名称: | pExpress-1-Pafah1b1(rat) |
---|---|
别称: | NM_031763.3;LIS1 |
基因长: | 1233bp |
质粒宿主: | 大肠杆菌 |
质粒用途: | 基因模板 |
片段类型: | cDNA |
片段物种: | 大鼠 |
原核抗性: | Amp |
筛选标记: | |
荧光标记: | |
启动子: | |
复制子: | pUC |
拷贝数: | |
感受态: | DH5a |
温度: | 37度 |
背景载体: | |
正向引物: | M13R:CAGGAAACAGCTATGACC |
反向引物: | M13F:TGTAAAACGACGGCCAGT |
诱导方式: |
1、本平台所有产品仅供科研使用,不能用于临床试验,包括人体口服、注射或者体外用药;
2、小包装质粒以模板价格出售,只保证基因部分测序正确,不保证质粒的表达等实验效果;
3、某些质粒即使是出品公司亦没有完整测过序,如关键部位的序列测序正确,亦认为是正确质粒;
4、小包装质粒产品的售后期为您收到产品之日起3个月,收到质粒后请及时转化操作,过期需重新购买;
5、质粒构建皆收取的是成本费用,所有质粒会分享给其他实验者,保密性质粒请提前告知并缴纳保密费用;
6、因科学研究为探索未知的活动,存在较大不确定性,故在任何情况下淼灵都不承担额外的连带责任;
7、发表[中文论文]请标注:产品名称(产品货号) 由武汉淼灵生物科技有限公司提供;
8、发表[英文论文]请标注:Product Name (Product Item Number) was obtained from MiaoLingBio,China.
操作说明
一、质粒干粉(负20度保存,保质期90天,常温运输)
1、收到干粉质粒后请先5000rpm离心1min,再加入20μl无菌水溶解质粒;
2、将相应的感受态于冰盒上解冻,取2μl质粒加至100μl感受态中,冰浴 30min;
3、42度热激60s,冰浴2min,加入900μl无抗LB培养基,180rpm震荡培养45min;
4、6000rpm离心3min,留100μl上清重悬,再涂至对应抗性的LB平板上;
5、倒置培养过夜后,如菌落过多则稀释质粒转化,如没有菌落则取10ul质粒转化;
6、挑单菌落至对应抗性的LB液体培养基中过夜震荡培养,根据需要提取质粒。
二、液体质粒(负20度保存,保质期90天,冰袋运输)
1、收到液体质粒后请甩动保存管,让液体质粒不要吸附在管壁上;
2、根据实验需求取适量质粒,其余保存于负20度冰箱。
三、甘油菌种(负80度保存,保质期90天,冰袋运输)
1、收到甘油菌种后请甩动保存管,让菌液不要吸附在管壁上;
2、用接种环在固体平板上四区划线,如有抗性就加对应抗性;
3、恒温培养箱倒置培养12~16h;
4、务必挑取单菌落接种于液体培养基中,如有抗性就加对应抗性;
5、摇床震荡培养过夜,根据实验需要培养菌种。
TGGTGAAAAT
ATAGAACCAG
TTTCGGTCCG
GAATTCCCGG
GATGTCCGGC
GGCCGAGATA
GCGAGTGAGG
GAGCGAACGA
GCAGCGACCC
GAGAGTCCAG
GGAGCGAGGA
GGAGCCGGAG
GGGAGCGCTC
AGGCGCGAGC
GAGAGGACGC
GCGAACGCTG
GGCTAGGGCT
CGAGCCCCGG
AACGGCTGAG
GAGCCCGCCC
GCGGCCCTCC
CCTCCCCCTC
CCCGGGACCG
GGCCCAGCGC
GCCATCCTCC
CCCTCCCTCC
CTCCCTCCCT
CCTTCCTCCC
TTCCCTCTCC
CTCCCCCTCC
CCCGCTGGTG
GATGGGAGTG
AAGGACGGAA
GAGGCCCTGC
GGAGGCGGTG
GTGCAGCGCT
CCGGTGGAAT
GAACCTTACT
TGTTGACTGG
TTGCTGATTG
GATTCACTTG
AAAAAAGAAT
CATATTTCCT
TCTGTGGAAG
CCACATAGTG
GCATATTTAA
TTCAAATCCA
GGGATCACAA
CTTTTGATTT
TTCTGGAGGG
ACATACCACT
ATATCAAATA
AGCTTGACAT
TACAGCCAAA
ATGGTGCTGT
CCCAGAGACA
ACGAGATGAA
CTAAATCGAG
CTATAGCAGA
TTATCTTCGT
TCAAATGGCT
ATGAAGAGGC
ATATTCCGTT
TTTAAAAAGG
AAGCTGAACT
AGATATGAAT
GAAGAATTAG
ATAAGAAGTA
TGCTGGTCTT
TTGGAAAAAA
AATGGACATC
TGTTATTAGA
TTACAAAAAA
AGGTAATGGA
ATTAGAATCA
AAACTAAATG
AAGCAAAAGA
AGAATTTACG
TCAGGTGGTC
CTCTTGGTCA
GAAACGAGAC
CCAAAAGAAT
GGATTCCCCG
TCCACCTGAG
AAATATGCAT
TGAGTGGTCA
TAGGAGTCCA
GTTACTCGAG
TCATTTTCCA
TCCTGTGTTC
AGTGTTATGG
TCTCTGCTTC
AGAGGATGCT
ACAATTAAGG
TGTGGGATTA
TGAGACTGGA
GATTTTGAGC
GAACTCTCAA
GGGGCATACA
GATTCTGTAC
AGGACATTTC
CTTTGACCAC
AGTGGCAAAC
TCTTGGCTTC
CTGTTCTGCA
GATATGACGA
TTAAATTATG
GGATTTTCAG
GGTTTTGAAT
GCATCAGAAC
CATGCACGGC
CACGACCACA
ATGTCTCTTC
AGTAGCCATC
ATGCCTAATG
GAGATCATAT
AGTGTCTGCC
TCAAGGGATA
AAACTATAAA
AATGTGGGAA
GTGCAAACTG
GCTACTGTGT
GAAGACATTC
ACAGGACACA
GAGAATGGGT
ACGTATGGTG
CGGCCAAATC
AGGACGGCAC
TCTGATAGCC
AGCTGTTCCA
ATGACCAGAC
TGTGCGTGTA
TGGGTTGTAG
CAACAAAGGA
ATGCAAAGCT
GAGCTCCGAG
AACACGAACA
TGTGGTAGAA
TGCATTTCCT
GGGCTCCAGA
AAGTTCATAT
TCTTCCATCT
CTGAAGCAAC
AGGATCTGAG
ACTAAAAAAA
GTGGCAAGCC
TGGACCCTTC
TTGCTATCTG
GTTCCAGAGA
CAAAACTATT
AAGATGTGGG
ACGTCAGTAC
TGGCATGTGC
CTTATGACTC
TGGTGGGTCA
TGATAATTGG
GTACGTGGAG
TTCTGTTCCA
TTCTGGGGGG
AAGTTTATTT
TGAGTTGTGC
TGATGACAAG
ACCCTCCGTG
TATGGGATTA
CAAGAACAAG
CGATGCATGA
AGACCCTCAA
TGCGCATGAA
CACTTTGTTA
CCTCCTTGGA
TTTCCATAAG
ACGGCACCCT
ATGTGGTTAC
TGGCAGTGTA
GATCAAACAG
TAAAGGTGTG
GGAGTGCCGT
TGATTGAGTC
ACATTTGGTT
CTTCCTCCCT
TTTTTCCTCT
GGATGCACTC
TGATGATACC
ATGGTTACCC
CATTTGAGCT
CTGTTTAAAT
AAATATTGTC
CTTTCATGTA
AATTATTCTG
GATGTAGATT
GAGCTTATTA
AATGTTACAC
ACAAAGTATT
CATGCATGGT
GAATCCAAAT
TGTATACTGT
AAATTTACAT
ATGTTGTCTA
GAAGTACCAT
AGGGGTTAAA
AACCTGGGCT
GGCATTGGTC
ACACCAGGCC
TACAAGGGCA
GAAGTTGAAT
AAATTGAACT
AGGGCACTAA
ACTGAATAGT
TGACAGTGTC
ATTTTATGTT
GGATTATTAA
TTATTGTTTT
TCTTCCTGCT
ATCTGTTGGT
GCCTGACTTG
ATGGCCTCAT
TTTGGGGAAA
GTGGTTATTA
GGGCTTTTTC
TGAAAGGGGA
TCTATGGAAC
ATCACGTAAG
GGGGTTAATG
AACTTTAAGG
GGGTAAAAGG
AAAACTA