名称: | pOTB7-GGT1 |
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别称: | NM_001288833.2;CD224; D22S672; D22S732; GGT; GGT 1; GGTD;GTG |
基因长: | 1710bp |
质粒宿主: | 大肠杆菌 |
质粒用途: | 基因模板 |
片段类型: | cDNA |
片段物种: | 人 |
原核抗性: | Chl |
筛选标记: | |
荧光标记: | |
启动子: | |
复制子: | pUC |
拷贝数: | |
感受态: | DH5a |
温度: | 37度 |
背景载体: | |
正向引物: | M13F:TGTAAAACGACGGCCAGT |
反向引物: | M13R:CAGGAAACAGCTATGACC |
诱导方式: |
1、本平台所有产品仅供科研使用,不能用于临床试验,包括人体口服、注射或者体外用药;
2、小包装质粒以模板价格出售,只保证基因部分测序正确,不保证质粒的表达等实验效果;
3、某些质粒即使是出品公司亦没有完整测过序,如关键部位的序列测序正确,亦认为是正确质粒;
4、小包装质粒产品的售后期为您收到产品之日起3个月,收到质粒后请及时转化操作,过期需重新购买;
5、质粒构建皆收取的是成本费用,所有质粒会分享给其他实验者,保密性质粒请提前告知并缴纳保密费用;
6、因科学研究为探索未知的活动,存在较大不确定性,故在任何情况下淼灵都不承担额外的连带责任;
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操作说明
一、质粒干粉(负20度保存,保质期90天,常温运输)
1、收到干粉质粒后请先5000rpm离心1min,再加入20μl无菌水溶解质粒;
2、将相应的感受态于冰盒上解冻,取2μl质粒加至100μl感受态中,冰浴 30min;
3、42度热激60s,冰浴2min,加入900μl无抗LB培养基,180rpm震荡培养45min;
4、6000rpm离心3min,留100μl上清重悬,再涂至对应抗性的LB平板上;
5、倒置培养过夜后,如菌落过多则稀释质粒转化,如没有菌落则取10ul质粒转化;
6、挑单菌落至对应抗性的LB液体培养基中过夜震荡培养,根据需要提取质粒。
二、液体质粒(负20度保存,保质期90天,冰袋运输)
1、收到液体质粒后请甩动保存管,让液体质粒不要吸附在管壁上;
2、根据实验需求取适量质粒,其余保存于负20度冰箱。
三、甘油菌种(负80度保存,保质期90天,冰袋运输)
1、收到甘油菌种后请甩动保存管,让菌液不要吸附在管壁上;
2、用接种环在固体平板上四区划线,如有抗性就加对应抗性;
3、恒温培养箱倒置培养12~16h;
4、务必挑取单菌落接种于液体培养基中,如有抗性就加对应抗性;
5、摇床震荡培养过夜,根据实验需要培养菌种。
GGTTATAGGG
CGTCGCTCAC
TCTTCTCGCA
CCGACATAGA
TGCCTCGAGT
TTTTTTTTTT
TTTTTTTTTT
TTTTTTTTTT
TTTTTTTTTT
TTGTGGGGAG
ACAGGCCAGG
GAGGCCACCT
GGAGCCTGGC
ACAGTGGCCT
CATTTATTGT
GCTGCTCTGC
TGCTCACAGG
GGAAGCCGGT
CCCCCAGAGT
CCCCTTCCTG
GTCCTGGTGA
GTATCTTGTC
CCTGGATTGC
TTGTCAGCCT
TGTCCTCCTG
GAGCACTCAG
TAGCCGGCAG
GCTCCCCGCC
TTTCCTGGAG
TCCGAGGCAG
CTGCCCAGCC
ACCAGCCGTG
CGGACGATGG
CTTGCACCAC
AGCGATGAAG
GTGGACGCGA
TCTGGGTGTG
ATGGTGCCGG
GTCTCCAGGG
CTGCAGTCAC
TGCCTGGTCA
ATGTTTCTCT
CCACTGTCGT
GACGTTGGGC
AGAAGCTGGT
TGTGCAGCCG
GGGCTCCTCC
ACGGCCCGCT
TCACGTCATA
GCCGAACCAG
AGGTTGTAGA
TGATGGCCAG
TGCAGTGGCC
GTGGTGATCT
GTGTGCCCCC
AGCAGCTCCC
ACCACCATCC
GGACCTGGCC
GTCCTGGCCC
ACCATGATCG
TCGGGCACAT
GGACGAGAGC
GGCTGCTTCC
CTGGCTGGAT
GAAATTGGCA
GGTGAGGGGG
GTACCCCAAA
CTCGTTGGTG
ATGCTGGGAG
AGCTGAAGTC
GTCCATTTCA
TTATTGAACA
GGATCCCGCT
GACCGGGGAG
CGGACCTTGG
AGCCAAAGTA
GAGGTTGATG
GTGCTGGTGG
CGGACACAGC
ACTGCCGTCC
TCTGCGACGA
CAGACAGGTG
AGCAGTGCCC
CCGTCATCCG
GCGTGTAGAA
CTCGGGCTTG
TAGTAGGAGA
TCGGGTGAGT
GGTGTCGTCA
GAGATCTGGG
CCCGGAGCTG
GGCAGCGAAG
AACTCGGAGG
TCATGTTGCG
GACCACCTCA
GTCACATCCA
CAAACTTGGG
GTCCCCAAGC
AGGGTCCTCT
TGGCGTAGGC
AAACCGGAAA
GCCTCTACGA
TGCGGTGGTA
CGTCAGGCCC
TTCTGCTCGG
GGCTCTCCAC
GCTCTCCCGG
GAGAAGTTGT
ACCCTTTGAG
GATGTTGAGG
ATGAGGGCCA
GCACGGGCCC
GCTGAGCGGC
GCACTGGGCA
TGTACAGCAC
CACGTCTCCC
AGGCTGATGT
TCAGCGGGTG
CTCGATCAGC
TCAGCACGGT
AGTTGTTCAG
GTCCTCAGCT
GTCACAATGC
CCCCGGCCGC
CTGGATGTCC
TTCACAATCT
GGGCCGTGAG
GCTGCCGTTG
TAGAAGGCCT
GGGCACCCTC
GATGGCCAGC
GTCTCGTAGG
TGTCAGCCAG
CTGCGGCAGG
GTCAGTCTCT
CCCCCTCCCG
AAGCACCTTT
CTATCCCGGC
AGAACACCTC
ACACAAGACA
GGCTGCTGCT
CGATGACGGT
CCGCTTGTTT
TCCAGGGCTG
CCGCCAAGCC
CTTGCCCACG
GGGAAGCCCT
GGCGGGCCAG
CTGGATGCTG
GGCTGGAAGA
GGCGAGCCCA
GGGCAGCCGC
CCATGCCGCT
GGTGTGCCAG
CTCATAGCCT
CGGATCTCCC
CAGGCACCGC
CACCGACAGC
CCCCCCTTCT
GGGACTGCTC
CGAGCTGTTG
AACATGGTGG
CAAAGGCCAG
CCTGGGGGCC
ACCTCGCGGG
CGTTGATGAC
CTCAGCTTTT
CGTGTGGTGC
TGTTGTAGAT
GGTGAGGAAG
AGGCCACCCC
CGATGCCCAT
GCTGTGGGCA
TTCATGAGCC
CCACACACAA
CAGGGCTGCA
ATGGCTGCAT
CCACCGCAGA
GCCACCGTCC
CGCAGTGCAT
CCCTCCCAAT
CTTCGAGCAC
TGCTTGGCAT
CCGCGGCCAC
GGCAGCCCTG
GTGTACACAT
GGTTGTCAGG
TTCCTTGGAG
GCTGAGGGCA
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GAGGCCGACA
ATGACCAGCA
CCAGGACCAC
GGCCAGCAGG
CCCAGCACCA
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CTGCGTCCAG
CAGCAGACGG
GGGCCCCAAG
CCTTGCCTGG
GGTGTTGGCC
ACGAAAGACA
GGAGGATTTG
GTGGAAATAG
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