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pECMV-Nt5e-m-FLAG

产品货号:P5659

产品规格:

    少量干粉质粒 大提液体质粒

产品数量:

- 1 +

产品价格:0.00

一键复制产品信息
名称: pECMV-Nt5e-m-FLAG
别称:
基因长:
质粒宿主: 哺乳细胞
质粒用途: 蛋白表达
片段类型: ORF
片段物种: 小鼠
原核抗性: Kan
筛选标记: Neo/G418
荧光标记:
启动子: CMV
复制子: pUC
拷贝数:
感受态: DH5a
温度: 37度
背景载体: P0787
正向引物: CMV-F:CGCAAATGGGCGGTAGGCGTG
反向引物: pFLAG-CMV-R:GCACTGGAGTGGCAACTT
诱导方式:

1、本平台所有产品仅供科研使用,不能用于临床试验,包括人体口服、注射或者体外用药;
2、小包装质粒以模板价格出售,只保证基因部分测序正确,不保证质粒的表达等实验效果;
3、某些质粒即使是出品公司亦没有完整测过序,如关键部位的序列测序正确,亦认为是正确质粒;
4、小包装质粒产品的售后期为您收到产品之日起3个月,收到质粒后请及时转化操作,过期需重新购买;
5、质粒构建皆收取的是成本费用,所有质粒会分享给其他实验者,保密性质粒请提前告知并缴纳保密费用;
6、因科学研究为探索未知的活动,存在较大不确定性,故在任何情况下淼灵都不承担额外的连带责任;
7、发表[中文论文]请标注:产品名称(产品货号) 由武汉淼灵生物科技有限公司提供;
8、发表[英文论文]请标注:Product Name (Product Item Number) was obtained from MiaoLingBio,China.

操作说明

一、质粒干粉(负20度保存,保质期90天,常温运输)

1、收到干粉质粒后请先5000rpm离心1min,再加入20μl无菌水溶解质粒;

2、将相应的感受态于冰盒上解冻,取2μl质粒加至100μl感受态中,冰浴 30min;

3、42度热激60s,冰浴2min,加入900μl无抗LB培养基,180rpm震荡培养45min;

4、6000rpm离心3min,留100μl上清重悬,再涂至对应抗性的LB平板上;

5、倒置培养过夜后,如菌落过多则稀释质粒转化,如没有菌落则取10ul质粒转化;

6、挑单菌落至对应抗性的LB液体培养基中过夜震荡培养,根据需要提取质粒。


二、液体质粒(负20度保存,保质期90天,冰袋运输)

1、收到液体质粒后请甩动保存管,让液体质粒不要吸附在管壁上;

2、根据实验需求取适量质粒,其余保存于负20度冰箱。

三、甘油菌种(负80度保存,保质期90天,冰袋运输)

1、收到甘油菌种后请甩动保存管,让菌液不要吸附在管壁上;

2、用接种环在固体平板上四区划线,如有抗性就加对应抗性;

3、恒温培养箱倒置培养12~16h;

4、务必挑取单菌落接种于液体培养基中,如有抗性就加对应抗性;

5、摇床震荡培养过夜,根据实验需要培养菌种。

一键复制序列(有部分质粒是非全长序列)
1

GGGGGGTGGA

TGCCTTCAGG

GCAGGAGAGG

CACTGGGGAG

GGGTCACAGG

GATGCCACCC

61

GGGATCTGTT

CAGGAAACAG

CTATGACCGC

GGCCGGCCGT

TTAAACCTTA

TCGTCGTCAT

121

CCTTGTAATC

CAGGATATCA

TTTGCTGCCA

GATCCTCTTC

TGAGATGAGT

TTCTGCTCGA

181

GCGGCCGCGT

ACGCGTTTGG

TACAAAATAA

GGATCATTGC

CCAAAATGAA

AGAATTACTA

241

AAGGAAAGCT

TCCCTGGTAA

TGACTTGCTG

CAGAGAACTT

GATCCGCCCT

TCAACGGCTG

301

GGTAAACTAC

TTTCATTTTT

GAGATGTATT

CAGAAACCAC

GCTGATATCT

TGATCACCAG

361

AGTCATGCTT

TAGTAATTCA

TCTTTTATCA

TCTGGAATCC

ATCTCCACCG

TTGGCCAGAT

421

AGCTTGGGAG

GGTCACTTTA

TACACTTTAT

CCATTTCAAG

AGGCTCATAG

ATGGGCACTC

481

GACACTTGGT

GCAGAGAACT

TCTAATTGGA

CCACTCTGTT

CCAGGGCTTT

CGGTTAATAT

541

CGTACACCAC

ATGGATTCCA

CCCACTTGCA

GGAACTCTCC

GGTGGACTGG

CCATAGCGAT

601

GCACGCTGTG

CTCAAAAGCC

TTCTTCAGGG

TGGACCCTTT

TAATTGGACG

AGGTCAAATG

661

TCCCTCCAAA

GGGCAGCACA

GCAGCCAGGT

TCTCCCAGGT

GATGGTACCA

TTGTTCTTCT

721

CATCAATGGG

GGACCGGATG

CCACCTCCGT

TTACAATGCA

CATGGACACG

TGGTTCCAAA

781

ACATTTCATC

TGGGTGTCTG

AGGTTGTTGT

TAATCATGGC

ATCACAGATC

AGGTTTCCCA

841

TGTTGCATTC

CCTGAAGCGG

CACGTCTGAG

TGGAGCCATC

CAGGTAGACG

ATCGTTCTCC

901

CGAGTTCCTG

GGTAGAATAA

TTATCTAATT

TTATCCTCCA

TTGGTTAATG

TCTGCTTTGA

961

TGGTCGCATC

TTCAGGAATG

CTGCTGTTGA

GAAGAATGGG

ATTTCCATAG

GAAGTGATAA

1021

CATTGCCTTT

ATCATCAAAC

TCAACCTTCA

GGTAGCCCAG

GTATTTGCCA

AAGGCATAGG

1081

CCTGGACCAC

AGGCACCTGC

CGTCCATCAT

CTGCGGTGAC

TATGAATGGG

TACTTCCCCG

1141

CAGGCACTTC

TTTGGAAGGT

GGATTTCCTG

TGTAGAGAAA

GGTGTTGGAG

TGTCCTCCCA

1201

CCACGATGTC

CACACCTCGA

ACTTTCTGAG

CGATAAGTTT

GTCCATCTCA

AAACCAGAGT

1261

GCCCCAGGGC

GATGATCTTA

TTCACATTTA

GCGTCTTTAG

TTTATCTACT

TCAGGCTGCA

1321

ATGCAGAGAT

TTCATCTTCA

AAGACTAAAT

TTGTCCCTGG

ATTTGAGAGG

AAAGGGGTTT

1381

CCTTTGAAGT

ATATCCAACA

ATCCCCACAA

CCTCACCGCC

AACAGAGAGA

ACTTTAGATG

1441

GCAGAAAAAG

TCCAGATATC

TGATGTGCTA

GAGGCCCCCG

TGCCTTAATG

TTTGCGCTCA

1501

GAATTGGAAA

TTTAACGTTT

CTGAGGAGGG

GATCAATCAG

TCCTTCCACA

CCGTTATCAA

1561

ATTCATGATT

TCCCAGTGCC

ATAGCATCGT

AGCCCAGGAT

GTTCATGAAG

TGTGCCACTT

1621

CAAGGCCTTT

GTAAACGGTG

AACCAGATGG

TGCCCTGGTA

CTGGTCTCCG

GCATCCAAAA

1681

ACAGCACGTT

GGGTTCTTCC

TTGCGGATCT

GCTGCACCTT

GGTAAAGAGC

CGGGCCACGC

1741

CGCCCACACA

CAGGCTGGCG

TTGAGGCACT

TGGTGGAGTC

ATCGCTGGTC

TGCTCTAGCC

1801

GGCTGTGCAC

GTCGTTTGTG

TGCAGGATCG

TGAGCTCCCA

GGCACTGGCT

GCGGGCCACT

1861

GTGGTAGTAG

AGCGCTCAGT

GCGAGAAGCA

GCCACTTGGG

TACCTTAGCG

GCCGCGGGAC

1921

GCATGGCGAT

CGCGGCGGCA

GATCTCCTCG

GTACCGGATC

CAGTCGACGA

ATTCCCGGCC

1981

GCCCTATAGT

GAGTCGTATT

ACAAAATTCT

GACGGTCACT

AAACGAGCTC

TCTATGTCCC

2041

CCCCCCTTAT

TCCCCCCA

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