名称: | pET-NT-HRV3CP |
---|---|
别称: | |
基因长: | |
质粒宿主: | 大肠杆菌 |
质粒用途: | 蛋白表达 |
片段类型: | ORF |
片段物种: | 蛋白酶 |
原核抗性: | Kan |
筛选标记: | |
荧光标记: | |
启动子: | T7 |
复制子: | |
拷贝数: | |
感受态: | DH5a |
温度: | 37度 |
背景载体: | |
正向引物: | |
反向引物: | |
诱导方式: |
1、本平台所有产品仅供科研使用,不能用于临床试验,包括人体口服、注射或者体外用药;
2、小包装质粒以模板价格出售,只保证基因部分测序正确,不保证质粒的表达等实验效果;
3、某些质粒即使是出品公司亦没有完整测过序,如关键部位的序列测序正确,亦认为是正确质粒;
4、小包装质粒产品的售后期为您收到产品之日起3个月,收到质粒后请及时转化操作,过期需重新购买;
5、质粒构建皆收取的是成本费用,所有质粒会分享给其他实验者,保密性质粒请提前告知并缴纳保密费用;
6、因科学研究为探索未知的活动,存在较大不确定性,故在任何情况下淼灵都不承担额外的连带责任;
7、发表[中文论文]请标注:产品名称(产品货号) 由武汉淼灵生物科技有限公司提供;
8、发表[英文论文]请标注:Product Name (Product Item Number) was obtained from MiaoLingBio,China.
操作说明
一、质粒干粉(负20度保存,保质期90天,常温运输)
1、收到干粉质粒后请先5000rpm离心1min,再加入20μl无菌水溶解质粒;
2、将相应的感受态于冰盒上解冻,取2μl质粒加至100μl感受态中,冰浴 30min;
3、42度热激60s,冰浴2min,加入900μl无抗LB培养基,180rpm震荡培养45min;
4、6000rpm离心3min,留100μl上清重悬,再涂至对应抗性的LB平板上;
5、倒置培养过夜后,如菌落过多则稀释质粒转化,如没有菌落则取10ul质粒转化;
6、挑单菌落至对应抗性的LB液体培养基中过夜震荡培养,根据需要提取质粒。
二、液体质粒(负20度保存,保质期90天,冰袋运输)
1、收到液体质粒后请甩动保存管,让液体质粒不要吸附在管壁上;
2、根据实验需求取适量质粒,其余保存于负20度冰箱。
三、甘油菌种(负80度保存,保质期90天,冰袋运输)
1、收到甘油菌种后请甩动保存管,让菌液不要吸附在管壁上;
2、用接种环在固体平板上四区划线,如有抗性就加对应抗性;
3、恒温培养箱倒置培养12~16h;
4、务必挑取单菌落接种于液体培养基中,如有抗性就加对应抗性;
5、摇床震荡培养过夜,根据实验需要培养菌种。
AATTCAGCCG
ATAGCGGAAC
GGGAAGGCGA
CTGGAGTGCC
ATGTCCGGTT
TTCAACAAAC
CATGCAAATG
CTGAATGAGG
GCATCGTTCC
CACTGCGATG
CTGGTTGCCA
ACGATCAGAT
GGCGCTGGGC
GCAATGCGCG
CCATTACCGA
GTCCGGGCTG
CGCGTTGGTG
CGGACATCTC
GGTAGTGGGA
TACGACGATA
CCGAAGACAG
CTCATGTTAT
ATCCCGCCGT
TAACCACCAT
CAAACAGGAT
TTTCGCCTGC
TGGGGCAAAC
CAGCGTGGAC
CGCTTGCTGC
AACTCTCTCA
GGGCCAGGCG
GTGAAGGGCA
ATCAGCTGTT
GCCCGTCTCA
CTGGTGAAAA
GAAAAACCAC
CCTGGCGCCC
AATACGCAAA
CCGCCTCTCC
CCGCGCGTTG
GCCGATTCAT
TAATGCAGCT
GGCACGACAG
GTTTCCCGAC
TGGAAAGCGG
GCAGTGAGCG
CAACGCAATT
AATGTAAGTT
AGCTCACTCA
TTAGGCACCG
GGATCTCGAC
CGATGCCCTT
GAGAGCCTTC
AACCCAGTCA
GCTCCTTCCG
GTGGGCGCGG
GGCATGACTA
GCATGATCGT
GCTCCTGTCG
TTGAGGACCC
GGCTAGGCTG
GCGGGGTTGC
CTTACTGGTT
AGCAGAATGA
ATCACCGATA
CGCGAGCGAA
CGTGAAGCGA
CTGCTGCTGC
AAAACGTCTG
CGACCTGAGC
AACAACATGA
ATGGTCTTCG
GTTTCCGTGT
TTCGTAAAGT
CTGGAAACGC
GGAAGTCAGC
GCCCTGCACC
ATTATGTTCC
GGATCTGCAT
CGCAGGATGC
TGCTGGCTAC
CCTGTGGAAC
ACCTACATCT
GTATTAACGA
AGCGCTGGCA
TTGACCCTGA
GTGATTTTTC
TCTGGTCCCG
CCGCATCCAT
ACCGCCAGTT
GTTTACCCTC
ACAACGTTCC
AGTAACCGGG
CATGTTCATC
ATCAGTAACC
CGTATCGTGA
GCATCCTCTC
TCGTTTCATC
GGTATCATTA
CCCCCATGAA
CAGAAATCCC
CCTTACACGG
AGGCATCAGT
GACCAAACAG
GAAAAAACCG
CCCTTAACAT
GGCCCGCTTT
ATCAGAAGCC
AGACATTAAC
GCTTCTGGAG
AAACTCAACG
AGCTGGACGC
GGATGAACAG
GCAGACATCT
GTGAATCGCT
TCACGACCAC
GCTGATGAGC
TTTACCGCAG
CTGCCTCGCG
CGTTTCGGTG
ATGACGGTGA
AAACCTCTGA
CACATGCAGC
TCCCGGAGAC
GGTCACAGCT
TGTCTGTAAG
CGGATGCCGG
GAGCAGACAA
GCCCGTCAGG
GCGCGTCAGC
GGGTGTTGGC
GGGTGTCGGG
GCGCAGCCAT
GACCCAGTCA
CGTAGCGATA
GCGGAGTGTA
TACTGGCTTA
ACTATGCGGC
ATCAGAGCAG
ATTGTACTGA
GAGTGCACCA
TTGCGGTGTG
AAATACCGCA
CAGATGCGTA
AGGAGAAAAT
ACCGCATCAG
GCGCTCTTCC
GCTTCCTCGC
TCACTGACTC
GCTGCGCTCG
GTCGTTCGGC
TGCGGCGAGC
GGTATCAGCT
CACTCAAAGG
CGGTAATACG
GTTATCCACA
GAATCAGGGG
ATAACGCAGG
AAAGAACATG
TGAGCAAAAG
GCCAGCAAAA
GGCCAGGAAC
CGTAAAAAGG
CCGCGTTGCT
GGCGTTTTTC
CATAGGCTCC
GCCCCCCTGA
CGAGCATCAC
AAAAATCGAC
GCTCAAGTCA
GAGGTGGCGA
AACCCGACAG
GACTATAAAG
ATACCAGGCG
TTTCCCCCTG
GAAGCTCCCT
CGTGCGCTCT
CCTGTTCCGA
CCCTGCCGCT
TACCGGATAC
CTGTCCGCCT
TTCTCCCTTC
GGGAAGCGTG
GCGCTTTCTC
ATAGCTCACG
CTGTAGGTAT
CTCAGTTCGG
TGTAGGTCGT
TCGCTCCAAG
CTGGGCTGTG
TGCACGAACC
CCCCGTTCAG
CCCGACCGCT
GCGCCTTATC
CGGTAACTAT
CGTCTTGAGT
CCAACCCGGT
AAGACACGAC
TTATCGCCAC
TGGCAGCAGC
CACTGGTAAC
AGGATTAGCA
GAGCGAGGTA
TGTAGGCGGT
GCTACAGAGT
TCTTGAAGTG
GTGGCCTAAC
TACGGCTACA
CTAGAAGGAC
AGTATTTGGT
ATCTGCGCTC
TGCTGAAGCC
AGTTACCTTC
GGAAAAAGAG
TTGGTAGCTC
TTGATCCGGC
AAACAAACCA
CCGCTGGTAG
CGGTGGTTTT
TTTGTTTGCA
AGCAGCAGAT
TACGCGCAGA
AAAAAAGGAT
CTCAAGAAGA
TCCTTTGATC
TTTTCTACGG
GGTCTGACGC
TCAGTGGAAC
GAAAACTCAC
GTTAAGGGAT
TTTGGTCATG
AACAATAAAA
CTGTCTGCTT
ACATAAACAG
TAATACAAGG
GGTGTTATGA
GCCATATTCA
ACGGGAAACG
TCTTGCTCTA
GGCCGCGATT
AAATTCCAAC
ATGGATGCTG
ATTTATATGG
GTATAAATGG
GCTCGCGATA
ATGTCGGGCA
ATCAGGTGCG
ACAATCTATC
GATTGTATGG
GAAGCCCGAT
GCGCCAGAGT
TGTTTCTGAA
ACATGGCAAA
GGTAGCGTTG
CCAATGATGT
TACAGATGAG
ATGGTCAGAC
TAAACTGGCT
GACGGAATTT
ATGCCTCTTC
CGACCATCAA
GCATTTTATC
CGTACTCCTG
ATGATGCATG
GTTACTCACC
ACTGCGATCC
CCGGCAAAAC
AGCATTCCAG
GTATTAGAAG
AATATCCTGA
TTCAGGTGAA
AATATTGTTG
ATGCGCTGGC
AGTGTTCCTG
CGCCGGTTGC
ATTCGATTCC
TGTTTGTAAT
TGTCCTTTTA
ACAGTGATCG
CGTATTTCGT
CTCGCTCAGG
CGCAATCACG
AATGAATAAC
GGTTTGGTTG
ATGCGAGTGA
TTTTGATGAC
GAGCGTAATG
GCTGGCCTGT
TGAACAAGTC
TGGAAAGAAA
TGCATAAACT
TTTGCCATTC
TCACCGGATT
CAGTCGTCAC
TCATGGTGAT
TTCTCACTTG
ATAACCTTAT
TTTTGACGAG
GGGAAATTAA
TAGGTTGTAT
TGATGTTGGA
CGAGTCGGAA
TCGCAGACCG
ATACCAGGAT
CTTGCCATCC
TATGGAACTG
CCTCGGTGAG
TTTTCTCCTT
CATTACAGAA
ACGGCTTTTT
CAAAAATATG
GTATTGATAA
TCCTGATATG
AATAAATTGC
AGTTTCATTT
GATGCTCGAT
GAGTTTTTCT
AAGAATTAAT
TCATGAGCGG
ATACATATTT
GAATGTATTT
AGAAAAATAA
ACAAATAGGG
GTTCCGCGCA
CATTTCCCCG
AAAAGTGCCA
CCTAAATTGT
AAGCGTTAAT
ATTTTGTTAA
AATTCGCGTT
AAATTTTTGT
TAAATCAGCT
CATTTTTTAA
CCAATAGGCC
GAAATCGGCA
AAATCCCTTA
TAAATCAAAA
GAATAGACCG
AGATAGGGTT
GAGTGTTGTT
CCAGTTTGGA
ACAAGAGTCC
ACTATTAAAG
AACGTGGACT
CCAACGTCAA
AGGGCGAAAA
ACCGTCTATC
AGGGCGATGG
CCCACTACGT
GAACCATCAC
CCTAATCAAG
TTTTTTGGGG
TCGAGGTGCC
GTAAAGCACT
AAATCGGAAC
CCTAAAGGGA
GCCCCCGATT
TAGAGCTTGA
CGGGGAAAGC
CGGCGAACGT
GGCGAGAAAG
GAAGGGAAGA
AAGCGAAAGG
AGCGGGCGCT
AGGGCGCTGG
CAAGTGTAGC
GGTCACGCTG
CGCGTAACCA
CCACACCCGC
CGCGCTTAAT
GCGCCGCTAC
AGGGCGCGTC
CCATTCGCCA
ATCCGGATAT
AGTTCCTCCT
TTCAGCAAAA
AACCCCTCAA
GACCCGTTTA
GAGGCCCCAA
GGGGTTATGC
TAGTTATTGC
TCAGCGGTGG
CAGCAGCCAA
CTCAGCTTCC
TTTCGGGCTT
TGTTAGCAGC
CGGATCTATC
GATGCATGCC
ATGGTACCCG
GGAGCTCGAA
TTCTTACTGC
TTTTCCACGA
AATACTGTTT
TTTCAGCTGT
GCGCTAAAAC
CCTGACGACC
ATTGCCACCA
ACATGAATGC
CAAAGATTTT
ACCGGTTGCA
CACAGAACAC
CACCACACTG
ACCGGTTTTG
GTTGCATAAT
CATAACGAAT
CATACGATTG
GTCGGGGTAC
TGCTCAGATT
AATCAGACCT
GCCATGGTAA
CCGGACCAAC
TTCCAGGATG
GTGTTGGTAA
AGTTATTGCT
ATGAACAACC
AGGGTTGCAT
CAACACCTTC
CAGATCTTCG
CTGATAAAGC
CACGGATATC
ACGAAATTTT
TCATTACGAT
CCAGGGTCAG
AACGGTCAGT
TCCAGATTAA
TGTTTTCCGG
ATCCACCAGT
TTATACTTGT
CTTTCACGCG
AATTTTCTGA
CCATTAACCA
GAACGTCATC
ACCCGGTTGT
GCATGTGTCG
GAATAACACA
AACACGATCA
TGAATACCCA
GACCGGTAAA
TTCGCCTTTG
GAGGTGGTAA
TGGTCATAAT
GTTTTTACGC
AGCAGGCTCA
GTGCAAATTC
GGTATTCGGA
CCGCTACCAC
CACCACCGCT
ATTACCTGCG
CTAACATCAT
TCATACCTGC
CTGTGCAAAC
ATGCTAACCA
GCTGGGTAAT
TTCGTTAATA
AACGGCTGAT
TAACAACACC
GGTTGTCTGC
AGAAATGCAT
TGCTCATTGC
GCTTGCAATG
CTGCTGGTTT
TGGTGCTCAG
GCTACCGCCA
CCTTCTTCGC
TTGCTGCAAT
TTCTGCCATG
CTGCTTGCAA
ATGCCATATT
CAGTGCCTGC
AGATCATTCG
GACTGGTACG
ACCCTGTGCT
GCCAGGCTCT
GAATGCTCTG
AACCATGCTC
TGTGCAATGG
TGCTCATTTT
GTCCAGCTGG
CTTGCGGTAA
AACCAGGCAT
GCTGCTCAGA
CCCTGCATAA
AGCTATTCAT
AAAGTTTTCT
GCCAGACCAG
GATTGGTCCA
CGGTGTGGTA
TGGCTGTGGT
GATGATGATG
ATGCATATGT
ATATCTCCTT
CTTAAAGTTA
AACAAAATTA
TTTCTAGAGG
GGAATTGTTA
TCCGCTCACA
ATTCCCCTAT
AGTGAGTCGT
ATTAATTTCG
CGGGATCGAG
ATCGATCTCG
ATCCTCTACG
CCGGACGCAT
CGTGGCCGGC
ATCACCGGCG
CCACAGGTGC
GGTTGCTGGC
GCCTATATCG
CCGACATCAC
CGATGGGGAA
GATCGGGCTC
GCCACTTCGG
GCTCATGAGC
GCTTGTTTCG
GCGTGGGTAT
GGTGGCAGGC
CCCGTGGCCG
GGGGACTGTT
GGGCGCCATC
TCCTTGCATG
CACCATTCCT
TGCGGCGGCG
GTGCTCAACG
GCCTCAACCT
ACTACTGGGC
TGCTTCCTAA
TGCAGGAGTC
GCATAAGGGA
GAGCGTCGAG
ATCCCGGACA
CCATCGAATG
GCGCAAAACC
TTTCGCGGTA
TGGCATGATA
GCGCCCGGAA
GAGAGTCAAT
TCAGGGTGGT
GAATGTGAAA
CCAGTAACGT
TATACGATGT
CGCAGAGTAT
GCCGGTGTCT
CTTATCAGAC
CGTTTCCCGC
GTGGTGAACC
AGGCCAGCCA
CGTTTCTGCG
AAAACGCGGG
AAAAAGTGGA
AGCGGCGATG
GCGGAGCTGA
ATTACATTCC
CAACCGCGTG
GCACAACAAC
TGGCGGGCAA
ACAGTCGTTG
CTGATTGGCG
TTGCCACCTC
CAGTCTGGCC
CTGCACGCGC
CGTCGCAAAT
TGTCGCGGCG
ATTAAATCTC
GCGCCGATCA
ACTGGGTGCC
AGCGTGGTGG
TGTCGATGGT
AGAACGAAGC
GGCGTCGAAG
CCTGTAAAGC
GGCGGTGCAC
AATCTTCTCG
CGCAACGCGT
CAGTGGGCTG
ATCATTAACT
ATCCGCTGGA
TGACCAGGAT
GCCATTGCTG
TGGAAGCTGC
CTGCACTAAT
GTTCCGGCGT
TATTTCTTGA
TGTCTCTGAC
CAGACACCCA
TCAACAGTAT
TATTTTCTCC
CATGAAGACG
GTACGCGACT
GGGCGTGGAG
CATCTGGTCG
CATTGGGTCA
CCAGCAAATC
GCGCTGTTAG
CGGGCCCATT
AAGTTCTGTC
TCGGCGCGTC
TGCGTCTGGC
TGGCTGGCAT
AAATATCTCA
CTCGCAATCA