名称: | pExpress-1-Hspbp1(rat) |
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别称: | BC072541.1 |
基因长: | 1074bp |
质粒宿主: | 大肠杆菌 |
质粒用途: | 基因模板 |
片段类型: | cDNA |
片段物种: | 大鼠 |
原核抗性: | Amp |
筛选标记: | |
荧光标记: | |
启动子: | |
复制子: | pUC |
拷贝数: | |
感受态: | DH5a |
温度: | 37度 |
背景载体: | |
正向引物: | M13R:CAGGAAACAGCTATGACC |
反向引物: | M13F:TGTAAAACGACGGCCAGT |
诱导方式: |
1、本平台所有产品仅供科研使用,不能用于临床试验,包括人体口服、注射或者体外用药;
2、小包装质粒以模板价格出售,只保证基因部分测序正确,不保证质粒的表达等实验效果;
3、某些质粒即使是出品公司亦没有完整测过序,如关键部位的序列测序正确,亦认为是正确质粒;
4、小包装质粒产品的售后期为您收到产品之日起3个月,收到质粒后请及时转化操作,过期需重新购买;
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操作说明
一、质粒干粉(负20度保存,保质期90天,常温运输)
1、收到干粉质粒后请先5000rpm离心1min,再加入20μl无菌水溶解质粒;
2、将相应的感受态于冰盒上解冻,取2μl质粒加至100μl感受态中,冰浴 30min;
3、42度热激60s,冰浴2min,加入900μl无抗LB培养基,180rpm震荡培养45min;
4、6000rpm离心3min,留100μl上清重悬,再涂至对应抗性的LB平板上;
5、倒置培养过夜后,如菌落过多则稀释质粒转化,如没有菌落则取10ul质粒转化;
6、挑单菌落至对应抗性的LB液体培养基中过夜震荡培养,根据需要提取质粒。
二、液体质粒(负20度保存,保质期90天,冰袋运输)
1、收到液体质粒后请甩动保存管,让液体质粒不要吸附在管壁上;
2、根据实验需求取适量质粒,其余保存于负20度冰箱。
三、甘油菌种(负80度保存,保质期90天,冰袋运输)
1、收到甘油菌种后请甩动保存管,让菌液不要吸附在管壁上;
2、用接种环在固体平板上四区划线,如有抗性就加对应抗性;
3、恒温培养箱倒置培养12~16h;
4、务必挑取单菌落接种于液体培养基中,如有抗性就加对应抗性;
5、摇床震荡培养过夜,根据实验需要培养菌种。
GGCCTAGGTA
CTATAGACAG
TTTCGGTCCG
GAATTCCCGG
GATGTCCAAC
AGAGTCAGGT
GCAGGCGAGT
CTGTCTTTAG
GCGTGGTGGC
CGCTCTAGAC
CGGGCAAGCA
GACCTTAAGG
AATCGACCCA
TCCCGACGCC
AGAGCTGCCT
CACCGGTGAC
CATCAATTTC
TTTTCAACAC
ATTCTTCCTT
CACAGACAGT
CCATGGCAGA
CAAAGGCTCA
GGGGGCAGTC
GCCTCCCCCT
CGCACTGCCT
CCGGCCTCCC
AGGGTTGCTC
GTCAGGGAGC
AGTGGCTCCT
CGGCGGGGGG
CTCAGGCAAC
CCTCGCCTTC
CACGGAACCT
CCAAGGCCTG
CTGCAGATGG
CTATTACTGC
GGGCTCTGAG
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CTCCTCCAGA
ACCCATGAGC
GAGGAGAGAC
GCCAATGGCT
GCAGGAAGCC
ATGTCAGCTG
CCTTCCGAGG
CCAGCGGGAA
GAGGTAGAGC
AGATGAAGAA
CTGCCTCCGG
GTCTTGTCCC
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CCCAACTGCT
GGTGAAGCTG
AACTGGCCAC
TGACCAGCAG
GAGCGTGAAG
GGGCACTAGA
GCTGCTGGCA
GACCTGTGCG
AGAACATGGA
CAATGCGGCA
GATTTCTGCC
AGCTGTCAGG
CATGCACCTG
CTGGTGGGTC
GATACCTGGA
GGCAGGAGCT
GCAGGGCTGC
GTTGGAGGGC
AGCACAGCTC
ATCGGCACGT
GCAGTCAGAA
TGTTGCAGCC
ATCCAGGAGC
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CTTGGGTGCC
CTGCGTAAGC
TACTTCGGCT
GCTCGACCGG
GACTCCTGCG
ACACGGTACG
AGTCAAGGCT
CTCTTCGCCA
TCTCCTGTCT
TGTCCGAGAG
CAGGAGGCTG
GATTGCTGCA
GTTCCTCCGC
CTGGATGGAT
TCTCAGTGCT
GATGCGGGCC
ATGCAGCAGC
AAGTGCAGAA
GCTCAAGGTC
AAGTCAGCAT
TCCTGCTGCA
GAACCTGCTG
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CTGAGCACAA
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TGCTCCATGG
GGATGGTCCA
GCAGCTGGTG
GCCCTTGTGA
GGACAGAACA
CAGTCCTTTC
CATGAGCATG
TGCTTGGAGC
CCTGTGCAGC
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GGGCCTGGAG
GAACTGCTCC
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GAGTTCTGTG
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TTCTCCAGCC
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