名称: | pDNR-LIB-PYHIN1(human) |
---|---|
别称: | BC020822.1;IFIX;MGC23885 |
基因长: | 738bp |
质粒宿主: | 大肠杆菌 |
质粒用途: | 基因模板 |
片段类型: | cDNA |
片段物种: | 人 |
原核抗性: | Chl |
筛选标记: | |
荧光标记: | |
启动子: | |
复制子: | pUC |
拷贝数: | |
感受态: | DH5a |
温度: | 37度 |
背景载体: | |
正向引物: | M13F:TGTAAAACGACGGCCAGT |
反向引物: | M13R:CAGGAAACAGCTATGACC |
诱导方式: |
1、本平台所有产品仅供科研使用,不能用于临床试验,包括人体口服、注射或者体外用药;
2、小包装质粒以模板价格出售,只保证基因部分测序正确,不保证质粒的表达等实验效果;
3、某些质粒即使是出品公司亦没有完整测过序,如关键部位的序列测序正确,亦认为是正确质粒;
4、小包装质粒产品的售后期为您收到产品之日起3个月,收到质粒后请及时转化操作,过期需重新购买;
5、质粒构建皆收取的是成本费用,所有质粒会分享给其他实验者,保密性质粒请提前告知并缴纳保密费用;
6、因科学研究为探索未知的活动,存在较大不确定性,故在任何情况下淼灵都不承担额外的连带责任;
7、发表[中文论文]请标注:产品名称(产品货号) 由武汉淼灵生物科技有限公司提供;
8、发表[英文论文]请标注:Product Name (Product Item Number) was obtained from MiaoLingBio,China.
操作说明
一、质粒干粉(负20度保存,保质期90天,常温运输)
1、收到干粉质粒后请先5000rpm离心1min,再加入20μl无菌水溶解质粒;
2、将相应的感受态于冰盒上解冻,取2μl质粒加至100μl感受态中,冰浴 30min;
3、42度热激60s,冰浴2min,加入900μl无抗LB培养基,180rpm震荡培养45min;
4、6000rpm离心3min,留100μl上清重悬,再涂至对应抗性的LB平板上;
5、倒置培养过夜后,如菌落过多则稀释质粒转化,如没有菌落则取10ul质粒转化;
6、挑单菌落至对应抗性的LB液体培养基中过夜震荡培养,根据需要提取质粒。
二、液体质粒(负20度保存,保质期90天,冰袋运输)
1、收到液体质粒后请甩动保存管,让液体质粒不要吸附在管壁上;
2、根据实验需求取适量质粒,其余保存于负20度冰箱。
三、甘油菌种(负80度保存,保质期90天,冰袋运输)
1、收到甘油菌种后请甩动保存管,让菌液不要吸附在管壁上;
2、用接种环在固体平板上四区划线,如有抗性就加对应抗性;
3、恒温培养箱倒置培养12~16h;
4、务必挑取单菌落接种于液体培养基中,如有抗性就加对应抗性;
5、摇床震荡培养过夜,根据实验需要培养菌种。
TCAACTTGGG
CGCGCGCCAA
CGAATGGTCT
AGAAAGCTTC
TCGAGGGCCG
AGGTGGCCGA
CATGTTTTTT
TTTTTTTTTT
TTTTTTTTTT
TTTTTTGTTT
TGAGATGGAG
TCTCGCTCTG
TCACCCAGGC
TGGAGTGCAG
TGGTGCGATC
TCAGCTCACT
GCAACCTCCA
CCTCCCTGGT
TCAAGCAATT
CCCCTGCCTC
AGCCTCCTGA
GTAGCTGGGA
TTATAGGCGT
AAGCCACCAT
ACCCAGCTAA
TTTTTTTGTA
TTTTTAGTAG
AGATAGTGTT
TCACCATGTT
GGCCAGACTA
GTCTCAAACT
CCTGACCTCA
GGCAATCCAC
CTGCCTCGGC
CTCCCAAAGT
GCTGGGATTA
CAGGCGTGAG
CCACTGGGTT
TTCATTTTTT
CGTTGAGCAA
AGGTATTTAT
TGGAAGCTTC
CCATGAGGCA
GACACTGAAC
TAGGCCCTCG
TTTACAGTGG
TCCACAGAAT
TACAAACTAG
CCCTAATCTT
GGAACTACTT
TGAGTAGGTG
GGAAAGATAA
ACACTTATTA
ACTTCAGTTG
TCATAAACAG
TAGAAAAGAA
AGAAGTTCCT
AGGAAACAGA
ACACCATGAA
GATTTAACCT
GTTACAGGGG
TCTAAGTGAG
GATTCCCTGA
GGATAAGATC
TCAATATTGG
GATCCAGAGG
GTGGATAGGG
TTGGCCAGGT
AAGAGTTTAA
AGGTGAAAGA
AATATGGTGT
GTGAAAATCC
TAAAGGAAAA
AGGAGCATGG
TGTATGTCAG
AGAAACTTGA
ACAAATTAGT
GAGCAAAGGG
AATGGGTGTA
TAATAGATGG
GGGCAGTAGA
CAGTGAGTCT
GTTGCTGAAA
GTTCCAGATT
CCGCAGTTCT
CTGTCTCTTC
CCCAAACAGC
ACAGGACAGA
AAACTTCCTG
CAGTCAGAGA
TAATGTCAAG
TTCATCAAAT
ATGCCTCAGT
TGAGGAAGTG
TTGGGTGGAG
CTGATGATGA
GGTCTGGGGA
GGTGGGGAAC
GGCCCATGGC
TGTGGACGTG
CTGGCTCCTG
CAGAGCAGGA
AGGCCGAGTC
TGCTCTTTGG
ACATCTTACT
CCTTTTGGTT
CCAGTCTCTT
CTTCAGATGG
TTTTTTTCTT
TTCTGAGGTC
CAAGAGTCTC
CTCTGCTCCT
TTAGCTGTGA
GACGGTTGCT
TGGGGTGCAT
GCAGGTGTAG
CAGGATACAC
TTCTTTCTGT
TTCGTCTTTT
TAGATGGGAT
TATTCCTTTG
ACTGGAATGG
ATTCAATTTT
ATTTGCAACT
TTTAACTTTT
CTCTTTTAAG
AGTTTCAGCA
AGGTCTCCCA
GTGTTGGTAT
TTCTTTGAAG
AATTCTATTA
GTTTGCCCAA
ACCGGCATCA
CCTGGGAACT
TTTCCTCCAT
CAAGTCAGCA
ATCTGAATTT
TGTCATACTC
TTCTTTCATT
TTTGGATTAA
GTTTTAAATC
GTTACTCAGT
AAGGACTTAA
CAATTCTAAA
ATGATAATCA
TTGATGACCT
CTAATCCTTT
CAGTAGAACA
ATTTTCTTGT
AGTTATTTGC
CATCTCTAAA
GATATAAGTG
AGCCTTACTG
GGAATTTCTT
CAACAGTAGT
CCAGATCTTG
AGATCTTCAG
AAATGTAGGA
AATGAGGATT
GTTTTGAATA
GGGAAATCAG
TCAGTAAAGC
TCTCAGAAAC
TGAAATACAG
GATGTTATAA
TCTCCTGAAA
TGCTAAGAAA
ATGAAGTATT
TTCAAAGACA
ACAAGGGAAA
ATGGCCCTTC
TTAGAGTCAC
TTGACTAGTG
CTCCCCGGCC
GTAATGGCCG
AATTCCCGGG
CATATGTCCG
GTACCGTCGA
CTGATAACTT
CGTATAATGT
ATGCTATACG
AAGTTATGCG
GCCGCTTCCT
CGCTCACTGA
CTCGCTGCGC
TCGGTCGTTC
GGCTGCGGCG
AGCTAGCGCC
CTATGTAGTT
ACC