名称: | pPIC6A |
---|---|
别称: | |
基因长: | |
质粒宿主: | 酵母菌 |
质粒用途: | 蛋白表达 |
片段类型: | ORF |
片段物种: | 空载体 |
原核抗性: | Blast |
筛选标记: | Blast |
荧光标记: | |
启动子: | AOX1 |
复制子: | pUC |
拷贝数: | |
感受态: | DH5a |
温度: | 37度 |
背景载体: | |
正向引物: | |
反向引物: | |
诱导方式: |
1、本平台所有产品仅供科研使用,不能用于临床试验,包括人体口服、注射或者体外用药;
2、小包装质粒以模板价格出售,只保证基因部分测序正确,不保证质粒的表达等实验效果;
3、某些质粒即使是出品公司亦没有完整测过序,如关键部位的序列测序正确,亦认为是正确质粒;
4、小包装质粒产品的售后期为您收到产品之日起3个月,收到质粒后请及时转化操作,过期需重新购买;
5、质粒构建皆收取的是成本费用,所有质粒会分享给其他实验者,保密性质粒请提前告知并缴纳保密费用;
6、因科学研究为探索未知的活动,存在较大不确定性,故在任何情况下淼灵都不承担额外的连带责任;
7、发表[中文论文]请标注:产品名称(产品货号) 由武汉淼灵生物科技有限公司提供;
8、发表[英文论文]请标注:Product Name (Product Item Number) was obtained from MiaoLingBio,China.
操作说明
一、质粒干粉(负20度保存,保质期90天,常温运输)
1、收到干粉质粒后请先5000rpm离心1min,再加入20μl无菌水溶解质粒;
2、将相应的感受态于冰盒上解冻,取2μl质粒加至100μl感受态中,冰浴 30min;
3、42度热激60s,冰浴2min,加入900μl无抗LB培养基,180rpm震荡培养45min;
4、6000rpm离心3min,留100μl上清重悬,再涂至对应抗性的LB平板上;
5、倒置培养过夜后,如菌落过多则稀释质粒转化,如没有菌落则取10ul质粒转化;
6、挑单菌落至对应抗性的LB液体培养基中过夜震荡培养,根据需要提取质粒。
二、液体质粒(负20度保存,保质期90天,冰袋运输)
1、收到液体质粒后请甩动保存管,让液体质粒不要吸附在管壁上;
2、根据实验需求取适量质粒,其余保存于负20度冰箱。
三、甘油菌种(负80度保存,保质期90天,冰袋运输)
1、收到甘油菌种后请甩动保存管,让菌液不要吸附在管壁上;
2、用接种环在固体平板上四区划线,如有抗性就加对应抗性;
3、恒温培养箱倒置培养12~16h;
4、务必挑取单菌落接种于液体培养基中,如有抗性就加对应抗性;
5、摇床震荡培养过夜,根据实验需要培养菌种。
AGATCTAACA
TCCAAAGACG
AAAGGTTGAA
TGAAACCTTT
TTGCCATCCG
ACATCCACAG
GTCCATTCTC
ACACATAAGT
GCCAAACGCA
ACAGGAGGGG
ATACACTAGC
AGCAGACCGT
TGCAAACGCA
GGACCTCCAC
TCCTCTTCTC
CTCAACACCC
ACTTTTGCCA
TCGAAAAACC
AGCCCAGTTA
TTGGGCTTGA
TTGGAGCTCG
CTCATTCCAA
TTCCTTCTAT
TAGGCTACTA
ACACCATGAC
TTTATTAGCC
TGTCTATCCT
GGCCCCCCTG
GCGAGGTTCA
TGTTTGTTTA
TTTCCGAATG
CAACAAGCTC
CGCATTACAC
CCGAACATCA
CTCCAGATGA
GGGCTTTCTG
AGTGTGGGGT
CAAATAGTTT
CATGTTCCCC
AAATGGCCCA
AAACTGACAG
TTTAAACGCT
GTCTTGGAAC
CTAATATGAC
AAAAGCGTGA
TCTCATCCAA
GATGAACTAA
GTTTGGTTCG
TTGAAATGCT
AACGGCCAGT
TGGTCAAAAA
GAAACTTCCA
AAAGTCGGCA
TACCGTTTGT
CTTGTTTGGT
ATTGATTGAC
GAATGCTCAA
AAATAATCTC
ATTAATGCTT
AGCGCAGTCT
CTCTATCGCT
TCTGAACCCC
GGTGCACCTG
TGCCGAAACG
CAAATGGGGA
AACACCCGCT
TTTTGGATGA
TTATGCATTG
TCTCCACATT
GTATGCTTCC
AAGATTCTGG
TGGGAATACT
GCTGATAGCC
TAACGTTCAT
GATCAAAATT
TAACTGTTCT
AACCCCTACT
TGACAGCAAT
ATATAAACAG
AAGGAAGCTG
CCCTGTCTTA
AACCTTTTTT
TTTATCATCA
TTATTAGCTT
ACTTTCATAA
TTGCGACTGG
TTCCAATTGA
CAAGCTTTTG
ATTTTAACGA
CTTTTAACGA
CAACTTGAGA
AGATCAAAAA
ACAACTAATT
ATTCGAAACG
AGGAATTCAC
GTGGCCCAGC
CGGCCGTCTC
GGATCGGTAC
CTCGAGCCGC
GGCGGCCGCC
AGCTTGGGCC
CGAACAAAAA
CTCATCTCAG
AAGAGGATCT
GAATAGCGCC
GTCGACCATC
ATCATCATCA
TCATTGAGTT
TTAGCCTTAG
ACATGACTGT
TCCTCAGTTC
AAGTTGGGCA
CTTACGAGAA
GACCGGTCTT
GCTAGATTCT
AATCAAGAGG
ATGTCAGAAT
GCCATTTGCC
TGAGAGATGC
AGGCTTCATT
TTTGATACTT
TTTTATTTGT
AACCTATATA
GTATAGGATT
TTTTTTGTCA
TTTTGTTTCT
TCTCGTACGA
GCTTGCTCCT
GATCAGCCTA
TCTCGCAGCT
GATGAATATC
TTGTGGTAGG
GGTTTGGGAA
AATCATTCGA
GTTTGATGTT
TTTCTTGGTA
TTTCCCACTC
CTCTTCAGAG
TACAGAAGAT
TAAGTGAGAC
CTTCGTTTGT
GCGGATCCCC
CACACACCAT
AGCTTCAAAA
TGTTTCTACT
CCTTTTTTAC
TCTTCCAGAT
TTTCTCGGAC
TCCGCGCATC
GCCGTACCAC
TTCAAAACAC
CCAAGCACAG
CATACTAAAT
TTCCCCTCTT
TCTTCCTCTA
GGGTGTCGTT
AATTACCCGT
ACTAAAGGTT
TGGAAAAGAA
AAAAGAGACC
GCCTCGTTTC
TTTTTCTTCG
TCGAAAAAGG
CAATAAAAAT
TTTTATCACG
TTTCTTTTTC
TTGAAAATTT
TTTTTTTTGA
TTTTTTTCTC
TTTCGATGAC
CTCCCATTGA
TATTTAAGTT
AATAAACGGT
CTTCAATTTC
TCAAGTTTCA
GTTTCATTTT
TCTTGTTCTA
TTACAACTTT
TTTTACTTCT
TGCTCATTAG
AAAGAAAGCA
TAGCAATCTA
ATCTAAGGGC
GGTGTTGACA
ATTAATCATC
GGCATAGTAT
ATCGGCATAG
TATAATACGA
CAAGGTGAGG
AACTAAACCA
TGGCCAAGCC
TTTGTCTCAA
GAAGAATCCA
CCCTCATTGA
AAGAGCAACG
GCTACAATCA
ACAGCATCCC
CATCTCTGAA
GACTACAGCG
TCGCCAGCGC
AGCTCTCTCT
AGCGACGGCC
GCATCTTCAC
TGGTGTCAAT
GTATATCATT
TTACTGGGGG
ACCTTGTGCA
GAACTCGTGG
TGCTGGGCAC
TGCTGCTGCT
GCGGCAGCTG
GCAACCTGAC
TTGTATCGTC
GCGATCGGAA
ATGAGAACAG
GGGCATCTTG
AGCCCCTGCG
GACGGTGCCG
ACAGGTGCTT
CTCGATCTGC
ATCCTGGGAT
CAAAGCCATA
GTGAAGGACA
GTGATGGACA
GCCGACGGCA
GTTGGGATTC
GTGAATTGCT
GCCCTCTGGT
TATGTGTGGG
AGGGCTAAGC
ACTTCGTGGC
CGAGGAGCAG
GACTGACACG
TCCGACGCGG
CCCGACGGGT
CCGAGGCCTC
GGAGATCCGT
CCCCCTTTTC
CTTTGTCGAT
ATCATGTAAT
TAGTTATGTC
ACGCTTACAT
TCACGCCCTC
CCCCCACATC
CGCTCTAACC
GAAAAGGAAG
GAGTTAGACA
ACCTGAAGTC
TAGGTCCCTA
TTTATTTTTT
TATAGTTATG
TTAGTATTAA
GAACGTTATT
TATATTTCAA
ATTTTTCTTT
TTTTTCTGTA
CAGACGCGTG
TACGCATGTA
ACATTATACT
GAAAACCTTG
CTTGAGAAGG
TTTTGGGACG
CTCGAAGGCT
TTAATTTGCA
AGCTGGAGAC
CAACATGTGA
GCAAAAGGCC
AGCAAAAGGC
CAGGAACCGT
AAAAAGGCCG
CGTTGCTGGC
GTTTTTCCAT
AGGCTCCGCC
CCCCTGACGA
GCATCACAAA
AATCGACGCT
CAAGTCAGAG
GTGGCGAAAC
CCGACAGGAC
TATAAAGATA
CCAGGCGTTT
CCCCCTGGAA
GCTCCCTCGT
GCGCTCTCCT
GTTCCGACCC
TGCCGCTTAC
CGGATACCTG
TCCGCCTTTC
TCCCTTCGGG
AAGCGTGGCG
CTTTCTCATA
GCTCACGCTG
TAGGTATCTC
AGTTCGGTGT
AGGTCGTTCG
CTCCAAGCTG
GGCTGTGTGC
ACGAACCCCC
CGTTCAGCCC
GACCGCTGCG
CCTTATCCGG
TAACTATCGT
CTTGAGTCCA
ACCCGGTAAG
ACACGACTTA
TCGCCACTGG
CAGCAGCCAC
TGGTAACAGG
ATTAGCAGAG
CGAGGTATGT
AGGCGGTGCT
ACAGAGTTCT
TGAAGTGGTG
GCCTAACTAC
GGCTACACTA
GAAGAACAGT
ATTTGGTATC
TGCGCTCTGC
TGAAGCCAGT
TACCTTCGGA
AAAAGAGTTG
GTAGCTCTTG
ATCCGGCAAA
CAAACCACCG
CTGGTAGCGG
TGGTTTTTTT
GTTTGCAAGC
AGCAGATTAC
GCGCAGAAAA
AAAGGATCTC
AAGAAGATCC
TTTGATCTTT
TCTACGGGGT
CTGACGCTCA
GTGGAACGAA
AACTCACGTT
AAGGGATTTT
GGTCATGAGA
TC