名称: | pCR-BluntII-TOPO-FLJ43826(human) |
---|---|
别称: | BC111725.1 |
基因长: | 777bp |
质粒宿主: | 大肠杆菌 |
质粒用途: | 基因模板 |
片段类型: | cDNA |
片段物种: | 人 |
原核抗性: | Kan |
筛选标记: | |
荧光标记: | |
启动子: | |
复制子: | pUC |
拷贝数: | |
感受态: | DH5a |
温度: | 37度 |
背景载体: | |
正向引物: | M13F:TGTAAAACGACGGCCAGT |
反向引物: | M13R:CAGGAAACAGCTATGACC |
诱导方式: |
1、本平台所有产品仅供科研使用,不能用于临床试验,包括人体口服、注射或者体外用药;
2、小包装质粒以模板价格出售,只保证基因部分测序正确,不保证质粒的表达等实验效果;
3、某些质粒即使是出品公司亦没有完整测过序,如关键部位的序列测序正确,亦认为是正确质粒;
4、小包装质粒产品的售后期为您收到产品之日起3个月,收到质粒后请及时转化操作,过期需重新购买;
5、质粒构建皆收取的是成本费用,所有质粒会分享给其他实验者,保密性质粒请提前告知并缴纳保密费用;
6、因科学研究为探索未知的活动,存在较大不确定性,故在任何情况下淼灵都不承担额外的连带责任;
7、发表[中文论文]请标注:产品名称(产品货号) 由武汉淼灵生物科技有限公司提供;
8、发表[英文论文]请标注:Product Name (Product Item Number) was obtained from MiaoLingBio,China.
操作说明
一、质粒干粉(负20度保存,保质期90天,常温运输)
1、收到干粉质粒后请先5000rpm离心1min,再加入20μl无菌水溶解质粒;
2、将相应的感受态于冰盒上解冻,取2μl质粒加至100μl感受态中,冰浴 30min;
3、42度热激60s,冰浴2min,加入900μl无抗LB培养基,180rpm震荡培养45min;
4、6000rpm离心3min,留100μl上清重悬,再涂至对应抗性的LB平板上;
5、倒置培养过夜后,如菌落过多则稀释质粒转化,如没有菌落则取10ul质粒转化;
6、挑单菌落至对应抗性的LB液体培养基中过夜震荡培养,根据需要提取质粒。
二、液体质粒(负20度保存,保质期90天,冰袋运输)
1、收到液体质粒后请甩动保存管,让液体质粒不要吸附在管壁上;
2、根据实验需求取适量质粒,其余保存于负20度冰箱。
三、甘油菌种(负80度保存,保质期90天,冰袋运输)
1、收到甘油菌种后请甩动保存管,让菌液不要吸附在管壁上;
2、用接种环在固体平板上四区划线,如有抗性就加对应抗性;
3、恒温培养箱倒置培养12~16h;
4、务必挑取单菌落接种于液体培养基中,如有抗性就加对应抗性;
5、摇床震荡培养过夜,根据实验需要培养菌种。
CCAAGCTATG
CATCAAGCTT
GGTACCGAGC
TCGGATCCAC
TAGTAACGGC
CGCCAGTGTG
CTGGAATTCG
CCCTTGGACA
CATGGGAGCA
AGGAGGAAGC
CAAGAAAACC
ATTTATTCCT
GGGGCTCTGG
TCAGTTTTAC
TTGTAAATGG
GAAGGGAAGA
AAATAACATG
AAGTGGAGGC
AATAGGAAGA
AGAAATGAAG
AATCCCTGAG
TGAGAACAGG
AGTCTTGGAC
TGACTCCGTG
GTGCACACAC
ACCCTGTTTC
ATCTCGGGCA
GCATCCTGTC
AGCCAGTAGG
AGAGTGGCCG
GCCCGAATAG
TGCAACCTCC
ATTCTACCCT
GGGGTCTTGA
AAATAATTCC
AAGCATGCGG
GACTTTCAGA
AGCTCTCCAT
GTCTGTCCAG
AAGGGCCCCA
CAATGTCTCG
GGGAGACTTT
GTATGTGGCT
CAGCATGGAG
CCTGAGCAGG
ATTTTCAGCC
CCACTCACCC
CCTTGGCCAA
GTGCTCTCGT
GCAGTGAACA
CCCATGCTGG
GCAGAAGCAT
TTTACATCAG
TCCTCTTCGG
AGTTAGTCTC
CTTGGCATCA
TTTGATGGGG
GGTGGGAAAT
GAAGTAGTTC
TTGGCTAACT
TCTTGGCCCC
TGCACCATGT
GAGGCTGTTC
CAGCTCCCTT
GGGGCTGGAC
TCCTGAGCCT
TTTTTTCTTT
GGCAGTGTTC
TCTACAAATG
CCCGGGCATC
CTGTGATCCG
CCCGCCTCGG
CCTCTCAAAG
TGCTGGGATT
ACAGGCGTGA
GCCACCGCGC
CGGGCCAAGG
TATAGCCTTT
CTACATTGCA
GAGTCATTCA
GTTTCCAAAA
TTATGGAGCT
TGTATTATTA
GAACCAATGA
AGTGAGTAAG
AAAATTTTTT
AAAATAAGCC
ATCAATCCGG
ACAACTTGTG
TAAAAACTGC
ATTCCGTGCC
AGGCCTGAAA
GGTTCCAAAG
CTCAGTTCTG
TCAGTAAATT
GCAACCAAGA
TTCAGTTTCT
CAGTCCAACT
GTATGCTTTC
CATACATCTT
CACCAATGTA
AGAAATATAG
TTTCCTTGGA
AATTTAAGAT
GGTGAAGGTG
CCATTGTAGG
TGTTGGGCTC
TGGCACAGGC
ACTCAGCGGA
GCCTCTGCTT
TGGGCTGAGA
TCAATACACG
ACAGCGTCTC
ATCTCCGCAG
GTACAGAGAT
CACATATGTT
GGTGCTTGTG
GAGGCCTTCT
GTTCCTCTGG
TGCAGTTAAA
GCCTTATTTT
GGGCGTAATT
TTCAGACTGC
ACCAGTGAAT
CCTGAGTAGG
TTCTAGTTCA
GTAGGTGGAC
CTGTGACTTG
TCAGGTTTCG
ATGCTGAGTC
TGAACCTGGT
CTGGACGTGG
AGCTATAGTC
TTCTCCAGGG
CTGTAGAATA
TCCAATCTCT
GTAGTGGGTT
CTGGAGTGAT
GGCAAGCCCC
AGGTCTGGAG
ACTGAGTTGA
GGTCTCCTCC
GTGGTTGGAG
ACGGTTTAAC
ATCTATAGTA
GGTTCTATAG
TTATGGTAAG
CTCCAGGTCC
AGAAGTTGAA
CTGTGACTTG
AGTCAGGTTT
GAATGCTGAG
CCTGACCCTT
GTCTGGCGGT
GGAAGTGTCA
CCTCAAGGTG
CTCTGGAGGA
GGAGCTGTAG
TCATCAGGGC
TGTAGACGGT
TCAACCTTTG
TAATGGATTC
TGGAGTGATG
GTAAGCCCCA
GATCCAAAGG
TTGAACTGTG
ACTCTGGGTG
ATGTTGGATG
CTGAGCCTGA
TCCTGGCCTC
GTGTTGGCAT
GGACGTCTCA
TAATACACAG
GAGGTTGAGC
TACAACCTCC
TTACGTAGCT
CTGGAGGCTG
AGTTGGGGTC
TTCTGCATGG
TTGGAAAAGG
TTCAACCTCC
ATAGTGGATT
CTGGAGTTAA
GGTAAGTTCC
AGATCCAAAG
GTTGAACTGT
GACTTGAGTC
AGGTTCGAAT
GGAGAGTCTG
AACCTGGTCT
GGATGTGGAA
GTGTCACTTT
AGGGTGCTTG
GGAGGAATCT
TCTTCAGGGG
TGTAGAATGT
TCAACCTCTG
TAGTGGGTTC
TGGAGTGATG
GTAAGTCCCA
GGTCCAAAGG
TTGAGCTGTA
ACGCTGGGTG
ACATTGGATG
CTGAGCTTGA
TCCTGACCTG
GTGTTGGAAC
TGTTACCCCT
TGATATGCTG
GAGGTTGGGG
TACAACTTCC
TTAGGAGGCT
AAGTTGGGGT
CTCCTGAATG
GTTGGAGAAA
GTTCAACCTC
TGTCATGGAT
TCTGGAGTGA
TGGTAAGCCC
CAGGCCCAAA
GGCTGAACTG
TGACACTGGA
CAGTGTTGAA
TGCTGAGCTT
GATCCTGACC
TGGTGTTGGA
ATTGTCACCT
CATAATGAGC
TGGAGGTTGA
GCTGCAACCT
CTGTAGGTGT
CTCTGGAAGC
TGAGTTGAGT
TCTTCGTGGT
TGGAGGAAAA
AAACATGGTT
GCGGAGTTGT
GGTAAGTTCC
AGGTGCAAAG
GTTGAACTAT
GACCTGTTAG
GTTTGTGTGC
TGAGCCTGAA
CCTGGTCAGG
AGGTGGAAGC
ATCACCTCAG
GGTGTTTTGG
AGGAGCTGTA
GTCTTCCTTG
GGGTTGTAGA
ATACTCAGCC
TCCATAGTGG
ATTTTGGAGT
GACGGTAAGT
CCCAGGTCTA
AAGGTTGAAA
TGTGACACTG
GGTGATACTG
GAATCTGGGC
TTGGTCCTGG
CCTGCTATTG
GAATTGTCAT
CTCATGCACT
GGAGGTTGAG
CTGCAACCTC
CTTAGGTGAC
TCTGGATGCT
GAGCTGGGAC
CAGCTGCTGG
CTTGAAGGTT
CTACCTCCAT
AGGGGGCTCT
GGAGTCTGAA
CTGTGGCCTC
CTGCTGGATT
GGAGAAGGTT
CTGCCTCCAT
AGGGGGCTCT
GGAGTCTGAG
CTGGAACCCC
CTGCTGAGTT
AAGAGATGGT
TCCACTTCCT
GAGGGAGCTC
TGGAGGTGAA
GATGGGGCCA
TCTGCTGGGT
CCGAGAGGGT
TCTATGACCA
CAGGGGCCTC
TGAGGACTGA
GCAGGGCCTG
CCTGCTGAAC
TGGAGAGGAT
TCTACCTCTT
TAGGTGGCTC
TAAAAGCTGA
GTTGGGGTCT
GCTGTAGGAC
TGGAGATGGT
TTGACCTTCT
CAGGTGGCTC
TGATGGCTGA
GCTGGTATCT
CCTGCTGTGG
TGGAGGACTG
ACCTCTTCAG
TGGACTTTGG
AGGCTGACCT
GAGGCTTGCT
GCTGGGTTGC
AGATGGTTCA
ACCTCCTTAG
GGGGCTCTGG
TGGCTCAGCT
GGGAACTCTT
GCTGGACTGG
AGAAGGTTCT
ACCTCCTTAG
GGGGATCTGG
AGTCTGAGGT
TGGGCCTCTT
GCTGGGCTGG
AGAAGACTCA
GCCTCCTCAG
GGGTCTGTGG
ATGCTCAGCT
GCAGCTTCCT
GCTGGGTTGG
AGAAAGGGCG
AATTCTGCAG
ATATCCATCA
CACTGGCGGC
CGCTCGAGCA
TGCATCTAGA
GGGCCCAATC
GCCC