名称: | pExpress-1-Actg2(rat)(2同义突变) |
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别称: | NM_012893.1;ACTGE; SMGA |
基因长: | 1131bp |
质粒宿主: | 大肠杆菌 |
质粒用途: | 基因模板 |
片段类型: | cDNA |
片段物种: | 大鼠 |
原核抗性: | Amp |
筛选标记: | |
荧光标记: | |
启动子: | |
复制子: | pUC |
拷贝数: | |
感受态: | DH5a |
温度: | 37度 |
背景载体: | |
正向引物: | M13R:CAGGAAACAGCTATGACC |
反向引物: | M13F:TGTAAAACGACGGCCAGT |
诱导方式: |
1、本平台所有产品仅供科研使用,不能用于临床试验,包括人体口服、注射或者体外用药;
2、小包装质粒以模板价格出售,只保证基因部分测序正确,不保证质粒的表达等实验效果;
3、某些质粒即使是出品公司亦没有完整测过序,如关键部位的序列测序正确,亦认为是正确质粒;
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操作说明
一、质粒干粉(负20度保存,保质期90天,常温运输)
1、收到干粉质粒后请先5000rpm离心1min,再加入20μl无菌水溶解质粒;
2、将相应的感受态于冰盒上解冻,取2μl质粒加至100μl感受态中,冰浴 30min;
3、42度热激60s,冰浴2min,加入900μl无抗LB培养基,180rpm震荡培养45min;
4、6000rpm离心3min,留100μl上清重悬,再涂至对应抗性的LB平板上;
5、倒置培养过夜后,如菌落过多则稀释质粒转化,如没有菌落则取10ul质粒转化;
6、挑单菌落至对应抗性的LB液体培养基中过夜震荡培养,根据需要提取质粒。
二、液体质粒(负20度保存,保质期90天,冰袋运输)
1、收到液体质粒后请甩动保存管,让液体质粒不要吸附在管壁上;
2、根据实验需求取适量质粒,其余保存于负20度冰箱。
三、甘油菌种(负80度保存,保质期90天,冰袋运输)
1、收到甘油菌种后请甩动保存管,让菌液不要吸附在管壁上;
2、用接种环在固体平板上四区划线,如有抗性就加对应抗性;
3、恒温培养箱倒置培养12~16h;
4、务必挑取单菌落接种于液体培养基中,如有抗性就加对应抗性;
5、摇床震荡培养过夜,根据实验需要培养菌种。
GAATTGACAT
TAGGCCTATT
TAGGTGACAC
TATAGAACAA
GTTTCGGTCC
GGAATTCCCG
GGATCACCAC
GGCCCTCAGT
CTCTCGGAGA
AGGACTTCTC
ACACCCTTGG
TGCTCCAGCC
CCCAGCTCTC
TCCACCGCGC
CCACCATGTG
TGAAGAAGAG
ACCACCGCCC
TTGTGTGTGA
CAATGGGTCT
GGCCTGTGCA
AGGCAGGCTT
TGCAGGAGAC
GACGCTCCCA
GGGCTGTCTT
TCCCTCCATT
GTGGGCCGCC
CTCGGCATCA
GGGCGTGATG
GTGGGAATGG
GCCAGAAAGA
CAGCTATGTG
GGGGACGAAG
CCCAGAGCAA
GCGTGGGATC
CTGACCCTCA
AATACCCCAT
TGAACACGGC
ATCATCACGA
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CATGGAGAAG
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ACTCCTTCTA
CAACGAGCTG
CGAGTAGCAC
CAGAAGAGCA
CCCGACCCTG
CTCACAGAGG
CCCCCCTAAA
CCCTAAAGCC
AACAGGGAGA
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GATCATGTTC
GAAACCTTCA
ATGTTCCTGC
CATGTATGTT
GCCATTCAAG
CTGTGCTCTC
GCTCTATGCA
TCTGGCCGCA
CCACAGGCAT
CGTCCTGGAT
TCAGGGGATG
GCGTCACCCA
CAATGTCCCC
ATCTACGAGG
GCTATGCACT
GCCCCATGCC
ATCATGCGTC
TTGACCTGGC
TGGACGGGAT
CTCACAGACT
ACCTCATGAA
GATTCTCACA
GAAAGAGGCT
ATTCCTTTGT
GACCACAGCT
GAGAGAGAAA
TTGTGCGAGA
CATCAAGGAG
AAGCTGTGCT
ACGTAGCCCT
GGATTTTGAG
AATGAGATGG
CCACGGCGGC
TTCGTCTTCT
TCCCTGGAGA
AGAGCTACGA
GTTGCCTGAT
GGGCAGGTCA
TCACGATTGG
CAATGAGCGC
TTCCGCTGCC
CGGAGACCCT
GTTCCAGCCT
TCCTTCATTG
GCATGGAGTC
AGCTGGAATT
CATGAGACAA
CATACAATTC
CATCATGAAG
TGTGACATTG
ACATCCGCAA
GGATTTGTAT
GCTAACAATG
TCCTCTCTGG
GGGCACTACC
ATGTACCCTG
GGATTGCTGA
CAGGATGCAG
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CAGCCTTGGC
TCCCAGCACC
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AGATCATCGC
TCCTCCGGAG
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CAGTCTGGAT
TGGAGGCTCC
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CTTCCAGCAA
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GCAAGCCAGA
GTATGATGAA
GCGGGGCCCT
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CAGGAAATGC
TTCTAAAGTC
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CTTCAAGCCT
TAAAAAAAAA
AAAAAAAAAA
AAAAAAAAGG
GCGGCCGCTT
AATTAACCTC
GAGGAGTGGT
CCCTATAGTG
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GTTTTACAAC
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