名称: | pCMV-SPORT6-Gspt1(mouse)(6同义1点突) |
---|---|
别称: | NM_146066.2;AI314175; AI326449; AV307676; C79774; G1st;Gst-1 |
基因长: | 1191bp |
质粒宿主: | 大肠杆菌 |
质粒用途: | 基因模板 |
片段类型: | cDNA |
片段物种: | 小鼠 |
原核抗性: | Amp |
筛选标记: | |
荧光标记: | |
启动子: | |
复制子: | pUC |
拷贝数: | |
感受态: | DH5a |
温度: | 37度 |
背景载体: | |
正向引物: | M13R:CAGGAAACAGCTATGACC |
反向引物: | M13F:TGTAAAACGACGGCCAGT |
诱导方式: |
1、本平台所有产品仅供科研使用,不能用于临床试验,包括人体口服、注射或者体外用药;
2、小包装质粒以模板价格出售,只保证基因部分测序正确,不保证质粒的表达等实验效果;
3、某些质粒即使是出品公司亦没有完整测过序,如关键部位的序列测序正确,亦认为是正确质粒;
4、小包装质粒产品的售后期为您收到产品之日起3个月,收到质粒后请及时转化操作,过期需重新购买;
5、质粒构建皆收取的是成本费用,所有质粒会分享给其他实验者,保密性质粒请提前告知并缴纳保密费用;
6、因科学研究为探索未知的活动,存在较大不确定性,故在任何情况下淼灵都不承担额外的连带责任;
7、发表[中文论文]请标注:产品名称(产品货号) 由武汉淼灵生物科技有限公司提供;
8、发表[英文论文]请标注:Product Name (Product Item Number) was obtained from MiaoLingBio,China.
操作说明
一、质粒干粉(负20度保存,保质期90天,常温运输)
1、收到干粉质粒后请先5000rpm离心1min,再加入20μl无菌水溶解质粒;
2、将相应的感受态于冰盒上解冻,取2μl质粒加至100μl感受态中,冰浴 30min;
3、42度热激60s,冰浴2min,加入900μl无抗LB培养基,180rpm震荡培养45min;
4、6000rpm离心3min,留100μl上清重悬,再涂至对应抗性的LB平板上;
5、倒置培养过夜后,如菌落过多则稀释质粒转化,如没有菌落则取10ul质粒转化;
6、挑单菌落至对应抗性的LB液体培养基中过夜震荡培养,根据需要提取质粒。
二、液体质粒(负20度保存,保质期90天,冰袋运输)
1、收到液体质粒后请甩动保存管,让液体质粒不要吸附在管壁上;
2、根据实验需求取适量质粒,其余保存于负20度冰箱。
三、甘油菌种(负80度保存,保质期90天,冰袋运输)
1、收到甘油菌种后请甩动保存管,让菌液不要吸附在管壁上;
2、用接种环在固体平板上四区划线,如有抗性就加对应抗性;
3、恒温培养箱倒置培养12~16h;
4、务必挑取单菌落接种于液体培养基中,如有抗性就加对应抗性;
5、摇床震荡培养过夜,根据实验需要培养菌种。
GGCAAAGCAG
GCTGGTACCG
GTCCGGAATT
CCCGGGATAT
CGTCGACCCA
CGCGTCCGTG
GATCCCAGCA
GCGGCGGTGG
CGGCGGTGGC
GGCGGCGGTG
GGAGCAGCAG
CAGCAGCGAC
TCTGCGCCCG
ACTGCTGGGA
CCAGACAGAT
ATGGAGGCCC
CCGGGCCCGG
GCCTTGCGCC
GGCGGCGGGA
GCGGCAGCGG
CTCCATGGCC
GCGGTGGCCG
AGGCCCAGCG
TGAGAACCTC
AGCGCGGCTT
TCAGCCGGCA
ACTCAACGTC
AACGCCAAGC
CTTTCGTCCC
CAACGTCCAC
GCCGCTGAAT
TCGTGCCGTC
CTTCCTGCGG
GGTCCGGCCC
AGCCGCCGCT
ATCCCCAGCT
GGCGCAGCCG
GCGGCGACCA
CGGAGCAGGC
AGCGGCGCGG
GAGGCCCTTC
GGAACCTGTA
GAGTCCTCTC
AAGACCAGTC
GTGTGAAGGT
TCAAATTCTA
CTGTTAGCAT
GGAACTTTCA
GAACCTGTTG
TGGAAAATGG
AGAGACAGAA
ATGTCCCCAG
AAGAATCATG
GGAGCACAAA
GAAGAAATAA
GTGAAGCGGA
GCCAGGGGGT
GGTTCCTCAG
GAGATGGAAG
GCCACCAGAG
GAAAGCACCC
AAGAAATGAT
GGAGGAGGAG
GAAGAAATAC
CGAAACCTAA
GTCAGCGGTG
GCACCACCAG
GTGCTCCCAA
GAAGGAACAT
GTAAATGTAG
TGTTCATCGG
ACATGTTGAT
GCAGGCAAGT
CAACCATTGG
AGGACAAATA
ATGTATTTGA
CTGGAATGGT
CGACAAAAGG
ACACTTGAGA
AGTATGAACG
AGAAGCTAAA
GAAAAAAACA
GAGAAACTTG
GTACTTGTCT
TGGGCCTTAG
ACACGAATCA
GGAAGAACGA
GACAAGGGCA
AAACCGTGGA
GGTGGGTCGT
GCCTATTTTG
AAACGGAAAA
GAAGCATTTT
ACAATTCTAG
ATGCTCCTGG
CCATAAGAGT
TTTGTCCCAA
ATATGATTGG
TGGTGCCTCT
CAAGCTGACT
TGGCTGTACT
GGTAATCTCA
GCCAGGAAAG
GAGAGTTTGA
AACTGGATTT
GAAAAAGGAG
GACAGACAAG
AGAACATGCA
ATGTTGGCAA
AGACAGCAGG
TGTCAAACAC
TTAATTGTGC
TTATTAATAA
GATGGATGAT
CCAACGGTAA
ACTGGAGCAA
CGAGAGATAT
GAAGAATGCA
AAGAGAAACT
AGTACCATTT
TTGAAAAAAG
TTGGCTTCAA
TCCCAAAAAG
GACATTCATT
TTATGCCGTG
CTCAGGACTG
ACAGGAGCGA
ATCTTAAAGA
ACAATCAGAT
TTCTGTCCTT
GGTACATTGG
CTTACCATTT
ATTCCATATC
TGGATAATTT
GCCAAACTTC
AATAGATCAG
TTGATGGACC
AATCAGGCTG
CCAATTGTCG
ATAAGTACAA
GGATATGGGG
ACTGTGGTCC
TGGGAAAGCT
GGAATCTGGA
TCTATTTGTA
AAGGCCAGCA
GCTTGTAATG
ATGCCAAATA
AGCACAACGT
GGAAGTTCTT
GGAATACTTT
CTGATGATGT
AGAAACGGAC
TCTGTAGCTC
CAGGTGAAAA
CCTCAAAATC
AGACTGAAAG
GAATTGAAGA
GGAAGAGATT
CTTCCAGGAT
TCATCCTTTG
TGATCTTAAT
AATCTTTGTC
ATTCTGGACG
CACATTTGAT
GCTCAGATAG
TGATTATAGA
GCACAAGTCC
ATCATCTGCC
CAGGGTATAA
TGCGGTGCTG
CATATTCATA
CCTGTATCGA
AGAAGTCGAA
ATAACAGCCT
TAATCTGCTT
GGTAGACAAG
AAATCAGGAG
AGAAAAGTAA
GACTCGACCC
CGTTTTGTAA
AACAAGATCA
AGTATGCATT
GCGCGTTTAA
GGACAGCAGG
AACCATCTGC
CTGGAGACCT
TTAAGGACTT
CCCTCAGATG
GGACGTTTTA
CCTTAAGAGA
TGAGGGTAAG
ACCATTGCAA
TTGGAAAAGT
TCTGAAACTG
GTTCCAGAGA
AAGACTAAGC
ATTTTCTTGA
TGACCCTGCA
CAGTACTGTG
AGGAAAATTG
ACTGCAAAAG
CCTACTTCAC
ACCGCCTTCT
CTTACTTTCT
GCCCATTGAC
AAACCTCTCC
CCATACTTTG
CAAAGAAAAT
TCACAGCAAA
AGTCCACATT
ATGTCAGCTT
TCTCATATTG
AGAGCTCTGC
TATGCCACTG
TTGAATTTTC
CCAAGATTTT
GCCCCCCTTT
CAAACTTCGC
TTCCTTGGAC
AGATTTGGCA
ATAGCTTTGT
AAGTGATGTG
GACATAATTG
CCTACAATAA
TGAAAACCTA
CAGGAATTTT
TTTATTTTTC
ATTTTCTTCT
TAGGCATAGT
TAGTCTTTTC
CCCCCAGGCA
GATGATTCTG
AGTGTGGGGA
GTGTGTCTGC
ACA