名称: | pExpress-1-Calr3(rat) |
---|---|
别称: | NM_001012212.1 |
基因长: | 1140bp |
质粒宿主: | 大肠杆菌 |
质粒用途: | 基因模板 |
片段类型: | cDNA |
片段物种: | 大鼠 |
原核抗性: | Amp |
筛选标记: | |
荧光标记: | |
启动子: | |
复制子: | pUC |
拷贝数: | |
感受态: | DH5a |
温度: | 37度 |
背景载体: | pExpress-1 |
正向引物: | M13R:CAGGAAACAGCTATGACC |
反向引物: | M13F:TGTAAAACGACGGCCAGT |
诱导方式: |
1、本平台所有产品仅供科研使用,不能用于临床试验,包括人体口服、注射或者体外用药;
2、小包装质粒以模板价格出售,只保证基因部分测序正确,不保证质粒的表达等实验效果;
3、某些质粒即使是出品公司亦没有完整测过序,如关键部位的序列测序正确,亦认为是正确质粒;
4、小包装质粒产品的售后期为您收到产品之日起3个月,收到质粒后请及时转化操作,过期需重新购买;
5、质粒构建皆收取的是成本费用,所有质粒会分享给其他实验者,保密性质粒请提前告知并缴纳保密费用;
6、因科学研究为探索未知的活动,存在较大不确定性,故在任何情况下淼灵都不承担额外的连带责任;
7、发表[中文论文]请标注:产品名称(产品货号) 由武汉淼灵生物科技有限公司提供;
8、发表[英文论文]请标注:Product Name (Product Item Number) was obtained from MiaoLingBio,China.
操作说明
一、质粒干粉(负20度保存,保质期90天,常温运输)
1、收到干粉质粒后请先5000rpm离心1min,再加入20μl无菌水溶解质粒;
2、将相应的感受态于冰盒上解冻,取2μl质粒加至100μl感受态中,冰浴 30min;
3、42度热激60s,冰浴2min,加入900μl无抗LB培养基,180rpm震荡培养45min;
4、6000rpm离心3min,留100μl上清重悬,再涂至对应抗性的LB平板上;
5、倒置培养过夜后,如菌落过多则稀释质粒转化,如没有菌落则取10ul质粒转化;
6、挑单菌落至对应抗性的LB液体培养基中过夜震荡培养,根据需要提取质粒。
二、液体质粒(负20度保存,保质期90天,冰袋运输)
1、收到液体质粒后请甩动保存管,让液体质粒不要吸附在管壁上;
2、根据实验需求取适量质粒,其余保存于负20度冰箱。
三、甘油菌种(负80度保存,保质期90天,冰袋运输)
1、收到甘油菌种后请甩动保存管,让菌液不要吸附在管壁上;
2、用接种环在固体平板上四区划线,如有抗性就加对应抗性;
3、恒温培养箱倒置培养12~16h;
4、务必挑取单菌落接种于液体培养基中,如有抗性就加对应抗性;
5、摇床震荡培养过夜,根据实验需要培养菌种。
GGGCAAAAGG
GTGACTATAG
ACAGTTTCGG
TCCGGAATTC
CCGGGATCGC
GCTCCACCCA
CCAATAAGTG
CTTCAGGTCA
CAATCGCGGG
GCGTCACGGG
ATCTGTAATT
CCAGTGCGCC
CATTCAGCAG
CCTCAGGTCA
TAATCCCAAG
GCATGCCTGG
AGTTGTAGTT
TCCGAGTTGC
GCCCCTCAGG
CGGTACGGAC
GCCTGAAAGC
GGAGAGTGGA
AGTCTCACGT
GCAGCTATGG
TCCGGGCTCG
CGTGTCGCTC
TGGGCCATCT
GCGTGCTGCG
CGTGGCACTG
GCCACTGTAT
ACTTCCAGGA
GGAGTTTCTA
GACGGAGAGC
GCTGGAGGAA
CCGCTGGGTG
CAGTCCACCA
ATGACTCCCA
GTTCGGGCAC
TTCCGAGTCT
CATCGGGGAA
GTTCTATGGG
CATAAAGAGA
AAGACAAAGG
CCTGCAGACC
ACCCAGAACA
GCCGATTCTA
CGCCATCTCT
GCAAGCTTCA
AGCCATTCAG
CAACAAAGGG
AAGACCCTGG
TAATCCAGTA
CACGGTGAAG
CATGAGCAGA
AGATCGACTG
TGGCGGTGGC
TACATCAAGG
TCTTCCCGTC
TGACCTGGAT
CAGAAGAATC
TGAATGGAAA
GTCCCAATAC
TACATCATGT
TTGGACCTGA
TATCTGTGGA
TTTGATATCA
AGAAAGTTCA
TGTTATCTTA
TATTTCAAGA
ATCAATATCA
TGAAAATAAG
AAGTCGATCA
GATGCAAGGT
GGATGGCTTC
ACGCATCTCT
ACACCCTGAT
CTTAAGGCCA
GATCTTTCTT
ATGAGGTAAA
AGTCGATGGC
CAGTCCATCG
AGTCTGGCAG
CATTGAGTAT
GACTGGAACC
TGACATCGCT
GAAGAAAATG
GAAAAAACAT
CACTGGAGTC
TAGGGACTGG
GATGAGGTGG
AAGGTAACAA
AGCCCAGGAC
TGGGAAAAGC
ACTTTCTGGA
TGCCGGTCCC
AGCAAGCCAA
GCGACTGGAA
CAGTGAGCTG
GATGGGGACT
GGCTGCAGAA
GCCACCATAC
GAGGATGGCC
TGAAAGCTGA
GGGCATCGAC
AAGGACGTGT
GGCTCCACCA
GAAGATGAGG
CCCGCTGGCT
ACCTGACGCA
GTATGACCTC
TCAGAGTTTG
AGAACATCGG
CGCCATTGGT
CTGGAGCTGT
GGCAGGTGAG
ATCTGGAACC
ATCTTTGATA
ACTTCCTGAT
CACAGATGAT
GAAGAATACG
CAGAGAAGTT
TGGCAAGGCC
ACCTGGGGGG
AAACTAAGGG
TCCAGAAAAG
GAGATGGATG
CCATACAGGC
CAAGGAAGAA
GTAAAAAAAG
CCCGAGAGGA
AGATGAGGAT
CTGCTGATGG
GGAAGTTTCA
CAGGCACAAC
CATTTCAGCA
GATTCCATAG
GCAGGGCGAA
CTGTAGTCAT
CCCGGGTCTG
CATGCTGACG
ACTGGCCCAG
CTGCAACTCT
GCATTAATAC
ACATCTGAAC
GGTAAAAAAA
AAAAAAAAAA
AAAAAAAAAA
AGGGCGGCCG
CTTAATTAAC
CTCGAGGAGT
GGTCCCTATA
GTGAGTCGTA
TTATAAGCTA
GGCACTGGCC
GTCGTTTTAC
AACGTCGTGA
CTGGGAAAAC
TGCTAGCTTG
GGATCTTTGT
GAAGGAACCT
TACTTCTGTG
GTGTGACATA
ATTGGACAAA
CTACCTACAG
AGATTTAAAG
CTCTAAGGTA
AATATAAAAT
TTTTAAGTGT
ATAATGTGTT
AAACTAGCTG
CATATGCTTG
CTGCTTGAGA
GTTTTGCTTA
CTGAGTATGA
TTTATGAAAA
TATTATACAC
AGGAGCTAGT
GATTCTAATT
GTTTGTGTAT
TTTAGATTCA
CAGTCCCAAG