名称: | pCMV-SPORT6-Angptl4(mouse) |
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别称: | BC021343.1;ARP4;Bk89;FIAF;HFARP;Ng27;PGAR;PGARG;pp1158 |
基因长: | 1233bp |
质粒宿主: | 大肠杆菌 |
质粒用途: | 基因模板 |
片段类型: | cDNA |
片段物种: | 小鼠 |
原核抗性: | Amp |
筛选标记: | |
荧光标记: | |
启动子: | |
复制子: | pUC |
拷贝数: | |
感受态: | DH5a |
温度: | 37度 |
背景载体: | pCMV-SPORT6 |
正向引物: | M13R:CAGGAAACAGCTATGACC |
反向引物: | M13F:TGTAAAACGACGGCCAGT |
诱导方式: |
1、本平台所有产品仅供科研使用,不能用于临床试验,包括人体口服、注射或者体外用药;
2、小包装质粒以模板价格出售,只保证基因部分测序正确,不保证质粒的表达等实验效果;
3、某些质粒即使是出品公司亦没有完整测过序,如关键部位的序列测序正确,亦认为是正确质粒;
4、小包装质粒产品的售后期为您收到产品之日起3个月,收到质粒后请及时转化操作,过期需重新购买;
5、质粒构建皆收取的是成本费用,所有质粒会分享给其他实验者,保密性质粒请提前告知并缴纳保密费用;
6、因科学研究为探索未知的活动,存在较大不确定性,故在任何情况下淼灵都不承担额外的连带责任;
7、发表[中文论文]请标注:产品名称(产品货号) 由武汉淼灵生物科技有限公司提供;
8、发表[英文论文]请标注:Product Name (Product Item Number) was obtained from MiaoLingBio,China.
操作说明
一、质粒干粉(负20度保存,保质期90天,常温运输)
1、收到干粉质粒后请先5000rpm离心1min,再加入20μl无菌水溶解质粒;
2、将相应的感受态于冰盒上解冻,取2μl质粒加至100μl感受态中,冰浴 30min;
3、42度热激60s,冰浴2min,加入900μl无抗LB培养基,180rpm震荡培养45min;
4、6000rpm离心3min,留100μl上清重悬,再涂至对应抗性的LB平板上;
5、倒置培养过夜后,如菌落过多则稀释质粒转化,如没有菌落则取10ul质粒转化;
6、挑单菌落至对应抗性的LB液体培养基中过夜震荡培养,根据需要提取质粒。
二、液体质粒(负20度保存,保质期90天,冰袋运输)
1、收到液体质粒后请甩动保存管,让液体质粒不要吸附在管壁上;
2、根据实验需求取适量质粒,其余保存于负20度冰箱。
三、甘油菌种(负80度保存,保质期90天,冰袋运输)
1、收到甘油菌种后请甩动保存管,让菌液不要吸附在管壁上;
2、用接种环在固体平板上四区划线,如有抗性就加对应抗性;
3、恒温培养箱倒置培养12~16h;
4、务必挑取单菌落接种于液体培养基中,如有抗性就加对应抗性;
5、摇床震荡培养过夜,根据实验需要培养菌种。
AGCATAGGTG
ACTATAGACA
GTTTGTACAA
AAAAGCAGGC
TGGTACCGGT
CCGGAATTCC
CGGGATATCG
TCGACCCACG
CGTCCGACGG
GCTCCAGATC
TTCTTCTGCA
CCAGAGCAAG
TCTAAGTCTG
AGCCGGCTCC
CCCAGAACTC
CAGCTGCTGG
GTCTTGAACT
CCTGCGTTCC
GGAGTCCTAG
CGTTGCTGCA
CCCAAGGCCA
CCCCCAGAAT
CATGCGCTGC
GCTCCGACAG
CAGGCGCTGC
CCTGGTGCTA
TGCGCGGCTA
CTGCGGGGCT
TTTGAGCGCG
CAAGGGCGCC
CTGCACAGCC
AGAGCCACCG
CGCTTTGCAT
CCTGGGACGA
GATGAACTTG
CTGGCTCACG
GGCTGCTACA
GCTCGGCCAT
GGGCTGCGCG
AACACGTGGA
GCGCACCCGT
GGGCAGCTGG
GCGCGCTGGA
GCGCCGCATG
GCTGCCTGTG
GTAACGCTTG
TCAGGGGCCC
AAGGGAAAAG
ATGCACCCTT
CAAAGACTCC
GAGGATAGAG
TCCCTGAAGG
CCAGACTCCT
GAGACTCTGC
AGAGTTTGCA
GACTCAGCTC
AAGGCTCAAA
ACAGCAAGAT
CCAGCAATTG
TTCCAGAAGG
TGGCCCAGCA
GCAGAGATAC
CTATCAAAGC
AGAATCTGAG
AATACAGAAT
CTTCAGAGCC
AGATAGACCT
CTTGGCCCCC
ACGCACCTAG
ACAATGGAGT
AGACAAGACT
TCGAGGGGAA
AGAGGCTTCC
CAAGATGACC
CAGCTCATTG
GCTTGACTCC
CAACGCCACC
CACTTACACA
GGCCGCCCCG
GGACTGCCAG
GAACTCTTCC
AAGAAGGGGA
GAGGCACAGT
GGACTTTTCC
AGATCCAGCC
TCTGGGGTCT
CCACCATTTT
TGGTCAACTG
TGAGATGACT
TCAGATGGAG
GCTGGACAGT
GATTCAGAGA
CGCCTGAACG
GCTCTGTGGA
CTTCAACCAG
TCCTGGGAAG
CCTACAAGGA
TGGCTTCGGA
GATCCCCAAG
GCGAGTTCTG
GCTGGGCCTG
GAAAAGATGC
ACAGCATCAC
AGGGAACCGA
GGAAGCCAAT
TGGCTGTGCA
GCTCCAGGAC
TGGGATGGCA
ATGCCAAATT
GCTCCAATTT
CCCATCCATT
TGGGGGGTGA
GGACACAGCC
TACAGCCTGC
AGCTCACTGA
GCCCACGGCC
AATGAGCTGG
GTGCCACCAA
TGTTTCCCCC
AATGGCCTTT
CCCTGCCCTT
CTCTACTTGG
GACCAAGACC
ATGACCTCCG
TGGGGACCTT
AACTGTGCCA
AGAGCCTCTC
TGGTGGCTGG
TGGTTTGGTA
CCTGTAGCCA
TTCCAATCTC
AATGGACAAT
ACTTCCACTC
TATCCCACGG
CAACGGCAGG
AGCGTAAAAA
GGGTATCTTC
TGGAAAACAT
GGAAGGGCCG
CTACTATCCT
CTGCAGGCTA
CCACCCTGCT
GATCCAGCCC
ATGGAGGCTA
CAGCAGCCTC
TTAGCCTCCT
CACTGGAGCC
TGGTTCCAGG
CCTAAAAAGA
CAGTGACTTT
GGTTGTGGCC
CTGAGATTTG
GCCATTCTCT
GCTGGGGGCA
GGAGCTCTAA
GTAGGGCTAT
CTGCGTCTTG
TGGACAAAGA
AGAAGCCCGT
AACTGGAGAG
ACTGGAGGAC
CCCTTTTCCC
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TGCAAGCATT
GTTGTCTGAA
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