名称: | pCMV-SPORT6-Cd4(mouse) |
---|---|
别称: | NM_013488.3;L3T4; Ly-4 |
基因长: | 1374bp |
质粒宿主: | 大肠杆菌 |
质粒用途: | 基因模板 |
片段类型: | cDNA |
片段物种: | 小鼠 |
原核抗性: | Amp |
筛选标记: | |
荧光标记: | |
启动子: | |
复制子: | pUC |
拷贝数: | |
感受态: | DH5a |
温度: | 37度 |
背景载体: | pCMV-SPORT6 |
正向引物: | M13R:CAGGAAACAGCTATGACC |
反向引物: | M13F:TGTAAAACGACGGCCAGT |
诱导方式: |
1、本平台所有产品仅供科研使用,不能用于临床试验,包括人体口服、注射或者体外用药;
2、小包装质粒以模板价格出售,只保证基因部分测序正确,不保证质粒的表达等实验效果;
3、某些质粒即使是出品公司亦没有完整测过序,如关键部位的序列测序正确,亦认为是正确质粒;
4、小包装质粒产品的售后期为您收到产品之日起3个月,收到质粒后请及时转化操作,过期需重新购买;
5、质粒构建皆收取的是成本费用,所有质粒会分享给其他实验者,保密性质粒请提前告知并缴纳保密费用;
6、因科学研究为探索未知的活动,存在较大不确定性,故在任何情况下淼灵都不承担额外的连带责任;
7、发表[中文论文]请标注:产品名称(产品货号) 由武汉淼灵生物科技有限公司提供;
8、发表[英文论文]请标注:Product Name (Product Item Number) was obtained from MiaoLingBio,China.
操作说明
一、质粒干粉(负20度保存,保质期90天,常温运输)
1、收到干粉质粒后请先5000rpm离心1min,再加入20μl无菌水溶解质粒;
2、将相应的感受态于冰盒上解冻,取2μl质粒加至100μl感受态中,冰浴 30min;
3、42度热激60s,冰浴2min,加入900μl无抗LB培养基,180rpm震荡培养45min;
4、6000rpm离心3min,留100μl上清重悬,再涂至对应抗性的LB平板上;
5、倒置培养过夜后,如菌落过多则稀释质粒转化,如没有菌落则取10ul质粒转化;
6、挑单菌落至对应抗性的LB液体培养基中过夜震荡培养,根据需要提取质粒。
二、液体质粒(负20度保存,保质期90天,冰袋运输)
1、收到液体质粒后请甩动保存管,让液体质粒不要吸附在管壁上;
2、根据实验需求取适量质粒,其余保存于负20度冰箱。
三、甘油菌种(负80度保存,保质期90天,冰袋运输)
1、收到甘油菌种后请甩动保存管,让菌液不要吸附在管壁上;
2、用接种环在固体平板上四区划线,如有抗性就加对应抗性;
3、恒温培养箱倒置培养12~16h;
4、务必挑取单菌落接种于液体培养基中,如有抗性就加对应抗性;
5、摇床震荡培养过夜,根据实验需要培养菌种。
CTGGCAAAGC
AGGCTGGTAC
CGGTCCGGAA
TTCCCGGGAT
ATCGTCGACC
CACGCGTCCG
GAAGGCAAAG
CAAGACTCTC
TTCTTCACTA
GGTACCTGTT
TGCAAAGTCT
CGAGCCCTCA
TATACACACA
CCTGTGCAAG
AAGCAGAGTG
AAGGAAGGAC
TGGCCAGAGG
CTCAGATTCC
CAACCAACAA
GAGCTCAAGG
AGACCACCAT
GTGCCGAGCC
ATCTCTCTTA
GGCGCTTGCT
GCTGCTGCTG
CTGCAGCTGT
CACAACTCCT
AGCTGTCACT
CAAGGGAAGA
CGCTGGTGCT
GGGGAAGGAA
GGGGAATCAG
CAGAACTGCC
CTGCGAGAGT
TCCCAGAAGA
AGATCACAGT
CTTCACCTGG
AAGTTCTCTG
ACCAGAGGAA
GATTCTGGGG
CAGCATGGCA
AAGGTGTATT
AATTAGAGGA
GGTTCGCCTT
CGCAGTTTGA
TCGTTTTGAT
TCCAAAAAAG
GGGCATGGGA
GAAAGGATCG
TTTCCTCTCA
TCATCAATAA
ACTTAAGATG
GAAGACTCTC
AGACTTATAT
CTGTGAGCTG
GAGAACAGGA
AAGAGGAGGT
GGAGTTGTGG
GTGTTCAAAG
TGACCTTCAG
TCCGGGTACC
AGCCTGTTGC
AAGGGCAGAG
CCTGACCCTG
ACCTTGGATA
GCAACTCTAA
GGTCTCTAAC
CCCTTGACAG
AGTGCAAACA
CAAAAAGGGT
AAAGTTGTCA
GTGGTTCCAA
AGTTCTCTCC
ATGTCCAACC
TAAGGGTTCA
GGACAGCGAC
TTCTGGAACT
GCACCGTGAC
CCTGGACCAG
AAAAAGAACT
GGTTCGGCAT
GACACTCTCA
GTGCTGGGTT
TTCAGAGCAC
AGCTATCACG
GCCTATAAGA
GTGAGGGAGA
GTCAGCGGAG
TTCTCCTTCC
CACTCAACTT
TGCAGAGGAA
AACGGGTGGG
GAGAGCTGAT
GTGGAAGGCA
GAGAAGGATT
CTTTCTTCCA
GCCCTGGATC
TCCTTCTCCA
TAAAGAACAA
AGAGGTGTCC
GTACAAAAGT
CCACCAAAGA
CCTCAAGCTC
CAGCTGAAGG
AAACGCTCCC
ACTCACCCTC
AAGATACCCC
AGGTCTCGCT
TCAGTTTGCT
GGTTCTGGCA
ACCTGACTCT
GACTCTGGAC
AAAGGGACAC
TGCATCAGGA
AGTGAACCTG
GTGGTGATGA
AAGTGGCTCA
GCTCAACAAT
ACTTTGACCT
GTGAGGTGAT
GGGACCTACC
TCTCCCAAGA
TGAGACTGAC
CCTGAAGCAG
GAGAACCAGG
AGGCCAGGGT
CTCTGAGGAG
CAGAAAGTAG
TTCAAGTGGT
GGCCCCTGAG
ACAGGGCTGT
GGCAGTGTCT
ACTGAGTGAA
GGTGATAAGG
TCAAGATGGA
CTCCAGGATC
CAGGTTTTAT
CCAGAGGGGT
GAACCAGACA
GTGTTCCTGG
CTTGCGTGCT
GGGTGGCTCC
TTCGGCTTTC
TGGGTTTCCT
TGGGCTCTGC
ATCCTCTGCT
GTGTCAGGTG
CCGGCACCAA
CAGCGCCAGG
CAGCACGAAT
GTCTCAGATC
AAGAGGCTCC
TCAGTGAGAA
GAAGACCTGC
CAGTGCCCCC
ACCGGATGCA
GAAGAGCCAT
AATCTCATCT
GAGGCCTAGG
CCCCACCTGC
AGCCCACCAC
CTGCGTCCTG
TCTCATCGCC
CGAGGCCTGG
GGACCAGATG
AATGTAGCAG
ACACGCTGCC
TCCGGCCTTC
TGCTCTCCTC
TTCCCAACCG
GCCACGGTTC
CCTCCCTCTG
TTCCAAGCCT
GTCTGTCTGC
AAAGCTTGCC
TCTGCGTTCA
GACCTCAAGA
CACCCATCAG
CTATTATTCT