名称: | pCRISPomyces-1 |
---|---|
别称: | Plasmid#61736 |
基因长: | |
质粒宿主: | 大肠杆菌 |
质粒用途: | 基因编辑 |
片段类型: | |
片段物种: | |
原核抗性: | Apr |
筛选标记: | |
荧光标记: | |
启动子: | |
复制子: | |
拷贝数: | |
感受态: | DH5a |
温度: | 37度 |
背景载体: | |
正向引物: | |
反向引物: | |
诱导方式: |
1、本平台所有产品仅供科研使用,不能用于临床试验,包括人体口服、注射或者体外用药;
2、小包装质粒以模板价格出售,只保证基因部分测序正确,不保证质粒的表达等实验效果;
3、某些质粒即使是出品公司亦没有完整测过序,如关键部位的序列测序正确,亦认为是正确质粒;
4、小包装质粒产品的售后期为您收到产品之日起3个月,收到质粒后请及时转化操作,过期需重新购买;
5、质粒构建皆收取的是成本费用,所有质粒会分享给其他实验者,保密性质粒请提前告知并缴纳保密费用;
6、因科学研究为探索未知的活动,存在较大不确定性,故在任何情况下淼灵都不承担额外的连带责任;
7、发表[中文论文]请标注:产品名称(产品货号) 由武汉淼灵生物科技有限公司提供;
8、发表[英文论文]请标注:Product Name (Product Item Number) was obtained from MiaoLingBio,China.
操作说明
一、质粒干粉(负20度保存,保质期90天,常温运输)
1、收到干粉质粒后请先5000rpm离心1min,再加入20μl无菌水溶解质粒;
2、将相应的感受态于冰盒上解冻,取2μl质粒加至100μl感受态中,冰浴 30min;
3、42度热激60s,冰浴2min,加入900μl无抗LB培养基,180rpm震荡培养45min;
4、6000rpm离心3min,留100μl上清重悬,再涂至对应抗性的LB平板上;
5、倒置培养过夜后,如菌落过多则稀释质粒转化,如没有菌落则取10ul质粒转化;
6、挑单菌落至对应抗性的LB液体培养基中过夜震荡培养,根据需要提取质粒。
二、液体质粒(负20度保存,保质期90天,冰袋运输)
1、收到液体质粒后请甩动保存管,让液体质粒不要吸附在管壁上;
2、根据实验需求取适量质粒,其余保存于负20度冰箱。
三、甘油菌种(负80度保存,保质期90天,冰袋运输)
1、收到甘油菌种后请甩动保存管,让菌液不要吸附在管壁上;
2、用接种环在固体平板上四区划线,如有抗性就加对应抗性;
3、恒温培养箱倒置培养12~16h;
4、务必挑取单菌落接种于液体培养基中,如有抗性就加对应抗性;
5、摇床震荡培养过夜,根据实验需要培养菌种。
GCCCTGCAGG
CGGAAGTCAG
GTAGACACGA
CTTCCGCTAG
TCCTTGCAAG
GTCTGCTGAC
GTGAGGCGGG
GCGGTCGTTT
TTGACCGCCC
TGCCTTCGTC
ATGTAGGCTC
GCTCGCTGTG
CCTGGCGTGT
CATCAGACGC
CCAGGTCCCG
GTGCCGTGAG
GCCCGGGCCA
TCGAGCCGGT
GGTACGTGGC
TGCGGTCCCC
TTGTGAGGGC
TGCGCGCCGT
GTGCTGTCCG
GCGCGCACAG
CCTTGAATCC
ACCCGCGGGG
GCCGGCCGGT
CTCCGTGAGC
TCGAGTAGAC
GACGGAGACG
TAATGGACAA
GAAGTACAGC
ATCGGCCTGG
ACATCGGCAC
CAACAGCGTG
GGCTGGGCGG
TCATCACCGA
CGAGTACAAG
GTCCCCTCCA
AGAAGTTCAA
GGTCCTGGGC
AACACCGACC
GGCACTCGAT
CAAGAAGAAC
CTGATCGGCG
CCCTGCTCTT
CGACAGCGGC
GAAACCGCCG
AGGCGACCCG
CCTGAAGCGG
ACCGCCCGTC
GCCGCTACAC
CCGGCGCAAG
AACCGCATCT
GCTACCTGCA
GGAGATCTTC
TCCAACGAGA
TGGCCAAGGT
CGACGACTCG
TTCTTCCACC
GGCTCGAGGA
GAGCTTCCTG
GTGGAGGAGG
ACAAGAAGCA
CGAGCGCCAC
CCGATCTTCG
GCAACATCGT
CGACGAGGTG
GCCTACCACG
AGAAGTACCC
CACCATCTAC
CACCTCCGCA
AGAAGCTGGT
CGACTCGACC
GACAAGGCGG
ACCTGCGGCT
CATCTACCTG
GCCCTCGCGC
ACATGATCAA
GTTCCGCGGC
CACTTCCTCA
TCGAGGGCGA
CCTGAACCCG
GACAACTCCG
ACGTCGACAA
GCTCTTCATC
CAGCTGGTGC
AGACCTACAA
CCAGCTGTTC
GAGGAGAACC
CCATCAACGC
CAGCGGCGTC
GACGCCAAGG
CGATCCTCTC
CGCGCGCCTG
AGCAAGTCCC
GGCGCCTGGA
GAACCTCATC
GCCCAGCTGC
CGGGCGAGAA
GAAGAACGGC
CTCTTCGGCA
ACCTGATCGC
GCTGTCGCTC
GGCCTGACCC
CCAACTTCAA
GAGCAACTTC
GACCTGGCCG
AGGACGCGAA
GCTCCAGCTG
TCCAAGGACA
CCTACGACGA
CGACCTGGAC
AACCTGCTCG
CCCAGATCGG
CGACCAGTAC
GCGGACCTCT
TCCTGGCCGC
GAAGAACCTC
TCGGACGCCA
TCCTGCTCAG
CGACATCCTG
CGGGTCAACA
CCGAGATCAC
CAAGGCCCCG
CTGTCGGCGA
GCATGATCAA
GCGGTACGAC
GAGCACCACC
AGGACCTGAC
CCTGCTCAAG
GCCCTCGTGC
GCCAGCAGCT
GCCCGAGAAG
TACAAGGAGA
TCTTCTTCGA
CCAGTCCAAG
AACGGCTACG
CCGGCTACAT
CGACGGCGGC
GCGTCGCAGG
AGGAGTTCTA
CAAGTTCATC
AAGCCGATCC
TGGAGAAGAT
GGACGGCACC
GAGGAGCTGC
TCGTCAAGCT
GAACCGCGAG
GACCTGCTCC
GCAAGCAGCG
GACCTTCGAC
AACGGCTCCA
TCCCGCACCA
GATCCACCTG
GGCGAGCTCC
ACGCCATCCT
CCGGCGCCAG
GAGGACTTCT
ACCCCTTCCT
GAAGGACAAC
CGCGAGAAGA
TCGAGAAGAT
CCTGACCTTC
CGGATCCCGT
ACTACGTCGG
CCCCCTGGCC
CGCGGCAACT
CCCGGTTCGC
GTGGATGACC
CGGAAGTCGG
AGGAAACCAT
CACCCCGTGG
AACTTCGAGG
AGGTCGTGGA
CAAGGGCGCC
TCCGCGCAGT
CGTTCATCGA
GCGCATGACC
AACTTCGACA
AGAACCTCCC
GAACGAGAAG
GTCCTGCCCA
AGCACAGCCT
GCTCTACGAG
TACTTCACCG
TGTACAACGA
GCTGACCAAG
GTCAAGTACG
TGACCGAGGG
CATGCGGAAG
CCGGCCTTCC
TGTCCGGCGA
GCAGAAGAAG
GCGATCGTCG
ACCTGCTCTT
CAAGACCAAC
CGCAAGGTCA
CCGTGAAGCA
GCTGAAGGAG
GACTACTTCA
AGAAGATCGA
GTGCTTCGAC
TCCGTCGAGA
TCTCGGGCGT
GGAGGACCGC
TTCAACGCCT
CCCTGGGCAC
CTACCACGAC
CTGCTCAAGA
TCATCAAGGA
CAAGGACTTC
CTCGACAACG
AGGAGAACGA
GGACATCCTG
GAGGACATCG
TCCTCACCCT
GACCCTCTTC
GAGGACCGCG
AGATGATCGA
GGAGCGGCTC
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CCCACCTGTT
CGACGACAAG
GTGATGAAGC
AGCTGAAGCG
GCGCCGGTAC
ACCGGCTGGG
GCCGCCTCTC
CCGGAAGCTG
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TGGACTTCCT
CAAGTCCGAC
GGCTTCGCCA
ACCGCAACTT
CATGCAGCTC
ATCCACGACG
ACTCGCTGAC
CTTCAAGGAG
GACATCCAGA
AGGCCCAGGT
GTCCGGCCAG
GGCGACAGCC
TCCACGAGCA
CATCGCCAAC
CTGGCGGGCT
CCCCGGCGAT
CAAGAAGGGC
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CCGTCAAGGT
CGTGGACGAG
CTGGTCAAGG
TGATGGGCCG
CCACAAGCCC
GAGAACATCG
TGATCGAGAT
GGCCCGGGAG
AACCAGACCA
CCCAGAAGGG
CCAGAAGAAC
TCCCGCGAGC
GGATGAAGCG
CATCGAGGAG
GGCATCAAGG
AGCTCGGCTC
GCAGATCCTG
AAGGAGCACC
CGGTCGAGAA
CACCCAGCTC
CAGAACGAGA
AGCTGTACCT
CTACTACCTG
CAGAACGGCC
GCGACATGTA
CGTGGACCAG
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TCAACCGGCT
GAGCGACTAC
GACGTCGACC
ACATCGTGCC
GCAGTCCTTC
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CCGACAAGAA
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TCCGACAACG
TGCCCTCGGA
GGAGGTCGTG
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GCGCCAGCTG
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TTCGACAACC
TGACCAAGGC
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GGCCTGTCGG
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GCAAGCTGGT
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CGCAAGGACT
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CAAGGTCCGG
GAGATCAACA
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ACGCCGTCGT
GGGCACCGCG
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GCTGGAGTCC
GAGTTCGTCT
ACGGCGACTA
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AGATGATCGC
CAAGTCGGAG
CAGGAGATCG
GCAAGGCCAC
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TTCTTCTACA
GCAACATCAT
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AAGACCGAGA
TCACCCTGGC
CAACGGCGAG
ATCCGCAAGC
GGCCCCTGAT
CGAAACCAAC
GGCGAAACCG
GCGAGATCGT
CTGGGACAAG
GGCCGCGACT
TCGCCACCGT
CCGGAAGGTG
CTGTCCATGC
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AAAACCGAGG
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CGGCTTCAGC
AAGGAGTCCA
TCCTCCCCAA
GCGCAACTCG
GACAAGCTGA
TCGCCCGGAA
GAAGGACTGG
GACCCGAAGA
AGTACGGCGG
CTTCGACAGC
CCCACCGTCG
CCTACTCCGT
GCTGGTCGTG
GCGAAGGTCG
AGAAGGGCAA
GAGCAAGAAG
CTGAAGTCCG
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GCTCGGCATC
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GTTCGAGAAG
AACCCGATCG
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GGCCAAGGGC
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TCAAGAAGGA
CCTCATCATC
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AGTACTCGCT
GTTCGAGCTC
GAGAACGGCC
GCAAGCGGAT
GCTCGCCAGC
GCGGGCGAGC
TGCAGAAGGG
CAACGAGCTG
GCCCTCCCGT
CCAAGTACGT
CAACTTCCTG
TACCTCGCGT
CCCACTACGA
GAAGCTGAAG
GGCTCGCCCG
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GCACTACCTG
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TCGAGCAGAT
CTCGGAGTTC
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TCATCCTGGC
CGACGCGAAC
CTCGACAAGG
TGCTGTCCGC
CTACAACAAG
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AGCCGATCCG
GGAGCAGGCG
GAGAACATCA
TCCACCTGTT
CACCCTCACC
AACCTGGGCG
CCCCCGCCGC
GTTCAAGTAC
TTCGACACCA
CCATCGACCG
CAAGCGGTAC
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AGGAGGTCCT
CGACGCGACC
CTGATCCACC
AGTCCATCAC
CGGCCTGTAC
GAAACCCGCA
TCGACCTCTC
CCAGCTCGGC
GGCGACTGAG
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TACGCGTTCC
CCGCAAAAGC
GGCCTTTGAC
TCCCTGCAAG
CCTCAGCGAC
CGAATATATC
GGTTATGCGT
GGGCGATGGT
TGTTGTCATT
GTCGGCGCAA
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CTTTTTTTCC
GCCCGCGGGA
CGTGACGAGC
GGCACGACTC
GACGACTCCG
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ACGCTGTCCG
TCGCGCCGGG
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CACCGTGCCC
GCGCCGTCGG
GCCCTCGCGC
GTGCACTCGG
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TGCACGGGGT
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GCGGACTGCC
GCCGTGCGGA
GGACCGGGGC
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TCGGTGCGGG
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CGGCCGTCCT
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TGCCGGTCAG
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GTGGCACCGA
GTCGGTGCTT
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CTACGGGCAC
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CCGTCGGCTG
TGCGACACGG
ACGGATCGGG
CGAACTGGCC
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GCTGTACGGC
GCGCACCGGG
TGCGGAGCCC
CTCGGCGAGC
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GCCAGATAAG
GCTTGCAGCA
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GGGTTTTAGA
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CCCAAAAGTC
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CTACAGGGCG
CGTCCCATTC
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CGCTATTACG
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CAGGGTTTTC
CCAGTCACGA
CGTTGTAAAA
CGACGGCCAG
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CGCTTTCCAC
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TCTAGAGGCC
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AAAAGGCCGC
GTTGCTGGCG
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CCCCTGGAAG
CTCCCTCGTG
CGCTCTCCTG
TTCCGACCCT
GCCGCTTACC
GGATACCTGT
CCGCCTTTCT
CCCTTCGGGA
AGCGTGGCGC
TTTCTCATAG
CTCACGCTGT
AGGTATCTCA
GTTCGGTGTA
GGTCGTTCGC
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CGAACCCCCC
GTTCAGCCCG
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CTTATCCGGT
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CGCCACTGGC
AGCAGCCACT
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GAGGTATGTA
GGCGGTGCTA
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CCTAACTACG
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GCAACAGTGC
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GCTATGATCG
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GTGCTGCTGG
TCCACAGCTC
CTTCCGTAGC
GTCCGGCCCC
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GCCACTTGGA
CTGATCGAGG
CCCTGCGTGC
TGCGCTGGGT
CCGGGAGGGA
CGCTCGTCAT
GCCCTCGTGG
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ACGACGAGCC
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GCCACGTCGC
CCGTTACACC
GGACCTTGGA
GTTGTCTCTG
ACACATTCTG
GCGCCTGCCA
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GCAGCGCCCA
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TTTGCGGCAG
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GGCAGAGCAG
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GGCGTGGGAC
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CAGCCCTGGG
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CGAGATCCGT
TGATCTTCCT
GCATCCGCCA
GAGGCGGGAT
GCGAAGAATG
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CGCCAGTCGA
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CTCAGGGGAG
CCACCCCAGA
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ACGAACTGCT
GTTTCAGCCT
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GGAGGCTGGT
CCTTTACCCT
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GGCATCAGGG
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GCACCGGTCC
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CCGCCGAACG
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GGACTGGGCG
CGGGATTCCA
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GCCCTACGCG
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CGACGCGGAG
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CGCTTCCGAA
GGCTGATCGT
CGGGCGGATC
GCCTCCTTCT
TCGGCTGACG
CACTCGGTCG
AGCGAAGCGG
CCAGCTCCTC
CGTGCGGGCC
TCGTTGGCCT
TCCGGCGCGC
CTCGCGGAAA
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CCATGCGGTC
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CCGGCCTTGA
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GCCCTTGGTC
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TGGCCCTTGC
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GCAACCGGGC
CGGTCGCACG
TCTTGCTGAC
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GGCCCAGGCT
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CGTCGTGGAA
CGCGGCCTGG
GCGTCCGGGC
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CTCGAAGGCC
CGCTCGTAGC
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CGCATCGTGC
GCCAGCGGCG
GCCGGACGAG
CCGTACGCGC
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GCGAGCTGCA
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CCGGCGGGGC
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GCATGCTGCG
CCAGTTGCGG
GGGCGGCGAG
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CGCGCTCGCG
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GATCAGGGCG
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TGGCCGGCGC
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GGCGGCGCGG
GCGGCGGCGT
CGGCCAGGGC
GCGGGCGAGA
CCGGCTACGG
CGGGCTTGAT
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TCACTGTCCC
TTATTCGCAC
CTGGCGGTGC
TCAACGGGAA
TCCTGCTCTG
CGAGGCTGGC
CGGCTACCGC
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