名称: | pExpress-1-Asphd2(rat) |
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别称: | NM_001009716.2;RGD1306020 |
基因长: | 1032bp |
质粒宿主: | 大肠杆菌 |
质粒用途: | 基因模板 |
片段类型: | cDNA |
片段物种: | 大鼠 |
原核抗性: | Amp |
筛选标记: | |
荧光标记: | |
启动子: | |
复制子: | pUC |
拷贝数: | |
感受态: | DH5a |
温度: | 37度 |
背景载体: | |
正向引物: | M13R:CAGGAAACAGCTATGACC |
反向引物: | M13F:TGTAAAACGACGGCCAGT |
诱导方式: |
1、本平台所有产品仅供科研使用,不能用于临床试验,包括人体口服、注射或者体外用药;
2、小包装质粒以模板价格出售,只保证基因部分测序正确,不保证质粒的表达等实验效果;
3、某些质粒即使是出品公司亦没有完整测过序,如关键部位的序列测序正确,亦认为是正确质粒;
4、小包装质粒产品的售后期为您收到产品之日起3个月,收到质粒后请及时转化操作,过期需重新购买;
5、质粒构建皆收取的是成本费用,所有质粒会分享给其他实验者,保密性质粒请提前告知并缴纳保密费用;
6、因科学研究为探索未知的活动,存在较大不确定性,故在任何情况下淼灵都不承担额外的连带责任;
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操作说明
一、质粒干粉(负20度保存,保质期90天,常温运输)
1、收到干粉质粒后请先5000rpm离心1min,再加入20μl无菌水溶解质粒;
2、将相应的感受态于冰盒上解冻,取2μl质粒加至100μl感受态中,冰浴 30min;
3、42度热激60s,冰浴2min,加入900μl无抗LB培养基,180rpm震荡培养45min;
4、6000rpm离心3min,留100μl上清重悬,再涂至对应抗性的LB平板上;
5、倒置培养过夜后,如菌落过多则稀释质粒转化,如没有菌落则取10ul质粒转化;
6、挑单菌落至对应抗性的LB液体培养基中过夜震荡培养,根据需要提取质粒。
二、液体质粒(负20度保存,保质期90天,冰袋运输)
1、收到液体质粒后请甩动保存管,让液体质粒不要吸附在管壁上;
2、根据实验需求取适量质粒,其余保存于负20度冰箱。
三、甘油菌种(负80度保存,保质期90天,冰袋运输)
1、收到甘油菌种后请甩动保存管,让菌液不要吸附在管壁上;
2、用接种环在固体平板上四区划线,如有抗性就加对应抗性;
3、恒温培养箱倒置培养12~16h;
4、务必挑取单菌落接种于液体培养基中,如有抗性就加对应抗性;
5、摇床震荡培养过夜,根据实验需要培养菌种。
TCCTTTTAGG
CCTATTTAGG
TGACACTATA
GAACAAGTTT
CGGTCCGGAA
TTCCCGGGAT
CACGCTTCCT
TGGGAACTCG
CAGCGCGATG
TCCCCAGGCC
AAGCTGAGCA
GCCCCTTCTC
CCTCCAGTGA
GCTGGGCATA
ACTGGCCGTG
GCTAGCTAGA
CTGGGCCTCC
CTGTGGGCAG
GCGCCAGGTC
TGCAACAGCT
CCAGTCGGCA
GCGCCCAGGC
GGGGCCGGGA
GCCGCCGATC
TTCCAGGCTG
TTCTATTTGC
AATTTCATCC
CACGTGTCCG
CGGGGCCTCA
GAAGTGTGTG
TGGGATCCAT
CACAGGTTTG
GACATCATGA
AAGCCCTTTC
ATGGTGGCTG
ACTGCATTTG
CAAATGGGAC
CTAAGGCAGA
GCCACCCTCC
GCCCCACTGC
AGTGACTTTT
CCTAGTGGGC
CCAGCTGGCA
GGCCTCACTG
TTGATCAATG
GAGCCCTTGG
CAGGGACCGA
GGGACAGTGG
CAGCCATGCC
TCCCCCTGCC
ACCACCACTC
CTTCTGCCGC
CTGCTAACCT
GCACGCTGTG
GGTGCCCTAG
AGACCCCCAG
AGGACTGACC
ATCTGAGCCA
GCTTCCTTCG
AGCGCCGAGT
CCCCCAAGAT
GTGGCTGGAG
TGGCTGGTAG
CCTGGAGCTG
GTCTCTGGAC
GGCCTGAGGG
ACTGCATCGC
CACTGGTATC
CAGTCCGTGC
GGGACTGTGA
CGGCACAGCT
GTCATCACTG
TGGCCTGCCT
GCTCGTCTTG
TTTGTGTGGT
ACTGTTACCA
TGTGGGCCGA
GAACAGCCCC
GACCCCACGT
ATCCGTCAAC
TCCCTCCTGC
AGGGTGTGGA
TGCCAACGGG
TTACAGAACG
GATCCATGTA
CTGCCAGTCC
CCTGAGTGTG
TGCGCTGCAC
GCACCACGAC
GGCCTCAACC
AGAAGCTCTA
CCACAACCTG
CAGGAGTACG
CCAAGCGCTA
CTCATGGTCT
GGCATGGGCC
GTATCCACAA
GGGCATACGG
GAGCAGGGCC
GCTACCTCAG
CAGCCAGCCC
TCTATCCAGA
AGCCGGAGGT
CTTCTTCCTG
CCTGACCTCC
CCACTACGCC
CTACTTCCCC
AGGGACGCCC
AGAAGCACGA
TGTGGAGCTG
CTGGAGCGGA
ACTTCCAGGC
CATCCTCTGC
GAGTTCGAGG
CACTCTACAA
AGCCTTCTCT
AACTGCAGCC
TCCCTCAGGG
GTGGAAAGTG
AACAGCACCC
CCAGCGGGGA
GTGGTTCACC
TTTGACTTTG
TCAGCCAGGG
CGTTTGTGTC
CCCAGGAACT
GCAGGAAGTG
CCCTCGGACT
TACCGCTTAC
TCGGCAGCCT
CCGGACCTGT
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ATGTTTTCGG
GAACGCCTGC
ATCTCAGTGC
TGAGTCCTGG
GACCGTGATC
ACGGAGCACT
ATGGGCCCAC
AAACATCCGA
ATCCGGTGCC
ACCTAGGTCT
GAAGACTCCC
AATGGCTGCG
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GGGGGGTGAG
CCCCAGTGCT
GGGCAGAAGG
CCGATGCCTA
CTCTTCGACG
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GCACACCTCG
TTCCATGAAG
GTTCTGCTGA
GGATGGCCCA
CGGGTGGTCT
TCATGGTGGA
CCTCTGGCAC
CCCAACGTGG
CAGCTGCTGA
ACGTCAGGCC
CTGGATTTCA
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AGGACGATGA
GAACATTGCC
TGGGCCGGAG
CCAGGCTGAG
TGGATGGGTA
GACTGTGTTA
TTGCCTACCC
TGACTGTGCT
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CTGTCACTGC
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AAAAAAAAAA
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TGA