名称: | pExpress-1-Acot8(rat) |
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别称: | NM_130756.3;Pte1 |
基因长: | 1125bp |
质粒宿主: | 大肠杆菌 |
质粒用途: | 基因模板 |
片段类型: | cDNA |
片段物种: | 大鼠 |
原核抗性: | Amp |
筛选标记: | |
荧光标记: | |
启动子: | |
复制子: | pUC |
拷贝数: | |
感受态: | DH5a |
温度: | 37度 |
背景载体: | pExpress-1 |
正向引物: | M13R:CAGGAAACAGCTATGACC |
反向引物: | M13F:TGTAAAACGACGGCCAGT |
诱导方式: |
1、本平台所有产品仅供科研使用,不能用于临床试验,包括人体口服、注射或者体外用药;
2、小包装质粒以模板价格出售,只保证基因部分测序正确,不保证质粒的表达等实验效果;
3、某些质粒即使是出品公司亦没有完整测过序,如关键部位的序列测序正确,亦认为是正确质粒;
4、小包装质粒产品的售后期为您收到产品之日起3个月,收到质粒后请及时转化操作,过期需重新购买;
5、质粒构建皆收取的是成本费用,所有质粒会分享给其他实验者,保密性质粒请提前告知并缴纳保密费用;
6、因科学研究为探索未知的活动,存在较大不确定性,故在任何情况下淼灵都不承担额外的连带责任;
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操作说明
一、质粒干粉(负20度保存,保质期90天,常温运输)
1、收到干粉质粒后请先5000rpm离心1min,再加入20μl无菌水溶解质粒;
2、将相应的感受态于冰盒上解冻,取2μl质粒加至100μl感受态中,冰浴 30min;
3、42度热激60s,冰浴2min,加入900μl无抗LB培养基,180rpm震荡培养45min;
4、6000rpm离心3min,留100μl上清重悬,再涂至对应抗性的LB平板上;
5、倒置培养过夜后,如菌落过多则稀释质粒转化,如没有菌落则取10ul质粒转化;
6、挑单菌落至对应抗性的LB液体培养基中过夜震荡培养,根据需要提取质粒。
二、液体质粒(负20度保存,保质期90天,冰袋运输)
1、收到液体质粒后请甩动保存管,让液体质粒不要吸附在管壁上;
2、根据实验需求取适量质粒,其余保存于负20度冰箱。
三、甘油菌种(负80度保存,保质期90天,冰袋运输)
1、收到甘油菌种后请甩动保存管,让菌液不要吸附在管壁上;
2、用接种环在固体平板上四区划线,如有抗性就加对应抗性;
3、恒温培养箱倒置培养12~16h;
4、务必挑取单菌落接种于液体培养基中,如有抗性就加对应抗性;
5、摇床震荡培养过夜,根据实验需要培养菌种。
TTCGGTCCGG
AATTCCCGGG
ATCAAGGGCC
CAGGTGTGGC
CCGGACTGAG
TGGCTTATTG
GGAGCTTGGG
AGGAGCCGGA
GAAGAGACCG
GTAACAGCAA
CCTGGGGGCG
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GTGACAGAAG
GGAAATGACA
CTCATCCCTT
ATTATTCATC
TCCAATGCTC
CGCCCCTTCG
CTGATTCACC
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CGGATCTCCT
AAACTGGCAC
AAATAGTCTC
CAATCTTAAA
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CCACACCCAC
TCAGAAATTG
ACAAGCACAA
CGACCAATCA
GAATCTGCGT
CTCGCACACG
GAAACCCTAG
GGATTTCCGG
CCCCTGGAGC
GACCTGCCGG
AAGCGCTGGG
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AGTTTCCGCG
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CTGCAGCAAG
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GAGGACCTAG
GAGATGCTAA
TGGCGACGCC
GACCGCGGCG
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GGACCTGCGT
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GCTCAACCTC
GAGCCTCTAG
ATGAAGATCT
CTACAGAGGA
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GGGTACCTAC
CTCCCAGCGG
CTCTTTGGGG
GTCAGATTGT
GGGCCAGGCT
CTGGTGGCTG
CAGCCAAGTC
CGTGAGTGAA
GACGTCCACG
TGCACTCCCT
GCACTGCTAC
TTTGTCCGGG
CAGGGGACCC
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GTGCTGTACC
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GACACGAACA
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GCTGTGCAGC
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CTCCATGCCC
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CCCCAGAGGA
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CCTATTGAGA
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GAACCCACCC
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TCTGGGTGCG
AGCCCGGGGC
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TGCTGTGTGG
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CTCTGACTAC
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ATAAAGTGAA
CTTCATGGTC
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GTTCCACGCC
CCATTCCGTG
CTGACCACTG
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GAGTGTGAGA
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CGAGGGCTGG
TACATGGGCG
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