名称: | pExpress-1-RGD1308031(rat) |
---|---|
别称: | BC088314.1 |
基因长: | 855bp |
质粒宿主: | 大肠杆菌 |
质粒用途: | 基因模板 |
片段类型: | cDNA |
片段物种: | 大鼠 |
原核抗性: | Amp |
筛选标记: | |
荧光标记: | |
启动子: | |
复制子: | pUC |
拷贝数: | |
感受态: | DH5a |
温度: | 37度 |
背景载体: | pExpress-1 |
正向引物: | M13R:CAGGAAACAGCTATGACC |
反向引物: | M13F:TGTAAAACGACGGCCAGT |
诱导方式: |
1、本平台所有产品仅供科研使用,不能用于临床试验,包括人体口服、注射或者体外用药;
2、小包装质粒以模板价格出售,只保证基因部分测序正确,不保证质粒的表达等实验效果;
3、某些质粒即使是出品公司亦没有完整测过序,如关键部位的序列测序正确,亦认为是正确质粒;
4、小包装质粒产品的售后期为您收到产品之日起3个月,收到质粒后请及时转化操作,过期需重新购买;
5、质粒构建皆收取的是成本费用,所有质粒会分享给其他实验者,保密性质粒请提前告知并缴纳保密费用;
6、因科学研究为探索未知的活动,存在较大不确定性,故在任何情况下淼灵都不承担额外的连带责任;
7、发表[中文论文]请标注:产品名称(产品货号) 由武汉淼灵生物科技有限公司提供;
8、发表[英文论文]请标注:Product Name (Product Item Number) was obtained from MiaoLingBio,China.
操作说明
一、质粒干粉(负20度保存,保质期90天,常温运输)
1、收到干粉质粒后请先5000rpm离心1min,再加入20μl无菌水溶解质粒;
2、将相应的感受态于冰盒上解冻,取2μl质粒加至100μl感受态中,冰浴 30min;
3、42度热激60s,冰浴2min,加入900μl无抗LB培养基,180rpm震荡培养45min;
4、6000rpm离心3min,留100μl上清重悬,再涂至对应抗性的LB平板上;
5、倒置培养过夜后,如菌落过多则稀释质粒转化,如没有菌落则取10ul质粒转化;
6、挑单菌落至对应抗性的LB液体培养基中过夜震荡培养,根据需要提取质粒。
二、液体质粒(负20度保存,保质期90天,冰袋运输)
1、收到液体质粒后请甩动保存管,让液体质粒不要吸附在管壁上;
2、根据实验需求取适量质粒,其余保存于负20度冰箱。
三、甘油菌种(负80度保存,保质期90天,冰袋运输)
1、收到甘油菌种后请甩动保存管,让菌液不要吸附在管壁上;
2、用接种环在固体平板上四区划线,如有抗性就加对应抗性;
3、恒温培养箱倒置培养12~16h;
4、务必挑取单菌落接种于液体培养基中,如有抗性就加对应抗性;
5、摇床震荡培养过夜,根据实验需要培养菌种。
GCAAAAGTGA
CTATAGACAG
TTTCGGTCCG
GAATTCCCGG
GATCGCGTTT
TCCAACGATG
GTGTCCTCGG
GGGATCAAAA
CTTCAGCGTC
ACAGCTGGGG
ACTGGCTTCG
TGGTCCCTGA
TGGGAGAGCA
TGAACAGTTA
AGAACACCAT
GCTGATTCCT
GACTCTCAGA
AGCTCTTGCG
ATGTGAACTG
GAGTCCCTCA
GGACCCAGCT
GCAGGCTCAG
AGCAAGGCTT
TCGAGTTCCT
GAACCACTCC
GTAACCATGC
TGGAGAAGGA
GAGCTGTCTG
CAACAGATCA
AGATCCAGCA
GCTCGAAGAA
GTGCTGAACC
CCACGAGTCG
CCAAGGAGAG
GATGGCCGTA
AGTGGAGCAA
AGAGCAGACC
CAACACGAGC
TGTATGGGGC
CCTGGCTCAA
GGCCTGCAGG
GGTTGCAGAA
GACACTGAAG
GAAGGTGAGG
AATTGCAACG
GTCCCGTACC
ACTCGCTGCC
TGCAGCTGTT
GGCCCAGGAG
ATCCGGGACA
GCAAGAAGTT
CCTGTGGGAG
GAACTGGAGC
TGGTGCGGGA
AGAGGTGACT
TTCATCTATC
AGAAGCTCCA
GAACCAGGAG
GACGAGATCT
CAGAGAATCT
CCTGAATATC
CAGAAGATGC
AGAAAACACA
GGTGAAGTGC
CGCAAGGTTC
TTACCAAGAT
GAAGCAGCAG
GCATGTGACT
CATCTTCATG
GCCAGAGGCT
GAGGGGGTGC
CCGCAGACAG
CGGTGGTTGC
TGGAAGGATG
ACCTCCAGAA
GGAGCTGAGT
GACATATGGT
CTGCTGTTCA
CAGTCTGCAG
AGCTCCATCG
ACTGTCTTGC
TTTGTCCATG
GGCACCAGAC
CAAAGGCTTC
CAGTCTCAGG
GGCCAGAAAG
GACACCAGTG
CCAGAGTTCT
CAGTGCCCCT
CCTGGGACTC
CGATTCTGAC
TGGGAGAGAC
CTTTCAGCAA
GAGCGGATCC
TACCCTCCCG
GTACAGACCC
TACTCAACCC
CTCTCCATCC
CTTACCATCT
GGCCCACTTG
TGATTCCCAC
AGTGTAGGCC
TTGAGGCTAG
CACTGTACCT
GGGCATTTGG
TCCCTGGCTG
GCAACCCTGA
GTTCTCCTGG
TTCAAACCAG
ACCACGACCT
ACCTTCTCTC
CCCATAGCTT
GAGCAGCTGG
GACTGCTTGC
CCTGAAGACC
CCTCCAGAGA
GAAAATAAAC
TAGCTGAGAC
CTTAAAAAAA
AAAAAAAAAA
AAAAAAAAAG
GGCGGCCGCT
TAATTAACCT
CGAGGAGTGG
TCCCTATAGT
GAGTCGTATT
ATAAGCTAGG
CACTGGCCGT
CGTTTTACAA
CGTCGTGACT
GGGAAAACTG
CTAGCTTGGG
ATCTTTGTGA
AGGAACCTTA
CTTCTGTGGT
GTGACATAAT
TGGACAAACT
ACCTACAGAG
ATTTAAAGCT
CTAAGGTAAA
TATAAAATTT
TTAAGTGTAT
AATGTGTTAA
ACTAGCTGCA
TATGCTTGCT
GCTTGAGAGT
TTTGCTTACT
GAGTATGATT
TATGAAAATA
TTATACACAG
GAGCTAGTGA
TTCTAATTGT
TTGTGTATTT
TAGATTCACA
GTCCCAAGGC
TCATTTCAGG
CCCCTCAGTC
CTCACAGTCT
GTTCATGATC
ATAATCAGCC
ATACCACATT
TGTAGAGGTT
TTACTTGCTT
TAAAAAACCT
CCCACACCTC
CCCCTGAACC
TGAAACATAA
AATGAATGCA
ATTGTTGTTG
TTAACTTGTT
TATTGCAGCT
TATAATGGTT
ACAAATAAAG
CAATAGCATC
ACAAATTTCC
CAAATAAAGC
ATTTTTTTCA
CGGCATTCTA
AGTGGG