名称: | pCR-XL-TOPO-SLC6A20(human) |
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别称: | BC126197.1;SIT1;XT3;Xtrp3 |
基因长: | 1779bp |
质粒宿主: | 大肠杆菌 |
质粒用途: | 基因模板 |
片段类型: | cDNA |
片段物种: | 人 |
原核抗性: | Kan |
筛选标记: | |
荧光标记: | |
启动子: | |
复制子: | pUC |
拷贝数: | |
感受态: | DH5a |
温度: | 37度 |
背景载体: | |
正向引物: | M13F:TGTAAAACGACGGCCAGT |
反向引物: | M13R:CAGGAAACAGCTATGACC |
诱导方式: |
1、本平台所有产品仅供科研使用,不能用于临床试验,包括人体口服、注射或者体外用药;
2、小包装质粒以模板价格出售,只保证基因部分测序正确,不保证质粒的表达等实验效果;
3、某些质粒即使是出品公司亦没有完整测过序,如关键部位的序列测序正确,亦认为是正确质粒;
4、小包装质粒产品的售后期为您收到产品之日起3个月,收到质粒后请及时转化操作,过期需重新购买;
5、质粒构建皆收取的是成本费用,所有质粒会分享给其他实验者,保密性质粒请提前告知并缴纳保密费用;
6、因科学研究为探索未知的活动,存在较大不确定性,故在任何情况下淼灵都不承担额外的连带责任;
7、发表[中文论文]请标注:产品名称(产品货号) 由武汉淼灵生物科技有限公司提供;
8、发表[英文论文]请标注:Product Name (Product Item Number) was obtained from MiaoLingBio,China.
操作说明
一、质粒干粉(负20度保存,保质期90天,常温运输)
1、收到干粉质粒后请先5000rpm离心1min,再加入20μl无菌水溶解质粒;
2、将相应的感受态于冰盒上解冻,取2μl质粒加至100μl感受态中,冰浴 30min;
3、42度热激60s,冰浴2min,加入900μl无抗LB培养基,180rpm震荡培养45min;
4、6000rpm离心3min,留100μl上清重悬,再涂至对应抗性的LB平板上;
5、倒置培养过夜后,如菌落过多则稀释质粒转化,如没有菌落则取10ul质粒转化;
6、挑单菌落至对应抗性的LB液体培养基中过夜震荡培养,根据需要提取质粒。
二、液体质粒(负20度保存,保质期90天,冰袋运输)
1、收到液体质粒后请甩动保存管,让液体质粒不要吸附在管壁上;
2、根据实验需求取适量质粒,其余保存于负20度冰箱。
三、甘油菌种(负80度保存,保质期90天,冰袋运输)
1、收到甘油菌种后请甩动保存管,让菌液不要吸附在管壁上;
2、用接种环在固体平板上四区划线,如有抗性就加对应抗性;
3、恒温培养箱倒置培养12~16h;
4、务必挑取单菌落接种于液体培养基中,如有抗性就加对应抗性;
5、摇床震荡培养过夜,根据实验需要培养菌种。
CTATAGGGCG
CGATTGGGTC
TCTAGATGCA
TGCTCGAGCG
GCCGCCAGTG
TGATGGATAT
CTGCAGAATT
CGCCCTTACC
GCGCACTGAG
ACTGCCGTGC
CGGACCCCCG
AGCCGGAGCC
GAGCGCGCCG
AGGCCGGGGC
CATGGAGAAA
GCGCGGCCGC
TGTGGGCCAA
CTCGCTACAG
TTCGTGTTCG
CCTGCATCTC
GTACGCCGTG
GGCCTGGGCA
ACGTGTGGCG
ATTCCCGTAC
CTGTGCCAGA
TGTACGGCGG
AGGTAGTTTC
CTGGTCCCCT
ACATCATCAT
GCTTATCGTG
GAGGGAATGC
CGCTCTTGTA
CCTGGAACTG
GCTGTGGGGC
AGCGCATGCG
GCAGGGCAGC
ATCGGCGCCT
GGAGGACCAT
CAGCCCGTAC
CTCAGTGGTG
TCGGGGTCGC
CAGCGTGGTG
GTCTCTTTCT
TCCTCTCCAT
GTACTACAAC
GTCATCAACG
CCTGGGCCTT
CTGGTACCTC
TTCCACTCCT
TCCAGGATCC
CCTGCCGTGG
TCTGTCTGCC
CACTGAATGG
TAACCACACG
GGCTACGATG
AGGAGTGCGA
GAAGGCGTCC
TCCACACAGT
ACTTCTGGTA
CAGGAAAACC
CTCAATATCT
CGCCGTCCCT
CCAGGAGAAC
GGGGGTGTGC
AGTGGGAGCC
GGCGCTGTGC
CTCCTCCTGG
CCTGGCTGGT
GGTGTACCTG
TGCATCCTGC
GTGGCACCGA
GTCCACTGGC
AAGGTGGTGT
ATTTCACGGC
GTCACTGCCC
TATTGCGTGC
TCATCATCTA
CCTCATCAGG
GGCCTCACGC
TCCACGGAGC
CACCAATGGC
CTCATGTACA
TGTTCACTCC
CAAGATAGAG
CAGCTGGCCA
ACCCCAAGGC
CTGGATCAAT
GCAGCCACCC
AGATCTTCTT
CTCACTTGGC
CTGGGCTTCG
GCAGCCTGAT
CGCCTTCGCC
AGCTACAATG
AGCCATCCAA
CAACTGCCAG
AAGCACGCCA
TCATCGTGTC
CCTCATCAAC
AGCTTCACCT
CCATATTTGC
CAGCATTGTC
ACCTTCTCCA
TCTATGGCTT
CAAGGCCACC
TTCAATTATG
AAAACTGCTT
GAAGAAGGTG
AGTCTGCTGC
TGACCAACAC
TTTTGACCTT
GAAGATGGCT
TTTTGACAGC
CAGCAACCTG
GAGCAGGTGA
AGGGCTACCT
CGCATCTGCC
TACCCAAGCA
AATACAGCGA
GATGTTCCCG
CAAATCAAAA
ACTGCAGCTT
GGAATCGGAG
CTAGACACGG
CCGTCCAGGG
CACTGGCCTG
GCATTCATCG
TCTATACAGA
GGCCATTAAA
AACATGGAGG
TGTCCCAGCT
GTGGTCGGTG
CTCTACTTCT
TCATGCTGCT
GATGCTGGGC
ATTGGGAGCA
TGCTGGGGAA
CACAGCGGCC
ATCCTCACCC
CTCTGACAGA
CAGCAAGATC
ATCTCCAGCC
ACCTGCCCAA
GGAGGCCATC
TCAGGTCTGG
TGTGCCTTGT
CAACTGTGCC
ATTGGCATGG
TGTTCACGAT
GGAGGCTGGG
AACTACTGGT
TTGACATATT
CAACGACTAC
GCGGCCACAC
TGTCCCTGCT
GCTCATCGTG
CTGGTGGAGA
CGATTGCCGT
GTGCTACGTG
TACGGGCTGA
GGAGATTTGA
AAGTGACCTT
AAGGCCATGA
CCGGCCGAGC
TGTGAGCTGG
TACTGGAAGG
TGATGTGGGC
TGGCGTAAGC
CCACTGCTGA
TTGTCAGCCT
CTTTGTCTTC
TACCTGAGCG
ACTACATCCT
CACGGGGACC
CTGAAGTATC
AAGCCTGGGA
CGCCTCCCAG
GGCCAGCTCG
TGACCAAAGA
TTACCCGGCC
TATGCACTGG
CTGTCATCGG
GCTGCTTGTG
GCCTCCTCCA
CCATGTGCAT
CCCCCTGGCG
GCCCTGGGGA
CTTTTGTTCA
GCGTCGCCTC
AAGAGGGGAG
ACGCAGACCC
CGTGGCCTGA
GATGTGGGCT
TCCCAGCCGC
TCACGGTTTT
ACAGATACTA
TTTACAGGCG
GAAACTCCTC
GGCTGCTTTT
TCAAATGCTT
AAGCCAGGAG
TGCTCAGCCC
ATCAACTTCC
TGAGTGTCTA
AAGAAGATGA
GGAAGGTGTG
CAGGAAGAAA
ACTCCCTTGG
GAGAACGCAC
ACCCTCCCGT
GGTGGCTGTT
CCTCCCTGTC
ACCTGCCTCC
TCATCATGGA
AGGGGGTGGG
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CGGTCTCAAA
GATAACTGCA
TCCTTCATTC
CAGGAAAGCC
CTAGAATTAG
GGCACATTGC
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TTCTTATGGG
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