名称: | pOTB7-DAG1(1同义突变) |
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别称: | NM_001177644.2(1同义突变);156DAG; A3a; AGRNR; DAG; LGMDR16; MDDGA9;MDDGC7; MDDGC9 |
基因长: | 2688bp |
质粒宿主: | 大肠杆菌 |
质粒用途: | 基因模板 |
片段类型: | cDNA |
片段物种: | 人 |
原核抗性: | Chl |
筛选标记: | |
荧光标记: | |
启动子: | |
复制子: | pUC |
拷贝数: | |
感受态: | DH5a |
温度: | 37度 |
背景载体: | |
正向引物: | M13F:TGTAAAACGACGGCCAGT |
反向引物: | M13R:CAGGAAACAGCTATGACC |
诱导方式: |
1、本平台所有产品仅供科研使用,不能用于临床试验,包括人体口服、注射或者体外用药;
2、小包装质粒以模板价格出售,只保证基因部分测序正确,不保证质粒的表达等实验效果;
3、某些质粒即使是出品公司亦没有完整测过序,如关键部位的序列测序正确,亦认为是正确质粒;
4、小包装质粒产品的售后期为您收到产品之日起3个月,收到质粒后请及时转化操作,过期需重新购买;
5、质粒构建皆收取的是成本费用,所有质粒会分享给其他实验者,保密性质粒请提前告知并缴纳保密费用;
6、因科学研究为探索未知的活动,存在较大不确定性,故在任何情况下淼灵都不承担额外的连带责任;
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操作说明
一、质粒干粉(负20度保存,保质期90天,常温运输)
1、收到干粉质粒后请先5000rpm离心1min,再加入20μl无菌水溶解质粒;
2、将相应的感受态于冰盒上解冻,取2μl质粒加至100μl感受态中,冰浴 30min;
3、42度热激60s,冰浴2min,加入900μl无抗LB培养基,180rpm震荡培养45min;
4、6000rpm离心3min,留100μl上清重悬,再涂至对应抗性的LB平板上;
5、倒置培养过夜后,如菌落过多则稀释质粒转化,如没有菌落则取10ul质粒转化;
6、挑单菌落至对应抗性的LB液体培养基中过夜震荡培养,根据需要提取质粒。
二、液体质粒(负20度保存,保质期90天,冰袋运输)
1、收到液体质粒后请甩动保存管,让液体质粒不要吸附在管壁上;
2、根据实验需求取适量质粒,其余保存于负20度冰箱。
三、甘油菌种(负80度保存,保质期90天,冰袋运输)
1、收到甘油菌种后请甩动保存管,让菌液不要吸附在管壁上;
2、用接种环在固体平板上四区划线,如有抗性就加对应抗性;
3、恒温培养箱倒置培养12~16h;
4、务必挑取单菌落接种于液体培养基中,如有抗性就加对应抗性;
5、摇床震荡培养过夜,根据实验需要培养菌种。
GCCTGGGTGG
CGAATTCGGC
ACGAGGGCAA
CACTCGCGTG
TCAGGCGGTT
GCTAGGCTCC
GGCCGCTCGC
CCCGCCCTTG
CGCTCAGCGC
CCTCTCACCG
CCCGGTACGT
GCTCGCGCGA
AGGCTGCGGA
GCGGCGCTCG
CGCCTCTTAG
GCTTGGCGGT
GGCGGCGGCG
GCAGCTTCGC
GCCGAATCCC
CGGGGAGCGG
CGGAGGCGGC
GTCCTGGGGC
CAGGAGGAGC
GAACACATGC
CGCGGTCCTC
CCGCCGGCGC
TGGGCTCTGT
GTGCTCCGGG
ATGGAGCAGG
TGTGCAGAGG
GTGAGAACCC
AGCTCTGGGA
CCAAGTCACT
TGCTTCCTTA
CTTAGCAAGA
CTATCGACTT
GAGCAAACTT
GGACCTGGGA
TGAGGATGTC
TGTGGGCCTC
TCGCTGCTGC
TGCCCCTCTG
GGGGAGGACC
TTTCTCCTCC
TGCTCTCTGT
GGTTATGGCT
CAGTCCCACT
GGCCCAGTGA
ACCCTCAGAG
GCTGTCAGGG
ACTGGGAAAA
CCAGCTTGAG
GCATCCATGC
ACTCAGTGCT
CTCAGACCTC
CACGAGGCTG
TTCCCACAGT
GGTTGGCATT
CCTGATGGCA
CGGCTGTCGT
CGGGCGCTCA
TTTCGAGTGA
CCATTCCAAC
AGATTTGATT
GCCTCCAGTG
GAGATATCAT
CAAGGTATCA
GCGGCAGGGA
AGGAGGCTTT
GCCATCTTGG
CTGCACTGGG
ACTCACAGAG
CCACACCCTG
GAGGGCCTCC
CCCTTGACAC
TGATAAGGGT
GTGCATTACA
TTTCAGTGAG
CGCTACACGG
CTGGGGGCCA
ACGGGAGCCA
CATCCCCCAG
ACCTCCAGTG
TGTTCTCCAT
CGAGGTCTAC
CCTGAAGACC
ACAGTGAGCT
GCAGTCGGTG
AGGACAGCCT
CCCCAGACCC
TGGTGAGGTG
GTATCATCTG
CCTGTGCTGC
GGATGAACCT
GTGACTGTTT
TGACGGTGAT
TTTGGATGCC
GACCTCACCA
AGATGACCCC
AAAGCAAAGG
ATTGACCTCC
TGCACAGGAT
GCGGAGCTTC
TCAGAAGTAG
AGCTTCACAA
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GTGCCGGTGG
TGAATAACAG
ACTATTTGAC
ATGTCGGCCT
TCATGGCTGG
CCCGGGAAAT
GCAAAAAAGG
TGGTGGAGAA
TGGGGCCCTT
CTCTCCTGGA
AGCTGGGCTG
CTCCCTGAAC
CAGAACAGTG
TGCCTGACAT
TCATGGTGTA
GAGGCCCCTG
CCAGGGAGGG
CGCAATGTCT
GCTCAGCTTG
GCTACCCTGT
GGTGGGTTGG
CACATCGCCA
ATAAGAAGCC
CCCTCTTCCC
AAACGCGTCC
GGAGGCAGAT
CCATGCTACA
CCCACACCTG
TCACTGCCAT
TGGGCCCCCA
ACCACGGCTA
TCCAGGAGCC
CCCATCCAGG
ATCGTGCCAA
CCCCCACATC
TCCAGCCATT
GCTCCTCCAA
CAGAGACCAT
GGCTCCTCCA
GTCAGGGATC
CTGTTCCTGG
GAAACCCACG
GTCACCATCC
GGACTCGAGG
CGCCATTATT
CAAACCCCAA
CCCTAGGCCC
CATCCAGCCT
ACTCGGGTGT
CAGAAGCTGG
CACCACAGTT
CCTGGCCAGA
TTCGCCCAAC
GATGACCATT
CCTGGCTATG
TGGAGCCTAC
TGCAGTTGCT
ACCCCTCCCA
CAACCACCAC
CAAGAAGCCA
CGAGTATCCA
CACCAAAACC
AGCAACGCCT
TCAACTGACT
CCACCACCAC
CACGACTCGC
AGGCCAACCA
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GACACCCCGG
CCAGTGCCCC
GGGTCACCAC
CAAAGTTTCC
ATCACCAGAT
TGGAAACTGC
CTCACCGCCT
ACTCGTATTC
GCACCACCAC
CAGTGGAGTG
CCCCGTGGCG
GAGAACCCAA
CCAGCGCCCA
GAGCTCAAGA
ACCATATTGA
CAGGGTAGAT
GCCTGGGTTG
GCACCTACTT
TGAGGTGAAG
ATCCCGTCAG
ACACTTTCTA
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GACACCACCA
CTGACAAGCT
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CTGAAACTGC
GGGAGCAGCA
GCTGGTGGGC
GAGAAGTCCT
GGGTACAGTT
CAACAGCAAC
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TCCCGACAGC
AGCCACGTGG
GCAAACACGA
GTATTTCATG
CATGCCACAG
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CCTGTCGGCT
GTGGATGCCT
TCGAGATCCA
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CGCCCCCAAG
GGGATAGGGC
TCCTGCAAGG
TTCAAGGCCA
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TGACCCGGCA
CTGGTGTTGA
ATGACATCCA
CAAGAAGATT
GCCTTGGTAA
AGAAACTGGC
CTTCGCCTTT
GGAGACCGAA
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CAGAATATCA
CCCGGGGCTC
CATCGTGGTG
GAATGGACCA
ACAACACACT
GCCCTTGGAG
CCCTGCCCCA
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CGCTGGGCTG
AGCCGCCGGA
TCGCTGAGGA
TGATGGAAAA
CCTCGGCCTG
CCTTCTCCAA
CGCCCTAGAG
CCTGACTTTA
AGGCCACAAG
CATCACTGTG
ACGGGCTCTG
GCAGTTGTCG
GCACCTACAG
TTTATCCCTG
TGGTACCACC
CAGGAGAGTG
CCCTCAGAGG
CGCCGCCCAC
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GACAGGGACC
CTGAGAAGAG
CAGTGAGGAT
GATGTCTACC
TGCATACAGT
CATTCCGGCC
GTGGTGGTCG
CAGCCATCCT
GCTCATTGCT
GGCATCATTG
CCATGATCTG
CTACCGCAAG
AAGCGGAAGG
GCAAGCTTAC
CCTTGAGGAC
CAGGCCACCT
TCATCAAGAA
GGGGGTGCCT
ATCATCTTTG
CAGACGAACT
GGACGACTCC
AAGCCCCCAC
CCTCCTCCAG
CATGCCACTC
ATTCTGCAGG
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TCCCCTACCC
CCTCCTGAGT
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GAGTGTGCCC
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GGACACCATG
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CGCCCCTGCG
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CCTATGTCCC
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TGGCCTGCAG
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GACACCTGAC
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CTGACACAGG
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CTCTGGTCCT
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TTATTTTTAT
TTTTTGCCTA
ACAGCTTTTG
GTTTGTTCAT
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TCGCTTCATT
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GAGTGGAGGT
GGAGGGAGCG
AGGAACCATG
AATGAACTCG
CAGGCAGTGC
CGGGCGGCCC
CCTGGCTCTC
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TGGCCCACGA
CCAAGGGGTC
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GCAGTGGTGG
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GCTCCAGGGT
GGGCCAGCTG
CTTGTGGGGG
CACCTGGGAG
GTCAAAGGTC
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CAACCTATTT
TGTTTTACCC
TTTTTCTGTG
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TTTTTTCCTC
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GACATTTTGG
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CACTTGACCT
TGGCCGCTTT
GTCCTAACAG
TCCACAGTCC
TGCCCCGACC
CACCCCATCC
CTTTTCTCTG
GCACTCCAGT
CCCAGGCCTT
GGGCCTGAAC
TACTGGAAAA
GGTCTGGCGG
CTGGGGAGGA
GTGCCAGCAA
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TAAAAATCTG
TTAGCTCTCA
AAGATAATTT
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GTTTTTATAC
AGCCTCAAAT
TGTTTTAAAA
AAAAAAAAAA
AAAAAAAAAA
AAACTCGAGG
CATCTATGTC
GGG