名称: | pExpress-1-Gfpt1(rat) |
---|---|
别称: | NM_001005879.1;GFA; GFAT; GFAT1; GFAT1m; Gfpt |
基因长: | 2046bp |
质粒宿主: | 大肠杆菌 |
质粒用途: | 基因模板 |
片段类型: | cDNA |
片段物种: | 大鼠 |
原核抗性: | Amp |
筛选标记: | |
荧光标记: | |
启动子: | |
复制子: | pUC |
拷贝数: | |
感受态: | DH5a |
温度: | 37度 |
背景载体: | |
正向引物: | M13R:CAGGAAACAGCTATGACC |
反向引物: | M13F:TGTAAAACGACGGCCAGT |
诱导方式: |
1、本平台所有产品仅供科研使用,不能用于临床试验,包括人体口服、注射或者体外用药;
2、小包装质粒以模板价格出售,只保证基因部分测序正确,不保证质粒的表达等实验效果;
3、某些质粒即使是出品公司亦没有完整测过序,如关键部位的序列测序正确,亦认为是正确质粒;
4、小包装质粒产品的售后期为您收到产品之日起3个月,收到质粒后请及时转化操作,过期需重新购买;
5、质粒构建皆收取的是成本费用,所有质粒会分享给其他实验者,保密性质粒请提前告知并缴纳保密费用;
6、因科学研究为探索未知的活动,存在较大不确定性,故在任何情况下淼灵都不承担额外的连带责任;
7、发表[中文论文]请标注:产品名称(产品货号) 由武汉淼灵生物科技有限公司提供;
8、发表[英文论文]请标注:Product Name (Product Item Number) was obtained from MiaoLingBio,China.
操作说明
一、质粒干粉(负20度保存,保质期90天,常温运输)
1、收到干粉质粒后请先5000rpm离心1min,再加入20μl无菌水溶解质粒;
2、将相应的感受态于冰盒上解冻,取2μl质粒加至100μl感受态中,冰浴 30min;
3、42度热激60s,冰浴2min,加入900μl无抗LB培养基,180rpm震荡培养45min;
4、6000rpm离心3min,留100μl上清重悬,再涂至对应抗性的LB平板上;
5、倒置培养过夜后,如菌落过多则稀释质粒转化,如没有菌落则取10ul质粒转化;
6、挑单菌落至对应抗性的LB液体培养基中过夜震荡培养,根据需要提取质粒。
二、液体质粒(负20度保存,保质期90天,冰袋运输)
1、收到液体质粒后请甩动保存管,让液体质粒不要吸附在管壁上;
2、根据实验需求取适量质粒,其余保存于负20度冰箱。
三、甘油菌种(负80度保存,保质期90天,冰袋运输)
1、收到甘油菌种后请甩动保存管,让菌液不要吸附在管壁上;
2、用接种环在固体平板上四区划线,如有抗性就加对应抗性;
3、恒温培养箱倒置培养12~16h;
4、务必挑取单菌落接种于液体培养基中,如有抗性就加对应抗性;
5、摇床震荡培养过夜,根据实验需要培养菌种。
TTTAGGTGAA
CTATAGAACA
GTTTCGGTCC
GGAATTCCCG
GGATCCCGGA
GTCCATCTCA
TTGCCGCCAC
CCGGCCCGAG
CTCATCCTCG
CTTCCGAAGC
TCTCGCGCGC
CCGACAGCTC
GTCCCTCGCC
AGTGACCAAC
ATCATGTGTG
GTATATTTGC
TTATTTAAAT
TACCATGTTC
CTCGAACAAG
ACGAGAAATC
TTGGAGACAT
TAATCAAAGG
CCTTCAGAGA
TTGGAGTACA
GAGGATATGA
TTCTGCTGGT
GTGGGACTTG
ACGGAGGCAA
TGACAAAGAC
TGGGAAGCCA
ACGCCTGCAA
AATCCAGCTC
ATCAAGAAGA
AAGGAAAAGT
TAAGGCTCTG
GATGAAGAAG
TTCACAAACA
ACAAGATATG
GACTTGGATA
TAGAATTTGA
TGTGCATCTT
GGAATAGCTC
ATACCCGTTG
GGCGACACAT
GGAGAACCTA
GCCCTGTCAA
TAGTCACCCC
CAGCGCTCTG
ATAAAAATAA
CGAATTCATC
GTTATTCATA
ATGGAATCAT
CACCAACTAC
AAAGACTTGA
AAAAGTTTCT
GGAAAGCAAA
GGCTATGACT
TTGAATCTGA
AACAGACACA
GAGACCATCG
CTAAGCTAGT
CAAGTACATG
TATGACAACT
GGGAAAGCCA
GGACGTCAGT
TTTACTACCT
TGGTGGAGAG
AGTTATCCAG
CAATTGGAAG
GCGCCTTTGC
TCTTGTGTTT
AAAAGTGTCC
ATTTTCCGGG
GCAAGCAGTT
GGCACAAGGC
GAGGTAGCCC
TCTCTTGATT
GGTGTGCGGA
GCGAACATAA
GCTTTCTACA
GATCACATTC
CGATTCTGTA
CAGAACAGGC
AAAGACAAGA
AAGGAAGCTG
TGGTCTTTCC
CGAGTGGACA
GCACGACATG
CCTTTTCCCT
GTTGAGGAAA
AGGCGGTTGA
ATATTACTTT
GCTTCTGATG
CAAGTGCCGT
GATAGAGCAC
ACCAATCGTG
TCATCTTTCT
GGAGGATGAT
GATGTTGCAG
CCGTGGTGGA
CGGCCGTCTC
TCGATCCACC
GAATTAAACG
GACTGCAAGG
GACCACCCTG
GCCGAGCAGT
GCAAACCCTC
CAGATGGAAC
TCCAGCAGAT
CATGAAGGGC
AACTTTAGTT
CATTTATGCA
GAAGGAAATT
TTTGAGCAGC
CAGAATCTGT
TGTGAACACA
ATGAGAGGAA
GAGTCAATTT
TGATGACTAC
ACTGTGAACT
TGGGAGGTCT
GAAAGACCAC
ATTAAGGAGA
TCCAGCGGTG
TCGGCGGTTG
ATTCTGATTG
CTTGTGGCAC
AAGTTACCAC
GCTGGTATGG
CAACCCGTCA
GGTCCTAGAG
GAGCTGACAG
AGTTACCAGT
GATGGTGGAG
CTTGCCAGCG
ACTTCTTGGA
TAGAAACACT
CCAGTCTTCC
GAGATGATGT
TTGCTTTTTC
ATCAGTCAAT
CAGGCGAGAC
AGCTGACACC
CTGATGGGTC
TTCGCTACTG
TAAGGAGAGA
GGAGCCTTAA
CTGTGGGGAT
TACAAATACT
GTCGGCAGTT
CGATATCACG
GGAGACAGAT
TGTGGGGTTC
ATATCAATGC
TGGTCCTGAG
ATCGGCGTGG
CCAGTACAAA
GGCTTACACC
AGCCAGTTCG
TGTCCCTTGT
GATGTTTGCC
CTCATGATGT
GTGATGACAG
AATCTCCATG
CAAGAAAGAC
GCAAAGAGAT
CATGCTGGGA
CTGAAGCGAC
TGCCGGACTT
GATTAAGGAA
GTGTTGAGCA
TGGATGATGA
AATTCAGAAG
CTGGCGACAG
AGCTTTACCA
CCAGAAGTCG
GTCCTGATAA
TGGGCCGAGG
CTATCATTAT
GCTACATGTC
TTGAAGGAGC
CCTGAAAATC
AAGGAGATTA
CATATATGCA
TTCTGAAGGC
ATCCTTGCTG
GTGAGCTAAA
ACACGGCCCT
CTGGCCTTGG
TGGACAAGTT
GATGCCTGTC
ATCATGATCA
TCATGCGAGA
CCACACTTAC
GCCAAGTGCC
AGAATGCTCT
TCAGCAAGTC
GTTGCACGGC
AGGGGCGTCC
AGTCGTGATC
TGTGATAAGG
AGGATACTGA
GACCATTAAG
AATACAAAAA
GGACAATCAA
GGTGCCCCAC
TCAGTGGACT
GCTTGCAGGG
CATTCTCAGC
GTGATCCCCT
TACAGCTGCT
GGCCTTCCAT
CTGGCTGTGC
TGAGAGGCTA
CGATGTCGAT
TTCCCACGGA
ATCTTGCCAA
ATCTGTAACC
GTAGAGTAAA
AGACACCTGA
AACTTAAGAC
AGCTAAGCAA
CACAAGATAC
CTTTTGTATT
TAAATTTTTG
ATTTAAAATA
TTGCCTCCTG
AAAGCCTTTT
TTAGTAAATC
TTATTTATAT
ATCAAAAAAA
AAAAAAAAAA
AAAAAAAAAG
GGCGGCCGCT
TAATTAACCT
CGAGGAGTGG
TCCCTATAGT
GAGTCGTATT
ATAAGCTAGG
CACTGGCCGT
CGTTTTACAA
CGTCGTGACT
GGGAAAACTG
CTAGCTTGGG
ATCTTTGTGA
AGGAACCTTA
CTTCTGTGGT
GTGACATAAT
TGGACAAACT
ACCTACAGAG
ATTTAAAGCT
CTAAGGTAAA
TATAAAATTT
TTAAGTGTAT
AATGTGTTAA
ACTAGCTGCA
TATGCTTGCT
GCTTGAGAGT
TTTGCTTACT
GAGTATGATT
TATGAAAATA
TTATACACAG
GAGCTAGTGA
TTCTAATTGT
TTGTGTATTT
TAGATTCACA
GTCCCAAGGC
TCATTTCAGG
CCCCTCAGTC
CTCACAGTCT
GTTCATGATC
ATAATCAGCC
ATACCACATT
TGTAGAGGTT
TTACTCGCTT
TAAAAACTTC
CACACCTCCC
CTGAACCTGA
AACATAAATG
AATGCATTGT
TGTGTTACTC
GCTCATTGCA
GCTATATGGT
TACAATTAAG
CAATAGCATC
A