名称: | pGEM-Ucp1-A8G-m(有突变) |
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别称: | NM_009463 |
基因长: | |
质粒宿主: | 大肠杆菌 |
质粒用途: | 基因模板 |
片段类型: | cDNA |
片段物种: | 小鼠 |
原核抗性: | Amp |
筛选标记: | |
荧光标记: | |
启动子: | |
复制子: | pUC |
拷贝数: | |
感受态: | DH5a |
温度: | 37度 |
背景载体: | |
正向引物: | M13F:TGTAAAACGACGGCCAGT |
反向引物: | M13R:CAGGAAACAGCTATGACC |
诱导方式: |
1、本平台所有产品仅供科研使用,不能用于临床试验,包括人体口服、注射或者体外用药;
2、小包装质粒以模板价格出售,只保证基因部分测序正确,不保证质粒的表达等实验效果;
3、某些质粒即使是出品公司亦没有完整测过序,如关键部位的序列测序正确,亦认为是正确质粒;
4、小包装质粒产品的售后期为您收到产品之日起3个月,收到质粒后请及时转化操作,过期需重新购买;
5、质粒构建皆收取的是成本费用,所有质粒会分享给其他实验者,保密性质粒请提前告知并缴纳保密费用;
6、因科学研究为探索未知的活动,存在较大不确定性,故在任何情况下淼灵都不承担额外的连带责任;
7、发表[中文论文]请标注:产品名称(产品货号) 由武汉淼灵生物科技有限公司提供;
8、发表[英文论文]请标注:Product Name (Product Item Number) was obtained from MiaoLingBio,China.
操作说明
一、质粒干粉(负20度保存,保质期90天,常温运输)
1、收到干粉质粒后请先5000rpm离心1min,再加入20μl无菌水溶解质粒;
2、将相应的感受态于冰盒上解冻,取2μl质粒加至100μl感受态中,冰浴 30min;
3、42度热激60s,冰浴2min,加入900μl无抗LB培养基,180rpm震荡培养45min;
4、6000rpm离心3min,留100μl上清重悬,再涂至对应抗性的LB平板上;
5、倒置培养过夜后,如菌落过多则稀释质粒转化,如没有菌落则取10ul质粒转化;
6、挑单菌落至对应抗性的LB液体培养基中过夜震荡培养,根据需要提取质粒。
二、液体质粒(负20度保存,保质期90天,冰袋运输)
1、收到液体质粒后请甩动保存管,让液体质粒不要吸附在管壁上;
2、根据实验需求取适量质粒,其余保存于负20度冰箱。
三、甘油菌种(负80度保存,保质期90天,冰袋运输)
1、收到甘油菌种后请甩动保存管,让菌液不要吸附在管壁上;
2、用接种环在固体平板上四区划线,如有抗性就加对应抗性;
3、恒温培养箱倒置培养12~16h;
4、务必挑取单菌落接种于液体培养基中,如有抗性就加对应抗性;
5、摇床震荡培养过夜,根据实验需要培养菌种。
GCCATTAGGT
GACCTATAGA
ATACTCAAGC
TATGCATCCA
ACGCGTTGGG
AGCTCTCCCA
TATGGTCGAC
CTGCAGGCGG
CCGCACTAGT
GATCCCCCCC
CCCCCCGGCC
GGGCAATCTG
GGCTTAACGG
GTCCTCCCTG
CCCGAGCAAG
AGGAAGGGAC
GCTCACCTTT
GAGCTGCTCC
ACAGCGCCGC
CTCTGCACTG
GCACTACCTA
GCCCAGGTGG
CTCTGCAGGA
GTCCGAAGTC
GCGGGTTTCG
TACCCGCATC
AGGCAACAGT
GCCACTGTTG
TCTTCAGGGC
TGAGTCCTTT
TGTTCTTGCA
CTCACGCCTC
TCTGCCCTCC
GAGCCAGGAT
GGTGAGCCCG
ACAACTTCCG
AAGTGCAACC
CACCATGGGG
GTCAAGATCT
TCTCAGCCGG
AGTTTCAGCT
TGCCTGGCAG
ATATCATCAC
CTTCCCGCTG
GACACTGCCA
AAGTCCGCCT
TCAGATCCAA
GGTGAAGGCC
AGGCTTCCAG
TACCATTAGG
TATAAAGGTG
TCCTAGGGAC
CATCACCACC
CTGGCAAAAA
CAGAAGGATT
GCCGAAACTG
TACAGCGGTC
TGCCTGCGGG
CATTCAGAGG
CAAATCAGCT
TTGCCTCACT
CAGGATTGGC
CTCTACGACT
CAGTCCAAGA
GTACTTCTCT
TCAGGGAGAG
AAACACCTGC
CTCTCTCGGA
AACAAGATCT
CAGCCGGCTT
AATGACTGGA
GGTGTGGCAG
TGTTCATTGG
GCAGCCTACA
GAGGTCGTGA
AGGTCAGAAT
GCAAGCCCAG
AGCCATCTGC
ATGGGATCAA
ACCCCGCTAC
ACGGGGACCT
ACAATGCTTA
CAGAGTTATA
GCCACCACAG
AAAGCTTGTC
AACACTTTGG
AAAGGGACGA
CCCCTAATCT
AATGAGAAAT
GTCATCATCA
ATTGTACAGA
GCTGGTAACA
TATGACCTCA
TGAAGGGGGC
CCTTGTAAAC
AACAAAATAC
TGGCAGATGA
CGTCCCCTGC
CATTTACTGT
CAGCTCTTGT
TGCCGGGTTT
TGCACCACAC
TCCTGGCCTC
TCCAGTGGAT
GTGGTAAAAA
CAAGATTCAT
CAACTCTCTG
CCAGGACAGT
ATCCAAGCGT
ACCAAGCTGT
GCGATGTCCA
TGTACACCAA
GGAAGGACCG
ACGGCCTTTT
TCAAAGGGTT
TGTGGCTTCT
TTTCTGCGAC
TCGGGTCCTG
GAACGTCATC
ATGTTTGTGT
GCTTTGAACA
GCTGAAAAAA
GAGCTGATGA
AGTCCAGGCA
GACAGTGGAT
TGTACCACAT
AAGCAACTTG
GAGGAAGAGA
TACTGAACAT
CATTGGGCTT
CTATGCTGGG
AGACCACGAA
TAAAACCAAC
CAAAAAAAAA
AAAAAAAAAA
AAAATCCCGC
GGCCATGGCG
GCCGGGAGCA
TGCGACGTCG
GGCCCAATTC
GCCCTATAGT
GAGTCGTATT
ACAATTCACT
GGCCGTCGTT
TTACAACGTC
GTGACTGGGA
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GTTACCCAAC
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CCAGCTGGCG
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GCGCAGCGTG
ACCGCTACAC
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CCTAGCGCCC
GCTCCTTTCG
CTTTCTTCCC
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GCC