名称: | pCIp10 |
---|---|
别称: | |
基因长: | |
质粒宿主: | 念珠菌 |
质粒用途: | 蛋白表达 |
片段类型: | ORF |
片段物种: | |
原核抗性: | Amp |
筛选标记: | URA3 |
荧光标记: | |
启动子: | |
复制子: | pUC |
拷贝数: | |
感受态: | DH5a |
温度: | 37度 |
背景载体: | |
正向引物: | |
反向引物: | |
诱导方式: |
1、本平台所有产品仅供科研使用,不能用于临床试验,包括人体口服、注射或者体外用药;
2、小包装质粒以模板价格出售,只保证基因部分测序正确,不保证质粒的表达等实验效果;
3、某些质粒即使是出品公司亦没有完整测过序,如关键部位的序列测序正确,亦认为是正确质粒;
4、小包装质粒产品的售后期为您收到产品之日起3个月,收到质粒后请及时转化操作,过期需重新购买;
5、质粒构建皆收取的是成本费用,所有质粒会分享给其他实验者,保密性质粒请提前告知并缴纳保密费用;
6、因科学研究为探索未知的活动,存在较大不确定性,故在任何情况下淼灵都不承担额外的连带责任;
7、发表[中文论文]请标注:产品名称(产品货号) 由武汉淼灵生物科技有限公司提供;
8、发表[英文论文]请标注:Product Name (Product Item Number) was obtained from MiaoLingBio,China.
操作说明
一、质粒干粉(负20度保存,保质期90天,常温运输)
1、收到干粉质粒后请先5000rpm离心1min,再加入20μl无菌水溶解质粒;
2、将相应的感受态于冰盒上解冻,取2μl质粒加至100μl感受态中,冰浴 30min;
3、42度热激60s,冰浴2min,加入900μl无抗LB培养基,180rpm震荡培养45min;
4、6000rpm离心3min,留100μl上清重悬,再涂至对应抗性的LB平板上;
5、倒置培养过夜后,如菌落过多则稀释质粒转化,如没有菌落则取10ul质粒转化;
6、挑单菌落至对应抗性的LB液体培养基中过夜震荡培养,根据需要提取质粒。
二、液体质粒(负20度保存,保质期90天,冰袋运输)
1、收到液体质粒后请甩动保存管,让液体质粒不要吸附在管壁上;
2、根据实验需求取适量质粒,其余保存于负20度冰箱。
三、甘油菌种(负80度保存,保质期90天,冰袋运输)
1、收到甘油菌种后请甩动保存管,让菌液不要吸附在管壁上;
2、用接种环在固体平板上四区划线,如有抗性就加对应抗性;
3、恒温培养箱倒置培养12~16h;
4、务必挑取单菌落接种于液体培养基中,如有抗性就加对应抗性;
5、摇床震荡培养过夜,根据实验需要培养菌种。
GTGGCACTTT
TCGGGGAAAT
GTGCGCGGAA
CCCCTATTTG
TTTATTTTTC
TAAATACATT
CAAATATGTA
TCCGCTCATG
AGACAATAAC
CCTGATAAAT
GCTTCAATAA
TATTGAAAAA
GGAAGAGTAT
GAGTATTCAA
CATTTCCGTG
TCGCCCTTAT
TCCCTTTTTT
GCGGCATTTT
GCCTTCCTGT
TTTTGCTCAC
CCAGAAACGC
TGGTGAAAGT
AAAAGATGCT
GAAGATCAGT
TGGGTGCACG
AGTGGGTTAC
ATCGAACTGG
ATCTCAACAG
CGGTAAGATC
CTTGAGAGTT
TTCGCCCCGA
AGAACGTTTT
CCAATGATGA
GCACTTTTAA
AGTTCTGCTA
TGTGGCGCGG
TATTATCCCG
TATTGACGCC
GGGCAAGAGC
AACTCGGTCG
CCGCATACAC
TATTCTCAGA
ATGACTTGGT
TGAGTACTCA
CCAGTCACAG
AAAAGCATCT
TACGGATGGC
ATGACAGTAA
GAGAATTATG
CAGTGCTGCC
ATAACCATGA
GTGATAACAC
TGCGGCCAAC
TTACTTCTGA
CAACGATCGG
AGGACCGAAG
GAGCTAACCG
CTTTTTTGCA
CAACATGGGG
GATCATGTAA
CTCGCCTTGA
TCGTTGGGAA
CCGGAGCTGA
ATGAAGCCAT
ACCAAACGAC
GAGCGTGACA
CCACGATGCC
TGTAGCAATG
GCAACAACGT
TGCGCAAACT
ATTAACTGGC
GAACTACTTA
CTCTAGCTTC
CCGGCAACAA
TTAATAGACT
GGATGGAGGC
GGATAAAGTT
GCAGGACCAC
TTCTGCGCTC
GGCCCTTCCG
GCTGGCTGGT
TTATTGCTGA
TAAATCTGGA
GCCGGTGAGC
GTGGGTCTCG
CGGTATCATT
GCAGCACTGG
GGCCAGATGG
TAAGCCCTCC
CGTATCGTAG
TTATCTACAC
GACGGGGAGT
CAGGCAACTA
TGGATGAACG
AAATAGACAG
ATCGCTGAGA
TAGGTGCCTC
ACTGATTAAG
CATTGGTAAC
TGTCAGACCA
AGTTTACTCA
TATATACTTT
AGATTGATTT
AAAACTTCAT
TTTTAATTTA
AAAGGATCTA
GGTGAAGATC
CTTTTTGATA
ATCTCATGAC
CAAAATCCCT
TAACGTGAGT
TTTCGTTCCA
CTGAGCGTCA
GACCCCGTAG
AAAAGATCAA
AGGATCTTCT
TGAGATCCTT
TTTTTCTGCG
CGTAATCTGC
TGCTTGCAAA
CAAAAAAACC
ACCGCTACCA
GCGGTGGTTT
GTTTGCCGGA
TCAAGAGCTA
CCAACTCTTT
TTCCGAAGGT
AACTGGCTTC
AGCAGAGCGC
AGATACCAAA
TACTGTCCTT
CTAGTGTAGC
CGTAGTTAGG
CCACCACTTC
AAGAACTCTG
TAGCACCGCC
TACATACCTC
GCTCTGCTAA
TCCTGTTACC
AGTGGCTGCT
GCCAGTGGCG
ATAAGTCGTG
TCTTACCGGG
TTGGACTCAA
GACGATAGTT
ACCGGATAAG
GCGCAGCGGT
CGGGCTGAAC
GGGGGGTTCG
TGCACACAGC
CCAGCTTGGA
GCGAACGACC
TACACCGAAC
TGAGATACCT
ACAGCGTGAG
CTATGAGAAA
GCGCCACGCT
TCCCGAAGGG
AGAAAGGCGG
ACAGGTATCC
GGTAAGCGGC
AGGGTCGGAA
CAGGAGAGCG
CACGAGGGAG
CTTCCAGGGG
GAAACGCCTG
GTATCTTTAT
AGTCCTGTCG
GGTTTCGCCA
CCTCTGACTT
GAGCGTCGAT
TTTTGTGATG
CTCGTCAGGG
GGGCGGAGCC
TATGGAAAAA
CGCCAGCAAC
GCGGCCTTTT
TACGGTTCCT
GGCCTTTTGC
TGGCCTTTTG
CTCACATGTT
CTTTCCTGCG
TTATCCCCTG
ATTCTGTGGA
TAACCGTATT
ACCGCCTTTG
AGTGAGCTGA
TACCGCTCGC
CGCAGCCGAA
CGACCGAGCG
CAGCGAGTCA
GTGAGCGAGG
AAGCGGAAGA
GCGCCCAATA
CGCAAACCGC
CTCTCCCCGC
GCGTTGGCCG
ATTCATTAAT
GCAGCTGGCA
CGACAGGTTT
CCCGACTGGA
AAGCGGGCAG
TGAGCGCAAC
GCAATTAATG
TGAGTTAGCT
CACTCATTAG
GCACCCCAGG
CTTTACACTT
TATGCTTCCG
GCTCGTATGT
TGTGTGGAAT
TGTGAGCGGA
TAACAATTTC
ACACAGGAAA
CAGCTATGAC
CATGATTACG
CCAAGCGCGC
AATTAACCCT
CACTAAAGGG
AACAAAAGCT
GGGTACCGGG
CCCCCCCTCG
AGGTCGACGG
TATCGATAAG
CTTGATATCG
AATTCACGCG
TAGATCCAAC
TCAAGTACAA
CATGGCTGTC
GGTAAAAACA
AGAGATTGTC
CAAAGGAAAG
AAAGGATTAA
AAAAGAAGGT
CGTTGACCCA
TTCACCAGAA
AAGATTGGTT
TGACATCAAA
GCTCCAACCA
CTTTTGAAAA
CAGAAATGTT
GGTAAAACTT
TGATCAACAG
ATCTACCGGT
TTAAAGAATG
CCGCTGATGG
CTTGAAAGGT
AGAGTTTTCG
AAGTTTGTTT
GGCCGACTTA
CAAGGTTCCG
AAGACCACTC
TTACAGAAAA
ATCAAATTGA
GAGTTGATGA
AGTCCAAGGT
AAAAACTTGT
TGACCAACTT
CCATGAGGCC
TCCATGGAGG
CCTCATGGAG
GCCTCATGGA
GGCCTCATGG
AGGCCTCATG
GTTTGGATTT
CACTTCTGAC
AAATTAAGAT
CATTGGTCAG
AAAATGGCAA
TCATTAGTTG
AAGCTAATGT
CACTGTTAAA
ACTTCCGACG
ATTACGTTTT
GAGAGTTTTT
GCCATTGCTT
TCACCAAAAG
ACAACCAAAC
CAAATCAAGG
AAACTACTTA
CGCTCAATCC
TCTAAATTGA
GAGAAGTCAG
AAAGAAGATG
ATTGAAATTA
TGCAAAGAGA
AGTTTCCAAC
TGACTTTAGC
TCAATTAACT
TCCAAATTGA
TTCCAGAAGT
CATTGGCCGT
GAAATTGAAA
AATCCCCCCA
AACCATTTTC
CCATTACAAA
ATGTCCACAT
CAGAAAAGTC
AAATTGTTGA
AACAACCAAA
ATTCGACTGG
GGTTCATTAT
TGGCTTTGCA
CGGTGAAGGT
TCAACCGAAG
AAAAAGGTAA
GAAAGTTTCT
TCTGGTTTCA
AAGATGTTGT
TTTAGAATCT
GTTTAAGGAT
AATGATCTGG
GGGATCCACT
AGTTCTAGAA
GGACCACCTT
TGATTGTAAA
TAGTAATAAT
TACCACCCTT
ATTTAATTAT
TTATTTAACT
TATTTATTTA
TTTATTCTAC
ATATATACAA
ATCTAATAAA
GTGAAAATCT
CCCCCTTCAC
ATTTATAATT
GGCCAGTCTT
TTTCAAATAA
GCATTCCAAC
CAGCATTTCT
ATACCTTTTA
CCTTCAATAT
CTGGATCTCT
TCCTTTACCA
AACAATCCTC
TACCAACAAT
GATAATATCA
GTTCCAGTGC
TAACAACTTC
ATCAACAGTT
CTATATTGTT
GTCCTAATCC
ATCACCTTTA
TCATCTAATC
CAACTCCAGG
TGTCATAATA
AGCCAATCAA
ATCCTTCTTC
TTGGCCACCC
ATATCACGTT
GGGCAATAAA
TCCAATAACA
AATTCCTTAT
CGGATTTAGC
AATTTCAACA
GTTTTTTGAG
AATATTCTCC
ATATGCTAAT
GATCCCACTG
ATGATAATTC
AGCTAACATC
AATAACCCTC
TTGGCTCTTG
GTTGGTGGTG
GTTTCTTTAG
CTCCCTGTTT
TAATCCTTCA
ACCACTCCAT
TCCCAGTGAC
ACCATGAGCA
TTGGTAATAT
CTGCCCAACT
ACTAATTTTA
TAAACTCCAC
CAATATATTG
TTTCTTTACG
GTATTACCAA
TATCAGCAAA
TTTTCTATCT
TCAAAAATCA
TAAATTGATG
TTTACGTGAA
AGTTCTAATA
ATGGTTCAAT
AGTGGATTCA
TAGGAAAAAT
CATTGATTAT
ATCAATATGA
GTCTTGATTA
AGCATACATA
AGGACCTAAT
TTATCAATTA
ATTCAAGGAA
TTCCTTAGTG
GTATCAACGT
CAATTGATGC
ACATAAATTG
GTTTTCTTCA
GTTCCATTAA
TCGAAATAAT
CGCTGTGCTA
CTGGTGAGGC
ATGAGTTTCT
GCTCTCTCAC
TATAGGTCTT
AGTGTTGACT
GTCATATCTT
TTGTTTGCTA
TTTCTATTTC
TATTTCTTTC
TTCAACTGTA
AAAGGGGCGG
TATATAAACC
AGTGTGTATG
GGGTTGTTGC
TCAGGAATTG
ATCAATGTTT
AAAAGAATGG
TTGAAATCAT
CATTGAAGAA
CAAAAAAAAA
GATTTTTTCT
TTCATTATGT
TATCTGTATA
ATATGCAGGA
AATAAGATTG
CAAAAAAATA
GCCGTTTTTT
TGGATACTAT
CAAACAAGAG
GAATGACTAA
TACAGAATTA
GTGTTACGAA
TCAATGGCAC
TACAGCAACT
TTCAACAAAA
TAATCTACGT
TCAAAATATA
ATATATACTA
TTAAATAAAA
TCAAATAATA
AAATAATTTT
AAAGAAAGTA
GTACCAGCTC
TTTTTTTTGT
TTCCGTTTAT
ACCATCCAAA
TCAATTCCTA
TTAGTCGGGA
TCTAGGCTTG
GCCAAGTCGG
CCGCGGCCGC
CACCGCGGTG
GAGCTCCAAT
TCGCCCTATA
GTGAGTCGTA
TTACGCGCGC
TCACTGGCCG
TCGTTTTACA
ACGTCGTGAC
TGGGAAAACC
CTGGCGTTAC
CCAACTTAAT
CGCCTTGCAG
CACATCCCCC
TTTCGCCAGC
TGGCGTAATA
GCGAAGAGGC
CCGCACCGAT
CGCCCTTCCC
AACAGTTGCG
CAGCCTGAAT
GGCGAATGGG
ACGCGCCCTG
TAGCGGCGCA
TTAAGCGCGG
CGGGTGTGGT
GGTTACGCGC
AGCGTGACCG
CTACACTTGC
CAGCGCCCTA
GCGCCCGCTC
CTTTCGCTTT
CTTCCCTTCC
TTTCTCGCCA
CGTTCGCCGG
CTTTCCCCGT
CAAGCTCTAA
ATCGGGGGCT
CCCTTTAGGG
TTCCGATTTA
GTGCTTTACG
GCACCTCGAC
CCCAAAAAAC
TTGATTAGGG
TGATGGTTCA
CGTAGTGGGC
CATCGCCCTG
ATAGACGGTT
TTTCGCCCTT
TGACGTTGGA
GTCCACGTTC
TTTAATAGTG
GACTCTTGTT
CCAAACTGGA
ACAACACTCA
ACCCTATCTC
GGTCTATTCT
TTTGATTTAT
AAGGGATTTT
GCCGATTTCG
GCCTATTGGT
TAAAAAATGA
GCTGATTTAA
CAAAAATTTA
ACGCGAATTT
TAACAAAATA
TTAACGCTTA
CAATTTAG