名称: | pExpress-1-Blzf1(rat) |
---|---|
别称: | NM_001017494.1 |
基因长: | 1203bp |
质粒宿主: | 大肠杆菌 |
质粒用途: | 基因模板 |
片段类型: | cDNA |
片段物种: | 大鼠 |
原核抗性: | Amp |
筛选标记: | |
荧光标记: | |
启动子: | |
复制子: | pUC |
拷贝数: | |
感受态: | DH5a |
温度: | 37度 |
背景载体: | pExpress-1 |
正向引物: | M13R:CAGGAAACAGCTATGACC |
反向引物: | M13F:TGTAAAACGACGGCCAGT |
诱导方式: |
1、本平台所有产品仅供科研使用,不能用于临床试验,包括人体口服、注射或者体外用药;
2、小包装质粒以模板价格出售,只保证基因部分测序正确,不保证质粒的表达等实验效果;
3、某些质粒即使是出品公司亦没有完整测过序,如关键部位的序列测序正确,亦认为是正确质粒;
4、小包装质粒产品的售后期为您收到产品之日起3个月,收到质粒后请及时转化操作,过期需重新购买;
5、质粒构建皆收取的是成本费用,所有质粒会分享给其他实验者,保密性质粒请提前告知并缴纳保密费用;
6、因科学研究为探索未知的活动,存在较大不确定性,故在任何情况下淼灵都不承担额外的连带责任;
7、发表[中文论文]请标注:产品名称(产品货号) 由武汉淼灵生物科技有限公司提供;
8、发表[英文论文]请标注:Product Name (Product Item Number) was obtained from MiaoLingBio,China.
操作说明
一、质粒干粉(负20度保存,保质期90天,常温运输)
1、收到干粉质粒后请先5000rpm离心1min,再加入20μl无菌水溶解质粒;
2、将相应的感受态于冰盒上解冻,取2μl质粒加至100μl感受态中,冰浴 30min;
3、42度热激60s,冰浴2min,加入900μl无抗LB培养基,180rpm震荡培养45min;
4、6000rpm离心3min,留100μl上清重悬,再涂至对应抗性的LB平板上;
5、倒置培养过夜后,如菌落过多则稀释质粒转化,如没有菌落则取10ul质粒转化;
6、挑单菌落至对应抗性的LB液体培养基中过夜震荡培养,根据需要提取质粒。
二、液体质粒(负20度保存,保质期90天,冰袋运输)
1、收到液体质粒后请甩动保存管,让液体质粒不要吸附在管壁上;
2、根据实验需求取适量质粒,其余保存于负20度冰箱。
三、甘油菌种(负80度保存,保质期90天,冰袋运输)
1、收到甘油菌种后请甩动保存管,让菌液不要吸附在管壁上;
2、用接种环在固体平板上四区划线,如有抗性就加对应抗性;
3、恒温培养箱倒置培养12~16h;
4、务必挑取单菌落接种于液体培养基中,如有抗性就加对应抗性;
5、摇床震荡培养过夜,根据实验需要培养菌种。
TAGGGTGACT
ATAGACAGTT
TCGGTCCGGA
ATTCCCGGGA
GGAAGGCTTG
GGCGGGTTGG
CATCCGAATG
CCAGAGGTGT
TTACAAGTTA
GCCGGCTGCT
GAGTGAGTGA
AGAACCTGAG
CGGTGAACAT
TGAAATAAGG
ATATCAGAGG
TCTTCAGTGA
AAGTCTTGGA
TTGTATTTTC
ATTAGTTATG
GAAAAAATGA
CTACTCTTAA
AAGTTTTGAA
AGCAAAGGCA
TCCTTACTTC
GACCCCAATC
CGAGGAGCAG
GAGATGGAAT
GGAAACAGAG
GAGCCCCCTA
AGTCTGTTGA
AGTCACCCAT
GGAGTCCAAC
CCATAAATCA
GCATGTCCTT
CCAAGTCCAC
GTAAGAAAGT
CCCCTCAGAC
AGCCCAGGTG
TTCTTCAGCT
GGGGAAGATT
CTTAATGAAA
AAACAGTGGA
AGTCGAAGCT
GTCAGAATAT
TTGTTCCCAA
AGCTGCTATC
ACTCACGACA
TCCCCACCAA
GAGTGCAAAG
GTTAAGTCCC
TAGGACATCA
CAGAGAAGAG
CTCCACAATC
AATCAGAGGT
GGTCACAGAC
CCAAGGAAGG
AACTCTCAGA
GGTCAAGAAG
GTTTTGGAAA
AGCTCAAGAA
TTCTGAAAGG
AGGCTACTTC
AGGACAAAGA
AGGTCTTTCA
AATCAGCTCC
GAGTACAGAC
AGAGGTAAAT
CGTGAGTTAA
AAAAGTTGCT
TGTGGCTTCT
GTTGGGGATG
ACCCACAGTA
TCACTTTGAA
CGTCTAGCCC
GGGAGAAAAA
CCAGCTCATC
TTAGAAAATG
AAGCACTCGG
TCGGAACACA
GCCCAGCTCT
CTGAACAGCT
GGAACGGATG
TCAATACAGT
GCGATGTTTG
GAGAAGTAAA
TTCCTTGCAA
GCAGGGTGAT
GGCAGATGAA
TTAACAAACT
TCAGAGTAGT
TCTACAGCAT
CAGAACCGAG
ATGCCCAGAG
CGCTATCCAG
GATCTCCTGA
GTGAAAGAGA
ACAGTTCCGT
CAGGAAATGA
TCTCCACCCA
GAAATTTTTG
GAAGAACTCT
TGGTCTCCTT
ACAGTGGGGG
AGAGAACAGA
CATACTCCCC
TAACACACAG
CCCCACAGCA
CGGCAGACCT
AGCACTCACA
AACCACAGGC
TGGCAGAGGC
GGTGCACGCT
CATCTGCTGG
GAAACGTTGG
CATCAGCCAT
CCGAAGAGGA
CTCCAGCAAC
AGCAGAAGTC
TGCAGTACCC
CAGCTGAGAA
GATGGCTGAA
AAGGTTCTGC
GGATTTTGGA
TCCAGTTGCC
TGTACAGAAA
GCTCTCCGGA
CAATGCATTT
GCCGAATCCA
CATTACTCAC
TACAAAGAAA
AATATTGGAC
GTTTCCATCC
CTATACCAGA
TATGAAAATA
TAACTTTCAA
TTGCTGCAGT
CACTGCCAGG
GGGAGCTCCT
TGCTCTCTAG
TGTGTGCTGA
CTGGAGGAGA
GCCGATTGGA
GGCCGGCTCA
GTCCCCACAG
TCATTATTAT
TGAGATGCTA
GAAATAAAAT
CAATTCGCCT
TTATATAATA
CATGCCCATG
AAGCTATTCA
TGTACTGGAT
TCCAGATTAT
TTTTCATAAC
AAATATCTCA
GGGTAAGAAA
GTAAAGCTAT
GTAGATATAT
TTAAAGTACA
AAGTACTTCC
CAGTACATAG
TATTTATGCG
AAAAAACTAA
AAAGACTTTT
ATAACTTTCT
TTTAGGCCCT
ATATTATTAT
TCTGTTATAT
ATTTTATATA
AAGTATAAAC
AGGTTTCATT
TTGGTGCATA
AAACAAAAAA
CAGGCAAACT
ACAGCCATGC
TTTGTGAAGG
GGTATGGTCA
TGTCAACCTG
TATCACTCTC
TAGGCAGCTT
TACTGTACGT
AAGCAGAGTC
CATCCCTTTA
CAGAGCAAGG
CTTGGAGGGG
AATATCTGGG
GGCACAGGAA
AAAGGGGATT
CCCA