名称: | pCR4-TOPO-SMIM5(human) |
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别称: | NM_001162995.3;"C17orf109; PP12104" |
基因长: | 234bp |
质粒宿主: | 大肠杆菌 |
质粒用途: | 基因模板 |
片段类型: | ncRNA |
片段物种: | 人 |
原核抗性: | Amp |
筛选标记: | |
荧光标记: | |
启动子: | |
复制子: | pUC |
拷贝数: | |
感受态: | DH5a |
温度: | 37度 |
背景载体: | |
正向引物: | M13F:TGTAAAACGACGGCCAGT |
反向引物: | M13R:CAGGAAACAGCTATGACC |
诱导方式: |
1、本平台所有产品仅供科研使用,不能用于临床试验,包括人体口服、注射或者体外用药;
2、小包装质粒以模板价格出售,只保证基因部分测序正确,不保证质粒的表达等实验效果;
3、某些质粒即使是出品公司亦没有完整测过序,如关键部位的序列测序正确,亦认为是正确质粒;
4、小包装质粒产品的售后期为您收到产品之日起3个月,收到质粒后请及时转化操作,过期需重新购买;
5、质粒构建皆收取的是成本费用,所有质粒会分享给其他实验者,保密性质粒请提前告知并缴纳保密费用;
6、因科学研究为探索未知的活动,存在较大不确定性,故在任何情况下淼灵都不承担额外的连带责任;
7、发表[中文论文]请标注:产品名称(产品货号) 由武汉淼灵生物科技有限公司提供;
8、发表[英文论文]请标注:Product Name (Product Item Number) was obtained from MiaoLingBio,China.
操作说明
一、质粒干粉(负20度保存,保质期90天,常温运输)
1、收到干粉质粒后请先5000rpm离心1min,再加入20μl无菌水溶解质粒;
2、将相应的感受态于冰盒上解冻,取2μl质粒加至100μl感受态中,冰浴 30min;
3、42度热激60s,冰浴2min,加入900μl无抗LB培养基,180rpm震荡培养45min;
4、6000rpm离心3min,留100μl上清重悬,再涂至对应抗性的LB平板上;
5、倒置培养过夜后,如菌落过多则稀释质粒转化,如没有菌落则取10ul质粒转化;
6、挑单菌落至对应抗性的LB液体培养基中过夜震荡培养,根据需要提取质粒。
二、液体质粒(负20度保存,保质期90天,冰袋运输)
1、收到液体质粒后请甩动保存管,让液体质粒不要吸附在管壁上;
2、根据实验需求取适量质粒,其余保存于负20度冰箱。
三、甘油菌种(负80度保存,保质期90天,冰袋运输)
1、收到甘油菌种后请甩动保存管,让菌液不要吸附在管壁上;
2、用接种环在固体平板上四区划线,如有抗性就加对应抗性;
3、恒温培养箱倒置培养12~16h;
4、务必挑取单菌落接种于液体培养基中,如有抗性就加对应抗性;
5、摇床震荡培养过夜,根据实验需要培养菌种。
GGGACTAGTC
CTTGCAGGTT
TAAACGAATT
CGCCCTTAAC
AGAACAGAAG
CCCAGGCAGT
TGACCCAGTC
TTTGAAACAG
CTGACTCCCC
AGCACCCAGT
GTCCACTGGC
AGATGAGAGG
TTTGCACCTA
TACCAGCCCT
TGTTTCCTTG
GTAGGGCTCA
AGTTGTCAGT
GTCCAGGTAC
CTGGGCTGGG
CCAGAGCTGG
GGCCAGGGGA
GCCTGGTCTT
GAGGGGTAAG
GGCTGCAGGG
CCAGGCTGAT
GGCCTGTGTC
ATGGCATTGG
CCATCTCCTC
TCCAGCTTCT
CCTCAGCCAT
CGCCCGTCCG
TCATGGTGGT
GTCGGCTGCA
CCTGGACCTT
CCTGCCTCTC
CGCTCAGGGC
AGCAGCAGTG
AGTGCAGCAG
CAGCTGCAGG
CTATCAGCAG
CAACAGCAGA
ACAGTAGCTG
TGAAAAGGAT
GATGACTGAG
AAGGCCACGA
TCTCCACGGG
CTCAGCCTGG
GGCAGTCTCT
GCAGCTTGAG
CAGCAGCCTC
TCGCCCACGG
CGCGCATCTC
CTGCACGAAG
TCGGTGGCAG
CCATGCCGCG
CTGGCTTCCT
GTTGGGGCTC
CTGCCGGGCT
CTGCTGGGGC
AGAGAGAACA
CCTGGAGCCT
CCACGGCTGG
CCCCACACTC
GTCGCAGCAC
CGAGATTCCA
CCCTCGCACC
CATCCGCAGC
CCGCAGAACA
AGTTTGTCAG
GTCTCACACA
TTGCACCCCT
GGTGACTTCC
ACCTAGTGGT
GGCCCTCAGT
CCCCACCCAG
CTGACACAGC
TCAGGGTGGA
GGAAGCCGGT
GAGGACAGTG
AGACCAAGGG
CTTGCTTCGG
GGGCTGCCGG
CCAAGGCGGC
GGCTGGTGGT
GGTTTCTGGC
TTCGCTGTTC
CATTCCCTTG
TCTTGAGGTA
CCACTACTGG
GTTTTGCCTG
GGTGCTTGGG
ACTGGCACAG
CTCCCTCGGG
GTGGGGAGAC
TGGGATAGGA
TGCCAAGCTG
GTACTCTTGC
CTTCCATCAA
TGTGGGGACA
GAAGGAGCAG
GTTCTCCCGA
GAGCAGGTTC
ATGGGGCTTC
TGGCCAGGGT
CAGTCAGAGG
TGAAAACTGC
CCCCCTGTCC
CCCAGGCCCC
CCAACCTCTC
CCACCAGCCC
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CTCATGCCTG
TTCTGCCAGA
GGGGGAGGCC
GCACCGTGTC
CCTCCAGGTT
TTGCCAGGGT
TTCTGTCCTG
TCTGTTGGGA
GGGGGTCAGG
AGGCCCAGGT
TGCTCAAGCC
AGCCCCTCCC
CTGCTGGCGT
CATCTGTTTC
TCTAGCCTGA
CCAGGAAAGT
CCTCTCCACT
CCCACCCCTG
CCCCAGGAGA
GCCTCTTCCT
GTCTCAGGGT
GCCCAAGAGG
CCCAAGGTGC
CACTCCAGAA
GGCTTTCCCC
TTCTGCCTCT
CCTGAAGGGC
GAATTCGCGG
CCGCTAAATT
CAATTCGCCC
TATAGTGAGT
CGTATTACAA
TTCACTGGCC
GTCGTTTTAC
AACGTCGTGA
CTGGGAAAAC
CCTGGCGTTA
CCCAACTTAA
TCGCCTTGCA
GCACATCCCC
CTTTCGCCAG
CTGGCGTAAT
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CCCGCACCGA
TCGCCCTTCC
CAACAGTTGC
GCAGCCTATA
CGTACGGCAG
TTTAAGGTTT
ACACCTATAA
AAGAGAGAGC
CGTTATCGTC
TGTTTGTGGA
TGTACAGAGT
GATATTATTG
ACACGCCGGG
GCGACGGATG
GTGATCCCCC
TGGCCAGTGC
ACGTCTGCTG
TCAGATAAAG
TCTCCCGTGA
ACTTTACCCG
GTGGTGCATA
TCGGGGATGA
AAGCTGGCGC
ATGATGACCA
CCGATATGGC
CAGTGTGCCG
GTCTCCGTTA
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TGATGTTCTG
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AAAAAGGATC
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AACGGTGCTG
ACC