名称: | pT7-6×His-ase2(ecoli)-Cas7-Cas5-Cas6e-RSFori |
---|---|
别称: | |
基因长: | |
质粒宿主: | 大肠杆菌 |
质粒用途: | 蛋白表达 |
片段类型: | ORF,CRISPR |
片段物种: | 大肠杆菌 |
原核抗性: | Kan |
筛选标记: | |
荧光标记: | |
启动子: | T7 |
复制子: | RSF |
拷贝数: | 低 |
感受态: | DH5a |
温度: | 37度 |
背景载体: | |
正向引物: | |
反向引物: | |
诱导方式: |
1、本平台所有产品仅供科研使用,不能用于临床试验,包括人体口服、注射或者体外用药;
2、小包装质粒以模板价格出售,只保证基因部分测序正确,不保证质粒的表达等实验效果;
3、某些质粒即使是出品公司亦没有完整测过序,如关键部位的序列测序正确,亦认为是正确质粒;
4、小包装质粒产品的售后期为您收到产品之日起3个月,收到质粒后请及时转化操作,过期需重新购买;
5、质粒构建皆收取的是成本费用,所有质粒会分享给其他实验者,保密性质粒请提前告知并缴纳保密费用;
6、因科学研究为探索未知的活动,存在较大不确定性,故在任何情况下淼灵都不承担额外的连带责任;
7、发表[中文论文]请标注:产品名称(产品货号) 由武汉淼灵生物科技有限公司提供;
8、发表[英文论文]请标注:Product Name (Product Item Number) was obtained from MiaoLingBio,China.
操作说明
一、质粒干粉(负20度保存,保质期90天,常温运输)
1、收到干粉质粒后请先5000rpm离心1min,再加入20μl无菌水溶解质粒;
2、将相应的感受态于冰盒上解冻,取2μl质粒加至100μl感受态中,冰浴 30min;
3、42度热激60s,冰浴2min,加入900μl无抗LB培养基,180rpm震荡培养45min;
4、6000rpm离心3min,留100μl上清重悬,再涂至对应抗性的LB平板上;
5、倒置培养过夜后,如菌落过多则稀释质粒转化,如没有菌落则取10ul质粒转化;
6、挑单菌落至对应抗性的LB液体培养基中过夜震荡培养,根据需要提取质粒。
二、液体质粒(负20度保存,保质期90天,冰袋运输)
1、收到液体质粒后请甩动保存管,让液体质粒不要吸附在管壁上;
2、根据实验需求取适量质粒,其余保存于负20度冰箱。
三、甘油菌种(负80度保存,保质期90天,冰袋运输)
1、收到甘油菌种后请甩动保存管,让菌液不要吸附在管壁上;
2、用接种环在固体平板上四区划线,如有抗性就加对应抗性;
3、恒温培养箱倒置培养12~16h;
4、务必挑取单菌落接种于液体培养基中,如有抗性就加对应抗性;
5、摇床震荡培养过夜,根据实验需要培养菌种。
GGGGAATTGT
GAGCGGATAA
CAATTCCCCT
GTAGAAATAA
TTTTGTTTAA
CTTTAATAAG
GAGATATACC
ATGGGCAGCA
GCCATCACCA
TCATCACCAC
AGCCAGGATC
CGAATTCGAT
GGCTGATGAA
ATTGATGCAA
TGGCTTTATA
TCGAGCCTGG
CAACAACTGG
ATAATGGATC
ATGTGCGCAA
ATTAGACGTG
TTTCAGAACC
TGATGAATTA
CGCGATATCC
CTGCGTTTTA
TAGGCTGGTG
CAACCTTTTG
GTTGGGAAAA
CCCACGTCAC
CAGCAGGCTC
TTTTGCGCAT
GGTGTTTTGC
CTGAGCGCAG
GAAAGAATGT
CATCCGACAT
CAGGACAAAA
AATCGGAGCA
AACAACAGGT
ATCTCGTTGG
GAAGAGCTTT
AGCCAATAGT
GGAAGAATTA
ACGAGCGCCG
TATCTTTCAA
TTAATTCGGG
CTGACAGAAC
AGCCGATATG
GTCCAGTTAC
GTCGATTACT
TACTCACGCC
GAACCCGTAC
TTGACTGGCC
ATTAATGGCC
AGGATGTTGA
CCTGGTGGGG
AAAGCGCGAA
CGCCAGCAAC
TTCTGGAAGA
TTTTGTATTG
ACCACAAACA
AAAATGCGAA
GCTTATGTCT
AACTTTATCA
ATATTCATGT
TCTGATCTCT
CACAGCCCTT
CATGTCTGAA
CCGCGACGAT
ATGAACATGC
AGAAAGACGC
TATTTTCGGC
GGCAAAAGAC
GAGTAAGAAT
TTCAAGTCAA
AGCCTTAAAC
GTGCGATGCG
TAAAAGTGGT
TATTACGCAC
AAAATATTGG
TGAATCCAGT
CTCAGAACCA
TTCATCTTGC
ACAATTACGT
GATGTTCTTC
GGCAAAAACT
TGGTGAACGT
TTTGACCAAA
AAATCATCGA
TAAGACATTA
GCGCTGCTCT
CCGGTAAATC
AGTTGATGAA
GCCGAAAAGA
TTTCTGCCGA
TGCGGTTACT
CCCTGGGTTG
TGGGAGAAAT
AGCCTGGTTC
TGTGAGCAGG
TTGCAAAAGC
AGAGGCTGAT
AATCTGGATG
ATAAAAAGCT
GCTCAAAGTT
CTTAAGGAAG
ATATTGCCGC
CATACGTGTG
AATTTACAGC
AGGGTGTTGA
TATTGCGCTT
AGTGGAAGAA
TGGCAACCAG
CGGCATGATG
ACTGAGTTGG
GAAAAGTTGA
TGGTGCAATG
TCCATTGCGC
ATGCGATCAC
TACTCATCAG
GTTGATTCTG
ATATTGACTG
GTTCACCGCT
GTAGATGATT
TACAGGAACA
AGGTTCTGCA
CATCTGGGAA
CTCAGGAATT
TTCATCGGGT
GTTTTTTATC
GTTATGCCAA
CATTAACCTC
GCTCAACTTC
AGGAAAATTT
AGGTGGTGCC
TCCAGGGAGC
AGGCTCTGGA
AATTGCAACC
CATGTTGTTC
ATATGCTGGC
AACAGAGGTC
CCTGGAGCAA
AACAGCGTAC
TTATGCCGCT
TTTAACCCTG
CGGATATGGT
AATGGTTAAT
TTCTCCGATA
TGCCACTTTC
TATGGCAAAT
GCTTTTGAAA
AAGCGGTTAA
AGCGAAAGAT
GGCTTTTTGC
AACCGTCTAT
ACAGGCGTTT
AATCAATATT
GGGATCGCGT
TGCCAATGGA
TATGGTCTGA
ACGGAGCTGC
TGCGCAATTC
AGCTTATCTG
ATGTAGACCC
AATTACTGCT
CAAGTTAAAC
AAATGCCTAC
TTTAGAACAG
TTAAAATCCT
GGGTTCGTAA
TAATGGCGAG
GCGTGAGCGG
CCGCATAATG
CTTAAGTCGA
ACAGAAAGTA
ATCGTATTGT
ACACGGCCGC
ATAATCGAAA
TTAATACGAC
TCACTATAGG
GGAATTGTGA
GCGGATAACA
ATTCCCCATC
TTAGTATATT
AGTTAAGTAT
AAGAAGGAGA
TATACATATG
AGATCTTATT
TGATCTTGCG
GCTTGCTGGG
CCAATGCAAG
CCTGGGGGCA
GCCGACCTTT
GAAGGAACGC
GACCTACCGG
AAGATTTCCG
ACCCGAAGCG
GGTTATTAGG
GCTACTCGGG
GCTTGTCTTG
GGATCCAACG
TGATGATACT
TCTTCATTAC
AGGCGTTATC
AGAGAGTGTG
CAATTTGCAG
TGCGCTGCGA
TGAACTCATT
CTTGACGATC
GTCGTGTGTC
TGTAACGGGG
TTGCGTGATT
ACCATACAGT
CCTTGGAGCG
CGAGAAGATT
ACCGTGGTTT
GAAAAGTCAT
GAAACGATTC
AAACATGGCG
CGAATATTTA
TGTGATGCCT
CCTTTACCGT
CGCTCTCTGG
TTAACACCCC
ATGCAACGAT
GGTTATCTCA
GAACTTGAAA
AAGCAGTATT
AAAGCCTCGG
TATACACCTT
ACCTGGGGCG
GAGAAGTTGC
CCACTAACAC
ACCCGCTTTT
TTTGGGGACA
TGTCAGGCAT
CGGATCCTCA
GAAGGCGCTA
TTAAATTATG
AGCCCGTTGG
CGGCGATATA
TATAGTGAGG
AATCAGTTAC
AGGGCATCAT
TTAAAATTTA
CGGCGCGCGA
CGAACCGATG
ATCACCTTGC
CTCGACAATT
TGCTTCCCGA
GAATGGTATG
TGATTAAAGG
AGGTATGGAT
GTATCTCAGG
GTACCATGTA
TCTCAGTAAA
GTCATCATTG
CCAGGGCCTG
GAGCAGGGAT
CTTTACCAAC
TTCACCAGGG
ATTATGGCAT
TTATTTCCAA
ACAGACCGGA
TGCTGCTCGT
GATTTTCTTT
TTCATGTTGA
GAAGCGAAAC
ACACCAGAAG
GCTGTCATGT
TTTATTGCAG
TCAGCGCAAA
TGCCTGTTTC
AACTGCCGTT
GCGACAGTCA
TTAAAACTAA
ACAGGTTGAA
TTTCAACTTC
AGGTTGGTGT
TCCACTCTAT
TTTCGGCTTC
GGGCAAATCC
GATCAAAACT
ATTCTCGACA
ATCAAAAGCG
CCTGGACAGT
AAAGGGAATA
TTAAACGCTG
TCGGGTTCCG
TTAATAAAAG
AAGCAGAACA
AATCGCGTGG
TTGCAACGTA
AATTGGGCAA
TGCGGCGCGC
GTTGAAGATG
TGCATCCCAT
ATCGGAACGG
CCACAGTATT
TTTCTGGTGA
TGGTAAAAGT
GGAAAGATCC
AAACGGTTTG
CTTTGAAGGT
GTGCTCACCA
TCAACGACGC
GCCAGCGTTA
ATAGATCTTG
TACAGCAAGG
TATTGGGCCA
GCTAAATCGA
TGGGATGTGG
CTTGCTATCT
TTGGCTCCAC
TGCTCGAGTC
TGGTAAAGAA
ACCGCTGCTG
CGAAATTTGA
ACGCCAGCAC
ATGGACTCGT
CTACTAGCGC
AGCTTAATTA
ACCTAGGCTG
CTGCCACCGC
TGAGCAATAA
CTAGCATAAC
CCCTTGGGGC
CTCTAAACGG
GTCTTGAGGG
GTTTTTTGCT
GAAACCTCAG
GCATTTGAGA
AGCACACGGT
CACACTGCTT
CCGGTAGTCA
ATAAACCGGT
AAACCAGCAA
TAGACATAAG
CGGCTATTTA
ACGACCCTGC
CCTGAACCGA
CGACAAGCTG
ACGACCGGGT
CTCCGCAAGT
GGCACTTTTC
GGGGAAATGT
GCGCGGAACC
CCTATTTGTT
TATTTTTCTA
AATACATTCA
AATATGTATC
CGCTCATGAA
TTAATTCTTA
GAAAAACTCA
TCGAGCATCA
AATGAAACTG
CAATTTATTC
ATATCAGGAT
TATCAATACC
ATATTTTTGA
AAAAGCCGTT
TCTGTAATGA
AGGAGAAAAC
TCACCGAGGC
AGTTCCATAG
GATGGCAAGA
TCCTGGTATC
GGTCTGCGAT
TCCGACTCGT
CCAACATCAA
TACAACCTAT
TAATTTCCCC
TCGTCAAAAA
TAAGGTTATC
AAGTGAGAAA
TCACCATGAG
TGACGACTGA
ATCCGGTGAG
AATGGCAAAA
GTTTATGCAT
TTCTTTCCAG
ACTTGTTCAA
CAGGCCAGCC
ATTACGCTCG
TCATCAAAAT
CACTCGCATC
AACCAAACCG
TTATTCATTC
GTGATTGCGC
CTGAGCGAGA
CGAAATACGC
GGTCGCTGTT
AAAAGGACAA
TTACAAACAG
GAATCGAATG
CAACCGGCGC
AGGAACACTG
CCAGCGCATC
AACAATATTT
TCACCTGAAT
CAGGATATTC
TTCTAATACC
TGGAATGCTG
TTTTCCCGGG
GATCGCAGTG
GTGAGTAACC
ATGCATCATC
AGGAGTACGG
ATAAAATGCT
TGATGGTCGG
AAGAGGCATA
AATTCCGTCA
GCCAGTTTAG
TCTGACCATC
TCATCTGTAA
CATCATTGGC
AACGCTACCT
TTGCCATGTT
TCAGAAACAA
CTCTGGCGCA
TCGGGCTTCC
CATACAATCG
ATAGATTGTC
GCACCTGATT
GCCCGACATT
ATCGCGAGCC
CATTTATACC
CATATAAATC
AGCATCCATG
TTGGAATTTA
ATCGCGGCCT
AGAGCAAGAC
GTTTCCCGTT
GAATATGGCT
CATACTCTTC
CTTTTTCAAT
ATTATTGAAG
CATTTATCAG
GGTTATTGTC
TCATGAGCGG
ATACATATTT
GAATGTATTT
AGAAAAATAA
ACAAATAGGC
ATGCAGCGCT
CTTCCGCTTC
CTCGCTCACT
GACTCGCTAC
GCTCGGTCGT
TCGACTGCGG
CGAGCGGTGT
CAGCTCACTC
AAAAGCGGTA
ATACGGTTAT
CCACAGAATC
AGGGGATAAA
GCCGGAAAGA
ACATGTGAGC
AAAAAGCAAA
GCACCGGAAG
AAGCCAACGC
CGCAGGCGTT
TTTCCATAGG
CTCCGCCCCC
CTGACGAGCA
TCACAAAAAT
CGACGCTCAA
GCCAGAGGTG
GCGAAACCCG
ACAGGACTAT
AAAGATACCA
GGCGTTTCCC
CCTGGAAGCT
CCCTCGTGCG
CTCTCCTGTT
CCGACCCTGC
CGCTTACCGG
ATACCTGTCC
GCCTTTCTCC
CTTCGGGAAG
CGTGGCGCTT
TCTCATAGCT
CACGCTGTTG
GTATCTCAGT
TCGGTGTAGG
TCGTTCGCTC
CAAGCTGGGC
TGTGTGCACG
AACCCCCCGT
TCAGCCCGAC
CGCTGCGCCT
TATCCGGTAA
CTATCGTCTT
GAGTCCAACC
CGGTAAGACA
CGACTTATCG
CCACTGGCAG
CAGCCATTGG
TAACTGATTT
AGAGGACTTT
GTCTTGAAGT
TATGCACCTG
TTAAGGCTAA
ACTGAAAGAA
CAGATTTTGG
TGAGTGCGGT
CCTCCAACCC
ACTTACCTTG
GTTCAAAGAG
TTGGTAGCTC
AGCGAACCTT
GAGAAAACCA
CCGTTGGTAG
CGGTGGTTTT
TCTTTATTTA
TGAGATGATG
AATCAATCGG
TCTATCAAGT
CAACGAACAG
CTATTCCGTT
ACTCTAGATT
TCAGTGCAAT
TTATCTCTTC
AAATGTAGCA
CCTGAAGTCA
GCCCCATACG
ATATAAGTTG
TAATTCTCAT
GTTAGTCATG
CCCCGCGCCC
ACCGGAAGGA
GCTGACTGGG
TTGAAGGCTC
TCAAGGGCAT
CGGTCGAGAT
CCCGGTGCCT
AATGAGTGAG
CTAACTTACA
TTAATTGCGT
TGCGCTCACT
GCCCGCTTTC
CAGTCGGGAA
ACCTGTCGTG
CCAGCTGCAT
TAATGAATCG
GCCAACGCGC
GGGGAGAGGC
GGTTTGCGTA
TTGGGCGCCA
GGGTGGTTTT
TCTTTTCACC
AGTGAGACGG
GCAACAGCTG
ATTGCCCTTC
ACCGCCTGGC
CCTGAGAGAG
TTGCAGCAAG
CGGTCCACGC
TGGTTTGCCC
CAGCAGGCGA
AAATCCTGTT
TGATGGTGGT
TAACGGCGGG
ATATAACATG
AGCTGTCTTC
GGTATCGTCG
TATCCCACTA
CCGAGATGTC
CGCACCAACG
CGCAGCCCGG
ACTCGGTAAT
GGCGCGCATT
GCGCCCAGCG
CCATCTGATC
GTTGGCAACC
AGCATCGCAG
TGGGAACGAT
GCCCTCATTC
AGCATTTGCA
TGGTTTGTTG
AAAACCGGAC
ATGGCACTCC
AGTCGCCTTC
CCGTTCCGCT
ATCGGCTGAA
TTTGATTGCG
AGTGAGATAT
TTATGCCAGC
CAGCCAGACG
CAGACGCGCC
GAGACAGAAC
TTAATGGGCC
CGCTAACAGC
GCGATTTGCT
GGTGACCCAA
TGCGACCAGA
TGCTCCACGC
CCAGTCGCGT
ACCGTCTTCA
TGGGAGAAAA
TAATACTGTT
GATGGGTGTC
TGGTCAGAGA
CATCAAGAAA
TAACGCCGGA
ACATTAGTGC
AGGCAGCTTC
CACAGCAATG
GCATCCTGGT
CATCCAGCGG
ATAGTTAATG
ATCAGCCCAC
TGACGCGTTG
CGCGAGAAGA
TTGTGCACCG
CCGCTTTACA
GGCTTCGACG
CCGCTTCGTT
CTACCATCGA
CACCACCACG
CTGGCACCCA
GTTGATCGGC
GCGAGATTTA
ATCGCCGCGA
CAATTTGCGA
CGGCGCGTGC
AGGGCCAGAC
TGGAGGTGGC
AACGCCAATC
AGCAACGACT
GTTTGCCCGC
CAGTTGTTGT
GCCACGCGGT
TGGGAATGTA
ATTCAGCTCC
GCCATCGCCG
CTTCCACTTT
TTCCCGCGTT
TTCGCAGAAA
CGTGGCTGGC
CTGGTTCACC
ACGCGGGAAA
CGGTCTGATA
AGAGACACCG
GCATACTCTG
CGACATCGTA
TAACGTTACT
GGTTTCACAT
TCACCACCCT
GAATTGACTC
TCTTCCGGGC
GCTATCATGC
CATACCGCGA
AAGGTTTTGC
GCCATTCGAT
GGTGTCCGGG
ATCTCGACGC
TCTCCCTTAT
GCGACTCCTG
CATTAGGAAA
TTAATACGAC
TCACTATA