名称: | pCMV-SPORT6-Picalm(mouse) |
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别称: | BC011470.1;CALM;CLTH;MGC19382;MGC36413;MGC36616;mKIAA4114;PAP180 |
基因长: | 1968bp |
质粒宿主: | 大肠杆菌 |
质粒用途: | 基因模板 |
片段类型: | cDNA |
片段物种: | 小鼠 |
原核抗性: | Amp |
筛选标记: | |
荧光标记: | |
启动子: | |
复制子: | pUC |
拷贝数: | |
感受态: | DH5a |
温度: | 37度 |
背景载体: | pCMV-SPORT6 |
正向引物: | M13R:CAGGAAACAGCTATGACC |
反向引物: | M13F:TGTAAAACGACGGCCAGT |
诱导方式: |
1、本平台所有产品仅供科研使用,不能用于临床试验,包括人体口服、注射或者体外用药;
2、小包装质粒以模板价格出售,只保证基因部分测序正确,不保证质粒的表达等实验效果;
3、某些质粒即使是出品公司亦没有完整测过序,如关键部位的序列测序正确,亦认为是正确质粒;
4、小包装质粒产品的售后期为您收到产品之日起3个月,收到质粒后请及时转化操作,过期需重新购买;
5、质粒构建皆收取的是成本费用,所有质粒会分享给其他实验者,保密性质粒请提前告知并缴纳保密费用;
6、因科学研究为探索未知的活动,存在较大不确定性,故在任何情况下淼灵都不承担额外的连带责任;
7、发表[中文论文]请标注:产品名称(产品货号) 由武汉淼灵生物科技有限公司提供;
8、发表[英文论文]请标注:Product Name (Product Item Number) was obtained from MiaoLingBio,China.
操作说明
一、质粒干粉(负20度保存,保质期90天,常温运输)
1、收到干粉质粒后请先5000rpm离心1min,再加入20μl无菌水溶解质粒;
2、将相应的感受态于冰盒上解冻,取2μl质粒加至100μl感受态中,冰浴 30min;
3、42度热激60s,冰浴2min,加入900μl无抗LB培养基,180rpm震荡培养45min;
4、6000rpm离心3min,留100μl上清重悬,再涂至对应抗性的LB平板上;
5、倒置培养过夜后,如菌落过多则稀释质粒转化,如没有菌落则取10ul质粒转化;
6、挑单菌落至对应抗性的LB液体培养基中过夜震荡培养,根据需要提取质粒。
二、液体质粒(负20度保存,保质期90天,冰袋运输)
1、收到液体质粒后请甩动保存管,让液体质粒不要吸附在管壁上;
2、根据实验需求取适量质粒,其余保存于负20度冰箱。
三、甘油菌种(负80度保存,保质期90天,冰袋运输)
1、收到甘油菌种后请甩动保存管,让菌液不要吸附在管壁上;
2、用接种环在固体平板上四区划线,如有抗性就加对应抗性;
3、恒温培养箱倒置培养12~16h;
4、务必挑取单菌落接种于液体培养基中,如有抗性就加对应抗性;
5、摇床震荡培养过夜,根据实验需要培养菌种。
AGTGACTATA
GACAGTTTGT
ACAAAAAAGC
AGGCTGGTAC
CGGTCCGGAA
TTCCCGGGAT
ATCGTCGACC
CACGCGTCCG
CCCAGGCCCC
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GAGCGGAAGG
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GAGCCGCAGA
GATGTCTGGC
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CACCGCGGCC
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GATATGATAT
GTCTACATTT
ATTAGACGGT
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CATACAGACA
AGTTGCATTC
GATTTCACAA
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AGGAGCTGAT
GGAGTTATGA
GAACAATGAA
CACAGAAAAA
CTCTTAAAAA
CTGTACCAAT
TATCCAAAAT
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TTTTAATGTT
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AACTTACAAA
TGGGGTAATA
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TCATGCTCCT
CTTCAAAGAT
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TATTTGCAGC
ATACAATGAA
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ATTTATTGGA
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CAAAGAAGGT
CTTGACATCT
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TCTGACTAGG
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TCTCAGAGTT
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GCAGAGCAAG
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ATTCCAGATC
TTTCACAGGC
CCCCAGCAGT
CTTCTTGATG
CTTTAGAACA
ACATTTAGCT
TCCTTGGAAG
GAAAGAAAAT
CAAAGATTCC
ACAGCTGCAA
GCAGGGCTAC
AACACTTTCC
AATGCAGTCT
CTTCTTTGGC
AAGCACTGGC
CTATCTCTGA
CCAAAGTGGA
TGAAAGGGAA
AAACAGGCAG
CATTAGAGGA
AGAACAGGCT
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CAAAGAAACC
GCATACCTCT
CTAACAACTG
CAGCCTCTCC
GGTGTCCACC
TCAGCAGGGG
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TGCACCAGCC
ATCGACATAT
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TAGTTCTTCT
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CTAAGCTGCC
AAATGACCTG
CTTGACTTGC
AGCAGCCAAC
CTTTCACCCG
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TGCTCCTCAG
GGAGCGAGTA
CATGGGGAGA
TCCTTTCTCT
GCTACTCTAG
ATGCTGTTGA
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CCAAGCTTAA
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AGTGGTGATG
TTCACCTGCC
CATTGCTTCA
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CTTTTACTAC
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TGTTTGTTGG
ATTCAGTCCT
TCTCCAGTTG
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ATCTGTGTTT
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TCTGGTGGTG
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GCCTCCCAGA
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GACTTGGATT
CATCTTTAGC
CAACCTTGTG
GGCAATCTTG
GCATTGGAAA
TGGAACCACT
AAGAATGATG
TAAGTTGGAG
TCAACCAGGT
GAAAAGAAGT
TAACTGGAGG
ATCTAACTGG
CAACCAAAGG
TTGCACCAAC
AACTGCCTGG
AGCGCTGCAA
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CATGCATTTT
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CGCCCCCTGT
AATGGCCTAT
CCTGCTACTA
CACCAACGGG
CATGATAGGA
TATGGAATTC
CTCCTCAGAT
GGGAAGTGTA
CCTGTAATGA
CACAACCAAC
CTTAATATAC
AGCCAGCCTG
TCATGAGACC
ACCAAACCCC
TTTGGCCCTG
TATCAGGAGC
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TAGATGGAAG
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TACTCCAAGA
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CCACAGCGGG
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