名称: | pCMV-MCS-HA |
---|---|
别称: | |
基因长: | |
质粒宿主: | 哺乳细胞 |
质粒用途: | 蛋白表达 |
片段类型: | ORF |
片段物种: | 空载体 |
原核抗性: | Kan |
筛选标记: | |
荧光标记: | |
启动子: | CMV |
复制子: | pUC |
拷贝数: | |
感受态: | DH5a |
温度: | 37度 |
背景载体: | |
正向引物: | CMV-F:CGCAAATGGGCGGTAGGCGTG |
反向引物: | |
诱导方式: |
1、本平台所有产品仅供科研使用,不能用于临床试验,包括人体口服、注射或者体外用药;
2、小包装质粒以模板价格出售,只保证基因部分测序正确,不保证质粒的表达等实验效果;
3、某些质粒即使是出品公司亦没有完整测过序,如关键部位的序列测序正确,亦认为是正确质粒;
4、小包装质粒产品的售后期为您收到产品之日起3个月,收到质粒后请及时转化操作,过期需重新购买;
5、质粒构建皆收取的是成本费用,所有质粒会分享给其他实验者,保密性质粒请提前告知并缴纳保密费用;
6、因科学研究为探索未知的活动,存在较大不确定性,故在任何情况下淼灵都不承担额外的连带责任;
7、发表[中文论文]请标注:产品名称(产品货号) 由武汉淼灵生物科技有限公司提供;
8、发表[英文论文]请标注:Product Name (Product Item Number) was obtained from MiaoLingBio,China.
操作说明
一、质粒干粉(负20度保存,保质期90天,常温运输)
1、收到干粉质粒后请先5000rpm离心1min,再加入20μl无菌水溶解质粒;
2、将相应的感受态于冰盒上解冻,取2μl质粒加至100μl感受态中,冰浴 30min;
3、42度热激60s,冰浴2min,加入900μl无抗LB培养基,180rpm震荡培养45min;
4、6000rpm离心3min,留100μl上清重悬,再涂至对应抗性的LB平板上;
5、倒置培养过夜后,如菌落过多则稀释质粒转化,如没有菌落则取10ul质粒转化;
6、挑单菌落至对应抗性的LB液体培养基中过夜震荡培养,根据需要提取质粒。
二、液体质粒(负20度保存,保质期90天,冰袋运输)
1、收到液体质粒后请甩动保存管,让液体质粒不要吸附在管壁上;
2、根据实验需求取适量质粒,其余保存于负20度冰箱。
三、甘油菌种(负80度保存,保质期90天,冰袋运输)
1、收到甘油菌种后请甩动保存管,让菌液不要吸附在管壁上;
2、用接种环在固体平板上四区划线,如有抗性就加对应抗性;
3、恒温培养箱倒置培养12~16h;
4、务必挑取单菌落接种于液体培养基中,如有抗性就加对应抗性;
5、摇床震荡培养过夜,根据实验需要培养菌种。
TCAATATTGG
CCATTAGCCA
TATTATTCAT
TGGTTATATA
GCATAAATCA
ATATTGGCTA
TTGGCCATTG
CATACGTTGT
ATCTATATCA
TAATATGTAC
ATTTATATTG
GCTCATGTCC
AATATGACCG
CCATGTTGGC
ATTGATTATT
GACTAGTTAT
TAATAGTAAT
CAATTACGGG
GTCATTAGTT
CATAGCCCAT
ATATGGAGTT
CCGCGTTACA
TAACTTACGG
TAAATGGCCC
GCCTGGCTGA
CCGCCCAACG
ACCCCCGCCC
ATTGACGTCA
ATAATGACGT
ATGTTCCCAT
AGTAACGCCA
ATAGGGACTT
TCCATTGACG
TCAATGGGTG
GAGTATTTAC
GGTAAACTGC
CCACTTGGCA
GTACATCAAG
TGTATCATAT
GCCAAGTCCG
CCCCCTATTG
ACGTCAATGA
CGGTAAATGG
CCCGCCTGGC
ATTATGCCCA
GTACATGACC
TTACGGGACT
TTCCTACTTG
GCAGTACATC
TACGTATTAG
TCATCGCTAT
TACCATGGTG
ATGCGGTTTT
GGCAGTACAC
CAATGGGCGT
GGATAGCGGT
TTGACTCACG
GGGATTTCCA
AGTCTCCACC
CCATTGACGT
CAATGGGAGT
TTGTTTTGGC
ACCAAAATCA
ACGGGACTTT
CCAAAATGTC
GTAATAACCC
CGCCCCGTTG
ACGCAAATGG
GCGGTAGGCG
TGTACGGTGG
GAGGTCTATA
TAAGCAGAGG
TCGTTTAGTG
AACCGTCAGA
TCACTAGTAG
CTTTATTGCG
GTAGTTTATC
ACAGTTAAAT
TGCTAACGCA
GTCAGTGCTC
GACTGATCAC
AGGTAAGTAT
CAAGGTTACA
AGACAGGTTT
AAGGAGGCCA
ATAGAAACTG
GGCTTGTCGA
GACAGAGAAG
ATTCTTGCGT
TTCTGATAGG
CACCTATTGG
TCTTACTGAC
ATCCACTTTG
CCTTTCTCTC
CACAGGGGTA
CCGAAGCCGC
TAGCGCCAAA
GCTTCAGTCG
GATCCACTAG
GAATTCTGAG
ATATCCAATC
TCGAGTACCC
ATACGACGTA
CCAGATTACG
CTTGAGCTCG
ATGAGTTTGG
ACAAACCACA
ACTAGAATGC
AGTGAAAAAA
ATGCTTTATT
TGTGAAATTT
GTGATGCTAT
TGCTTTATTT
GTAACCATTA
TAAGCTGCAA
TAAACAAGTT
AACAACAACA
ATTGCATTCA
TTTTATGTTT
CAGGTTCAGG
GGGAGGTGTG
GGAGGTTTTT
TAAAGCAAGT
AAAACCTCTA
CAAATGTGGT
ACTTAAGAGG
GGGAGACCAA
AGGGCGAGAC
GTTAAGGCCT
CACGTGACAT
GTGAGCAAAA
GGCCAGCAAA
AGGCCAGGAA
CCGTAAAAAG
GCCGCGTTGC
TGGCGTTTTT
CCATAGGCTC
CGCCCCCCTG
ACGAGCATCA
CAAAAATCGA
CGCTCAAGTC
AGAGGTGGCG
AAACCCGACA
GGACTATAAA
GATACCAGGC
GTTTCCCCCT
GGAAGCTCCC
TCGTGCGCTC
TCCTGTTCCG
ACCCTGCCGC
TTACCGGATA
CCTGTCCGCC
TTTCTCCCTT
CGGGAAGCGT
GGCGCTTTCT
CATAGCTCAC
GCTGTAGGTA
TCTCAGTTCG
GTGTAGGTCG
TTCGCTCCAA
GCTGGGCTGT
GTGCACGAAC
CCCCCGTTCA
GCCCGACCGC
TGCGCCTTAT
CCGGTAACTA
TCGTCTTGAG
TCCAACCCGG
TAAGACACGA
CTTATCGCCA
CTGGCAGCAG
CCACTGGTAA
CAGGATTAGC
AGAGCGAGGT
ATGTAGGCGG
TGCTACAGAG
TTCTTGAAGT
GGTGGCCTAA
CTACGGCTAC
ACTAGAAGGA
CAGTATTTGG
TATCTGCGCT
CTGCTGAAGC
CAGTTACCTT
CGGAAAAAGA
GTTGGTAGCT
CTTGATCCGG
CAAACAAACC
ACGCTGGTAG
CGGTGGTTTT
TTTGTTTGCA
AGCAGCAGAT
TACGCGCAGA
AAAAAAGGAT
CTCAAGAAGA
TCCTTTGATC
TTTTCTACGG
GGTCTGACGC
TCAGTGGAAC
GAAAACTCAC
GTTAAGGGAT
TTTGGTCATG
CCGTCTCAGA
AGAACTCGTC
AAGAAGGCGA
TAGAAGGCGA
TGCGCTGCGA
ATCGGGAGCG
GCGATACCGT
AAAGCACGAG
GAAGCGGTCA
GCCCATTCGC
CGCCAAGCTC
TTCAGCAATA
TCACGGGTAG
CCAACGCTAT
GTCCTGATAG
CGGTCCGCCA
CACCCAGCCG
GCCACAGTCG
ATGAATCCAG
AAAAGCGGCC
ATTTTCCACC
ATGATATTCG
GCAAGCAGGC
ATCGCCATGG
GTCACGACGA
GATCCTCGCC
GTCGGGCATG
CTCGCCTTGA
GCCTGGCGAA
CAGTTCGGCT
GGCGCGAGCC
CCTGATGCTC
TTCGTCCAGA
TCATCCTGAT
CGACAAGACC
GGCTTCCATC
CGAGTACGTG
CTCGCTCGAT
GCGATGTTTC
GCTTGGTGGT
CGAATGGGCA
GGTAGCCGGA
TCAAGCGTAT
GCAGCCGCCG
CATTGCATCA
GCCATGATGG
ATACTTTCTC
GGCAGGAGCA
AGGTGAGATG
ACAGGAGATC
CTGCCCCGGC
ACTTCGCCCA
ATAGCAGCCA
GTCCCTTCCC
GCTTCAGTGA
CAACGTCGAG
CACAGCTGCG
CAAGGAACGC
CCGTCGTGGC
CAGCCACGAT
AGCCGCGCTG
CCTCGTCTTG
CAGTTCATTC
AGGGCACCGG
ACAGGTCGGT
CTTGACAAAA
AGAACCGGGC
GCCCCTGCGC
TGACAGCCGG
AACACGGCGG
CATCAGAGCA
GCCGATTGTC
TGTTGTGCCC
AGTCATAGCC
GAATAGCCTC
TCCACCCAAG
CGGCCGGAGA
ACCTGCGTGC
AATCCATCTT
GTTCAATCAT
AATATTATTG
AAGCATTTAT
CAGGGTTCGT
CTCGTCCCGG
TCTCCTCCCA
TGCATG