ATAAACCGCC
ATACCGCGCT
TGCTTACGAG
TGGGAAGCCG
TGAAGAACGG
GCGCTCGGTC
GCGGGTATCC
GCTTCCTGTT
CGCGCAGAAG
CGGGCGGGCA
GGGTCGTAGC
CAAGAAACAG
GCCAAGGTCG
TGCAGGACAG
CAGCGACGCC
AAGAACAAGG
CCTTCATCGC
CGCGACCAAG
TGCCACGCGG
CCAGCAAGGG
CCGCTGCACG
CCGAAAGACA
ACCTCCAGTG
CCAAGTGTGC
GCCCAGCTCG
TCAGCCTGGG
CAAGAGAGCC
GGAACAGCCT
AAACCTCTTT
TGTAGCACCC
CCCCTTTGAG
GCTGTAGCAC
CCCCCTTTTG
AGGCTGTAGC
ACCTTGTGAC
GTGCCTGTAG
CACCTTTTCA
GACTTCACAT
TTTTAACCAT
AACGTGCTGT
TTTAACAGAA
ATTTTCTTTA
CGTTTCAGCA
CCGGCTGATC
TCGCTTTTTT
GTGCCACAAA
AAGGCTATCC
TGCCAAGCGG
CATTAAAACA
AGCCACCTCA
TCAACAAAAT
GAAGGGGGGC
GCGGCCCGCT
CACATGGTTG
CAGGTGAAGA
AGATTGGAAA
TCGAGGCGAA
GGTTATTCCA
TTCCCCGCAG
TAGAACCTGA
ACAGGGAAGC
CTGTTCTAAT
AGCCCTAAAA
TCGATTTTAA
GCGCAGGAAC
AAGCAAGAAG
AGACTCAGGC
TCACCGAGGG
AAATTTCCTC
CCTTACGCCC
CCTTCTACGC
TTCGTTATCG
CTACGCCGAA
AAAAAGAGCA
AGGGACGCTT
CGCTTCTGCC
CTTGCTCTTT
TTTTGCGCCT
TCGCTGCACT
CCGCTCACGA
AGGCGGCTCC
GGGGGAAATT
TCAGCCTGGT
TCCAACGACA
AGCGAAGCGG
GATCTGCGGG
GGGCCCCCGT
GAGGGGGGGC
GGCTAGCCCC
ATCCCCTGCT
TGCAGGGGCA
GGACCGGCGT
AGCCGGAGCG
AGTGGTGATG
GTCTTGTGAT
CGTCCAGAGT
GATTTCCGTT
GTGCTGGACT
CTCCCGATTC
TCGACGAGCT
GAAAGCGAGA
AGAGCGCACT
TATACATCGC
TGCGCGACGT
GTGCGCCCTG
CGGGGCTAAG
TCATCGGAAC
AAAAGAGTTT
CCCCGTAGTG
GGGAAAAGGG
GGCTTCATAT
GGACCAGAAC
ACCTTGCCGA
TCAGCCAAAC
GTCTCTTCAG
GCCACTGACT
AGCGATAACT
TTCCCCACAA
CGGAACAACT
CTCATTGCAT
GGGATCATTG
GGTACTGTGG
GTTTAGTGGT
TGTAAAAACA
CCTGACCGCT
ATCCCTGATC
AGTTTCTTGA
AGGTAAACTC
ATCACCCCCA
AGTCTGGCTA
TGCAGAAATC
ACCTGGCTCA
ACAGCCTGCT
CAGGGTCAAC
GAGAATTAAC
ATTCCGTCAG
GAAAGCTTGG
CTTGGAGCCT
GTTGGTGCGG
TCATGGAATT
ACCTTCAACC
TCAAGCCAGA
ATGCAGAATC
ACTGGCTTTT
TTGGTTGTGC
TTACCCATCT
CTCCGCATCA
CCTTTGGTAA
AGGTTCTAAG
CTTAGGTGAG
AACATCCCTG
CCTGAACATG
AGAAAAAACA
GGGTACTCAT
ACTCACTTCT
AAGTGACGGC
TGCATACTAA
CCGCTTCATA
CATCTCGTAG
ATTTCTCTGG
CGATTGAAGG
GCTAAATTCT
TCAACGCTAA
CTTTGAGAAT
TTTTGTAAGC
AATGCGGCGT
TATAAGCATT
TAATGCATTG
ATGCCATTAA
ATAAAGCACC
AACGCCTGAC
TGCCCCATCC
CCATCTTGTC
TGCGACAGAT
TCCTGGGATA
AGCCAAGTTC
ATTTTTCTTT
TTTTCATAAA
TTGCTTTAAG
GCGACGTGCG
TCCTCAAGCT
GCTCTTGTGT
TAATGGTTTC
TTTTTTGTGC
TCATACGTTA
AATCTATCAC
CGCAAGGGAT
AAATATCTAA
CACCGTGCGT
GTTGACTATT
TTACCTCTGG
CGGTGATAAT
GGTTGCCGGA
ATTCATGGTA
CGCTGGACTT
TGTGGGGGTA
CCTCACTCCT
TCCGCACGTA
ATTCCTGACG
GATGGCCTTT
TTATTTATGT
CAGCACCGCC
AGCTGGCGGT
GCTGACATAA
ATAGCAGGAA
AGCGAGGGTA
TCCGCCAGGG
TTTTCCCAGT
CACGATGTAC
TGCAGTCCCA
GGAGGTACCA
TTGTATGGAA
CAACGCATAA
CCCTGAAAGA
TTATGCAATG
CGCTTTGGGC
AAACCAAGAC
AGCTAAAGAT
CTTTTGTTTA
ACTTTATTGC
AGTCCCAGGA
GGTACCATAT
ACTCGAGATG
AGCACAGAAA
GCATGATCCG
CGACGTGGAA
CTGGCAGAAG
AGGCACTCCC
CCAAAAGATG
GGGGGCTTCC
AGAACTCCAG
GCGGTGCCTA
TGTCTCAGCC
TCTTCTCATT
CCTGCTTGTG
GCAGGGGCCA
CCACGCTCTT
CTGTCTACTG
AACTTCGGGG
TGATCGGTCC
CCAAAGGGAT
GAGAAGTTCC
CAAATGGCCT
CCCTCTCATC
AGTTCTATGG
CCCAGACCCT
CACACTCAGA
TCATCTTCTC
AAAATTCGAG
TGACAAGCCT
GTAGCCCACG
TCGTAGCAAA
CCACCAAGTG
GAGGAGCAGC
TGGAGTGGCT
GAGCCAGCGC
GCCAACGCCC
TCCTGGCCAA
CGGCATGGAT
CTCAAAGACA
ACCAACTAGT
GGTGCCAGCC
GATGGGTTGT
ACCTTGTCTA
CTCCCAGGTT
CTCTTCAAGG
GACAAGGCTG
CCCCGACTAC
GTGCTCCTCA
CCCACACCGT
CAGCCGATTT
GCTATCTCAT
ACCAGGAGAA
AGTCAACCTC
CTCTCTGCCG
TCAAGAGCCC
CTGCCCCAAG
GACACCCCTG
AGGGGGCTGA
GCTCAAACCC
TGGTATGAGC
CCATATACCT
GGGAGGAGTC
TTCCAGCTGG
AGAAGGGGGA
CCAACTCAGC
GCTGAGGTCA
ATCTGCCCAA
GTACTTAGAC
TTTGCGGAGT
CCGGGCAGGT
CTACTTTGGA
GTCATTGCTC
TGTGAGCGGC
CGCATGCAAT
TGCTGCAGCC
AAGCTTGGCT
GTTTTGGCGG
ATGAGAGAAG
ATTTTCAGCC
TGATACAGAT
TAAATCAGAA
CGCAGAAGCG
GTCTGATAAA
ACAGAATTTG
CCTGGCGGCA
GTAGCGCGGT
GGTCCCACCT
GACCCCATGC
CGAACTCAGA
AGTGAAACGC
CGTAGCGCCG
ATGGTAGTGT
GGGGTCTCCC
CATGCGAGAG
TAGGGAACTG
CCAGGCATCA
AATAAAACGA
AAGGCTCAGT
CGAAAGACTG
GGCCTTTCGT
TTTATCTGTT
GTTTGTCGGT
GAACGCTCTC
CTGAGTAGGA
CAAATCCGCC
GGGAGCGGAT
TTGAACGTTG
CGAAGCAACG
GCCCGGAGGG
TGGCGGGCAG
GACGCCCGCC
ATAAACTGCC
AGGCATCAAA
TTAAGCAGAA
GGCCATCCTG
ACGGATGGCC
TTTTTGCGTT
TCTACTCTAG
AACTAGTTCA
CCTACCAAAC
AATGCCCCCC
TGCAAAAAAT
AAATTCATAT
AAAAAACATA
CAGATAACCA
TCTGCGGTGA
TAAATTATCT
CTGGCGGTGC
TGACATAAAT
ACCACTGGCG
GTGATACTGA
GCACATCAGC
AGGACGCACT
GACCACCATG
AAGGTGACGC
TCTTAAAAAT
TAAGCCCTGA
AGAAGGGCAG
CATTCAAAGC
AGAAGGCTTT
GGGGTGTGTG
ATACGAAACG
AAGCATTGGT
TAAAAATTAA
GGAGGAATTC
ATGGTACGCT
GGACTTTGTG
GGATACCCTC
GCTTTCCTGC
TCCTGTTGAG
TTTATTGCTG
CCGTCATTGC
TTATTATGTT
CATCCCGTCA
ACATTCAAAC
GGCCTGTCTC
ATCATGGAAG
GCGCTGAATT
TACGGAAAAC
ATTATTAATG
GCGTCGAGCG
TCCGGTTAAA
GCCGCTGAAT
TGTTCGCGTT
TACCTTGCGT
GTACGCGCAG
GAAACACTGA
CGTTCTTACT
GACGCAGAAG
AAAACGTGCG
TCAAAAATTA
CGTGCGGAAG
GAGTGAGGTA
CCGAGCTCGA
ATTATCTGAC
GCACACCGTG
GAAACGGATG
AAGGCACGAA
CCCAGTGGAC
ATAAGCCTGT
TCGGTTCGTA
AGCTGTAATG
CAAGTAGCGT
ATGCGCTCAC
GCAACTGGTC
CAGAACCTTG
ACCGAACGCA
GCGGTGGTAA
CGGCGCAGTG
GCGGTTTTCA
TGGCTTGTTA
TGACTGTTTT
TTTGGGGTAC
AGTCTATGCC
TCGGGCATCC
AAGCAGCAAG
CGCGTTACGC
CGTGGGTCGA
TGTTTGATGT
TATGGAGCAG
CAACGATGTT
ACGCAGCAGG
GCAGTCGCCC
TAAAACAAAG
TTAAACATTA
TGAGGGAAGC
GGTGATCGCC
GAAGTATCGA
CTCAACTATC
AGAGGTAGTT
GGCGTCATCG
AGCGCCATCT
CGAACCGACG
TTGCTGGCCG
TACATTTGTA
CGGCTCCGCA
GTGGATGGCG
GCCTGAAGCC
ACACAGTGAT
ATTGATTTGC
TGGTTACGGT
GACCGTAAGG
CTTGATGAAA
CAACGCGGCG
AGCTTTGATC
AACGACCTTT
TGGAAACTTC
GGCTTCCCCT
GGAGAGAGCG
AGATTCTCCG
CGCTGTAGAA
GTCACCATTG
TTGTGCACGA
CGACATCATT
CCGTGGCGTT
ATCCAGCTAA
GCGCGAACTG
CAATTTGGAG
AATGGCAGCG
CAATGACATT
CTTGCAGGTA
TCTTCGAGCC
AGCCACGATC
GACATTGATC
TGGCTATCTT
GCTGACAAAA
GCAAGAGAAC
ATAGCGTTGC
CTTGGTAGGT
CCAGCGGCGG
AGGAACTCTT
TGATCCGGTT
CCTGAACAGG
ATCTATTTGA
GGCGCTAAAT
GAAACCTTAA
CGCTATGGAA
CTCGCCGCCC
GACTGGGCTG
GCGATGAGCG
AAATGTAGTG
CTTACGTTGT
CCCGCATTTG
GTACAGCGCA
GTAACCGGCA
AAATCGCGCC
GAAGGATGTC
GCTGCCGACT
GGGCAATGGA
GCGCCTGCCG
GCCCAGTATC
AGCCCGTCAT
ACTTGAAGCT
AGACAGGCTT
ATCTTGGACA
AGAAGAAGAT
CGCTTGGCCT
CGCGCGCAGA
TCAGTTGGAA
GAATTTGTCC
ACTACGTGAA
AGGCGAGATC
ACCAAGGTAG
TCGGCAAATA
ACCCTCGAGC
CACCCATGAC
CAAAATCCCT
TAACGTGAGT
TACGCGTCGT
TCCACTGAGC
GTCAGACCCC
GTAGAAAAGA
TCAAAGGATC
TTCTTGAGAT
CCTTTTTTTC
TGCGCGTAAT
CTGCTGCTTG
CAAACAAAAA
AACCACCGCT
ACCAGCGGTG
GTTTGTTTGC
CGGATCAAGA
GCTACCAACT
CTTTTTCCGA
AGGTAACTGG
CTTCAGCAGA
GCGCAGATAC
CAAATACTGT
TCTTCTAGTG
TAGCCGTAGT
TAGGCCACCA
CTTCAAGAAC
TCTGTAGCAC
CGCCTACATA
CCTCGCTCTG
CTAATCCTGT
TACCAGTGGC
TGCTGCCAGT
GGCGATAAGT
CGTGTCTTAC
CGGGTTGGAC
TCAAGACGAT
AGTTACCGGA
TAAGGCGCAG
CGGTCGGGCT
GAACGGGGGG
TTCGTGCACA
CAGCCCAGCT
TGGAGCGAAC
GACCTACACC
GAACTGAGAT
ACCTACAGCG
TGAGCTATGA
GAAAGCGCCA
CGCTTCCCGA
AGGGAGAAAG
GCGGACAGGT
ATCCGGTAAG
CGGCAGGGTC
GGAACAGGAG
AGCGCACGAG
GGAGCTTCCA
GGGGGAAACG
CCTGGTATCT
TTATAGTCCT
GTCGGGTTTC
GCCACCTCTG
ACTTGAGCGT
CGATTTTTGT
GATGCTCGTC
AGGGGGGCGG
AGCCTATGGA
AAAACGCCAG
CAACGCGGCC
TTTTTACGGT
TCCTGGCCTT
TTGCTGGCCT
TTTGCTCACA
TGTT