名称: | pExpress-1-Cyp2a2(rat) |
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别称: | NM_012693.1;CYP2A21; RATCYP2A21 |
基因长: | 1479bp |
质粒宿主: | 大肠杆菌 |
质粒用途: | 基因模板 |
片段类型: | cDNA |
片段物种: | 大鼠 |
原核抗性: | Amp |
筛选标记: | |
荧光标记: | |
启动子: | |
复制子: | pUC |
拷贝数: | |
感受态: | DH5a |
温度: | 37度 |
背景载体: | pExpress-1 |
正向引物: | M13R:CAGGAAACAGCTATGACC |
反向引物: | M13F:TGTAAAACGACGGCCAGT |
诱导方式: |
1、本平台所有产品仅供科研使用,不能用于临床试验,包括人体口服、注射或者体外用药;
2、小包装质粒以模板价格出售,只保证基因部分测序正确,不保证质粒的表达等实验效果;
3、某些质粒即使是出品公司亦没有完整测过序,如关键部位的序列测序正确,亦认为是正确质粒;
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操作说明
一、质粒干粉(负20度保存,保质期90天,常温运输)
1、收到干粉质粒后请先5000rpm离心1min,再加入20μl无菌水溶解质粒;
2、将相应的感受态于冰盒上解冻,取2μl质粒加至100μl感受态中,冰浴 30min;
3、42度热激60s,冰浴2min,加入900μl无抗LB培养基,180rpm震荡培养45min;
4、6000rpm离心3min,留100μl上清重悬,再涂至对应抗性的LB平板上;
5、倒置培养过夜后,如菌落过多则稀释质粒转化,如没有菌落则取10ul质粒转化;
6、挑单菌落至对应抗性的LB液体培养基中过夜震荡培养,根据需要提取质粒。
二、液体质粒(负20度保存,保质期90天,冰袋运输)
1、收到液体质粒后请甩动保存管,让液体质粒不要吸附在管壁上;
2、根据实验需求取适量质粒,其余保存于负20度冰箱。
三、甘油菌种(负80度保存,保质期90天,冰袋运输)
1、收到甘油菌种后请甩动保存管,让菌液不要吸附在管壁上;
2、用接种环在固体平板上四区划线,如有抗性就加对应抗性;
3、恒温培养箱倒置培养12~16h;
4、务必挑取单菌落接种于液体培养基中,如有抗性就加对应抗性;
5、摇床震荡培养过夜,根据实验需要培养菌种。
GCTATGGTGA
CTATAGACAG
TTTCGGTCCG
GAATTCCCGG
GATCTCACTG
GCTACTATGC
TGGACACAGG
ACTGCTCCTG
GTGGTCATAC
TGGCCTCCCT
AAGTGTCATG
TTCTTGGTGT
CCCTCTGGCA
GCAGAAAATC
AGGGAGAGAT
TGCCTCCAGG
ACCCACTCCT
TTGCCTTTCA
TTGGAAATTA
TCTGCAGCTG
AATATGAAAG
ACGTATACAG
TTCCATCACA
CAGCTCAGTG
AGCGCTATGG
TCCTGTGTTC
ACCATTCACC
TTGGGCCTCG
ACGGATTGTT
GTGCTTTATG
GATACGATGC
AGTCAAAGAG
GCTTTGGTGG
ACCAAGCTGA
GGAGTTCAGT
GGACGTGGCG
AACTGCCTAC
CTTTAATATA
CTCTTCAAAG
GCTATGGTTT
TTCATTGAGC
AATGTGGAAC
AGGCCAAGCG
TATCAGGCGC
TTCACCATAG
CCACATTGAG
AGATTTTGGT
GTGGGCAAGC
GTGATGTACA
GGAGTGTATC
CTGGAGGAGG
CAGGCTATTT
GATCAAGACG
TTGCAGGGCA
CTTGTGGAGC
CCCCATTGAC
CCTTCCATCT
ACCTGAGCAA
AACAGTCTCC
AATGTCATTA
ACTCCATTGT
CTTCGGGAAC
CGCTTCGACT
ATGAGGACAA
AGAGTTCTTG
TCACTGTTGG
AGATGATCGA
TGAAATGAAT
ATATTTGCAG
CCTCAGCCAC
AGGGCAGCTC
TATGACATGT
TCCATTCAGT
GATGAAGTAC
CTGCCTGGAC
CACAGCAACA
GATCATCAAG
GTTACTCAGA
AACTGGAAGA
CTTCATGATA
GAGAAAGTGA
GGCAGAACCA
TAGTACCCTG
GACCCCAATT
CCCCAAGGAA
CTTCATTGAC
TCCTTTCTCA
TCCGCATGCA
AGAGGAGAAA
TATGTTAATT
CAGAATTCCA
CATGAACAAC
CTAGTGATGT
CATCATTAGG
CCTCCTCTTT
GCTGGGACTG
GGTCAGTCAG
CTCCACGCTA
TACCATGGTT
TCCTGCTACT
CATGAAGCAT
CCAGATGTGG
AAGCCAAGGT
CCATGAGGAA
ATTGAGCGAG
TGATCGGCAG
GAACCGACAG
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AGGACCACAT
GAAGATGCCC
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CTGTGATCAA
TGAGATCCAA
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ACTTGGCTCC
CTTGGGCATT
CCTCGAAGGA
TTATCAAGAA
CACAACCTTC
CGTGGCTTCT
TCCTCCCCAA
GGGCACCGAT
GTATTCCCTA
TAATAGGTTC
TCTGATGACA
GAACCAAAGT
TCTTCCCTAA
CCACAAAGAC
TTCAACCCCC
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GGATGACAAG
GGACAGTTGA
AGAAGAATGC
TGCATTTCTC
CCTTTTTCCA
TTGGAAAGCG
ATTCTGCTTG
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TGGCTAAAAT
GGAGCTCTTC
CTGCTGCTCA
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GCAGAACTTC
CGTTTTAAGT
TCCCAATGAA
TCTAGAAGAC
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TCTGATTCTG
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