名称: | pExpress-1-Eif2b5(rat) |
---|---|
别称: | NM_138866.2 |
基因长: | 2151bp |
质粒宿主: | 大肠杆菌 |
质粒用途: | 基因模板 |
片段类型: | cDNA |
片段物种: | 大鼠 |
原核抗性: | Amp |
筛选标记: | |
荧光标记: | |
启动子: | |
复制子: | pUC |
拷贝数: | |
感受态: | DH5a |
温度: | 37度 |
背景载体: | |
正向引物: | M13R:CAGGAAACAGCTATGACC |
反向引物: | M13F:TGTAAAACGACGGCCAGT |
诱导方式: |
1、本平台所有产品仅供科研使用,不能用于临床试验,包括人体口服、注射或者体外用药;
2、小包装质粒以模板价格出售,只保证基因部分测序正确,不保证质粒的表达等实验效果;
3、某些质粒即使是出品公司亦没有完整测过序,如关键部位的序列测序正确,亦认为是正确质粒;
4、小包装质粒产品的售后期为您收到产品之日起3个月,收到质粒后请及时转化操作,过期需重新购买;
5、质粒构建皆收取的是成本费用,所有质粒会分享给其他实验者,保密性质粒请提前告知并缴纳保密费用;
6、因科学研究为探索未知的活动,存在较大不确定性,故在任何情况下淼灵都不承担额外的连带责任;
7、发表[中文论文]请标注:产品名称(产品货号) 由武汉淼灵生物科技有限公司提供;
8、发表[英文论文]请标注:Product Name (Product Item Number) was obtained from MiaoLingBio,China.
操作说明
一、质粒干粉(负20度保存,保质期90天,常温运输)
1、收到干粉质粒后请先5000rpm离心1min,再加入20μl无菌水溶解质粒;
2、将相应的感受态于冰盒上解冻,取2μl质粒加至100μl感受态中,冰浴 30min;
3、42度热激60s,冰浴2min,加入900μl无抗LB培养基,180rpm震荡培养45min;
4、6000rpm离心3min,留100μl上清重悬,再涂至对应抗性的LB平板上;
5、倒置培养过夜后,如菌落过多则稀释质粒转化,如没有菌落则取10ul质粒转化;
6、挑单菌落至对应抗性的LB液体培养基中过夜震荡培养,根据需要提取质粒。
二、液体质粒(负20度保存,保质期90天,冰袋运输)
1、收到液体质粒后请甩动保存管,让液体质粒不要吸附在管壁上;
2、根据实验需求取适量质粒,其余保存于负20度冰箱。
三、甘油菌种(负80度保存,保质期90天,冰袋运输)
1、收到甘油菌种后请甩动保存管,让菌液不要吸附在管壁上;
2、用接种环在固体平板上四区划线,如有抗性就加对应抗性;
3、恒温培养箱倒置培养12~16h;
4、务必挑取单菌落接种于液体培养基中,如有抗性就加对应抗性;
5、摇床震荡培养过夜,根据实验需要培养菌种。
ATAGTGGTGA
ACTATAGAAC
AGTTTCGGTC
CGGAATTCCC
GGGATGTGGC
TTCCCGGCGG
ACGTGCTGAC
TGCGAAGCAA
AATGGCAGCC
ACTGCGGCGG
TTCCCAGCGC
TGTAGGCGGC
CGAGCGAACA
AACGCGGCGG
CGGCTCCGGC
GGCGGTGGAA
CCCAAGGTGC
GGAGGAGGAG
CCGCCGCCGC
CCCTCCAGGC
AGTTTTAGTG
GCCGATAGCT
TCGACCGCCG
CTTCTTCCCC
ATCTCCAAGG
ACCAGCCTCG
GGTCCTATTG
CCCCTGGCTA
ATGTCGCGCT
GATCGACTAT
ACTCTGGAAT
TCTTGACTGC
CACGGGTGTA
CAGGAAACAT
TTGTCTTTTG
CTGCTGGAAG
GCTGCTCAGA
TCAAAGAACA
CTTACAGAAA
TCCAAATGGT
GCCATCCTAC
GTCCCTCAAT
GTTGTTCGAA
TAATCACATC
AGACCTGTAC
CGATCACTAG
GAGATGTCCT
CCGTGATGTC
GATGCCAAGG
CCTTGGTGCG
CTCTGATTTC
CTCCTGATAT
ATGGAGATGT
CGTCTCAAAT
ATCAATATTT
CCAAAGCCCT
GGAGGAACAC
AGGTTAAGAA
GGAAGCTAGA
AAAAAATGTG
TCTGTCATGA
CAATGGTGTT
CAAAGAGTCC
TCACCCAGTC
ACCCTACACG
CTGCCATGAG
GACAATGTGG
TGCTAGCTGT
GGATAGCACC
ACAAACAGGA
TTCTTCACTT
CCAGAAGACC
CAAGGCCTCC
GCCATTTCTC
CTTTCCTTTG
GGCCTATTCC
AGGGCAGTCT
AGACGGAGTG
GAGATTCGAT
ATGACTTGTT
GGATTGTCAC
ATCAGCATCT
GCTCTCCTCA
GGTAGCTCAG
CTCTTCACAG
ACAACTTTGA
CTACCAAACT
CGAGATGATT
TTGTGCGAGG
CCTGCTAGTG
AATGAGGAGA
TCCTAGGAAA
TCAGATTCAC
TTGCATGTGA
CAAGTAGGGA
ATATGGTGCC
CGGGTCTCCA
ACCTACACAT
GTACTCAGCT
GTCTGTGCTG
ACGTCATCCG
CCGATGGGTC
TACCCTCTTA
CTCCAGAAGT
CAACTTCACT
GACAGCAGTA
CACAAAGCTA
CACTCATTCC
CGACACAACA
TCTACCGAGG
GCCTGAAGTC
AGCCTGGGCC
ACGGCAGCGT
CCTGGAGGAA
AACGTGCTTC
TGGGAGCTGG
CACTGTCGTT
GGCAGCAACT
GCTCCATCAC
CAACAGTGTC
ATTGGCCCTA
ACTGCCACAT
TGGTGATAAT
GTGGTACTGG
ACCAGGCCTA
CCTGTGGCAG
GGAGTTCGAG
TGGCTGCTGG
AGCACAAATA
CACCAGTCTC
TGCTCTGTGA
CAGAGCTGAG
GTCAAGGAGC
GAGTCATACT
GAAGCCACAC
TGTGTCCTCA
CTTCCCAGGT
GGTAGTGGGC
CCAGACATCA
TACTGCCCGA
GGGCTCGGTG
ATCTCTTTGC
ACCCTCCAGA
TGCAGAGGAA
GATGAAGATG
ATGGCCAGTT
TAGTGATGAT
TCTGGCGCTG
ACCAAGAAAA
GGAGAAAGTG
AAGCTGAAAG
GTTACAATCC
GGCAGAAGTT
GGCCCTGAAG
GCCAGGGATA
CCTCTGGAAA
GCTGAGGATG
TGGATGAGAA
GGAAGATGAA
GAGCTGCGGC
AGAGTCTCTG
GGGACTCATG
ATCAATATGG
AGGAGGAAAG
TGAGACGGAA
AGTGAGCGGA
GCGTGGATCC
CGAGGAGCTG
GACAGCCGAG
CAGGCTCCCC
TCAGCTGGAT
GACATCAGAG
TTTTCCAGAA
CGAGGTCTTA
GGAACGCTGC
AGCGGGGCAG
AGAGGAGAAC
ATCTCCTGTG
ACAATCTAGT
CCTGGAGATC
AACTCCCTCA
AGTATGCCTA
CAACATTAGC
CTAAAGGAAG
TGATGCAGGT
CCTGAGCCAT
GTGGTCCTGG
AGTTCCCCCT
GCAACAAGTA
GATGGCGTGC
TTGACCCAAA
CCGCTACTGT
GCCCTGCTGC
TTCCTCTGCT
CAAAGCCTGG
AGCCCTGTTT
TTCGGAACTA
CATAAAGCGC
GCAGCTGACC
ATTTGGAAGC
ATTGGCGGCC
ATTGAGGACT
TCTTCTTGGA
ACATGAAACT
CTTGTTCCTT
CCCTGGCCAA
GGTCCTGATG
GCTTTCTACC
AGCTGGAGAT
CTTGGCTGAG
GAAACAATCT
TGAGCTGGTT
CAGCCAAAGA
GACATAACTG
ACAAAGGCCA
GCAGTTACGT
AAGAATCAAC
AGCTGCAGAG
GTTCATCCAG
TGGCTGAGAG
AGGCAGAAGA
GGAGTCATCT
GACGATGACT
GATGGTGACT
GCCGGATCCA
TGCATCTCAT
TGGCTGTCCT
AGCAGATAGG
GCAAAACAAG
AAAGCTTGCT
ACAGAAGCAT
GAGCGGCCAC
TACAGACTGA
GAATTAATGG
AACGGAAGTT
GCAACTACAG
TATTCTTCCT
ACTGCTGGGA
ACCATGTGCT
TCTCGTCCTG
ACTGAAGTAG
GATGAAGGAA
GTTAGACTGA
ACTAGGGGAA
TAATAGACAG
ACCCTGCAGT
TGGGGGTGGG
CCGAAGAAGC
ACTTTGTGTT
CA