名称: | pGreen II-62-SK |
---|---|
别称: | pGreenII-62-SK |
基因长: | |
质粒宿主: | 植物 |
质粒用途: | 蛋白表达 |
片段类型: | ORF |
片段物种: | 空载体 |
原核抗性: | Kan |
筛选标记: | |
荧光标记: | |
启动子: | 35s |
复制子: | pSa |
拷贝数: | |
感受态: | DH5a |
温度: | 37度 |
背景载体: | |
正向引物: | 35s: |
反向引物: | |
诱导方式: |
1、本平台所有产品仅供科研使用,不能用于临床试验,包括人体口服、注射或者体外用药;
2、小包装质粒以模板价格出售,只保证基因部分测序正确,不保证质粒的表达等实验效果;
3、某些质粒即使是出品公司亦没有完整测过序,如关键部位的序列测序正确,亦认为是正确质粒;
4、小包装质粒产品的售后期为您收到产品之日起3个月,收到质粒后请及时转化操作,过期需重新购买;
5、质粒构建皆收取的是成本费用,所有质粒会分享给其他实验者,保密性质粒请提前告知并缴纳保密费用;
6、因科学研究为探索未知的活动,存在较大不确定性,故在任何情况下淼灵都不承担额外的连带责任;
7、发表[中文论文]请标注:产品名称(产品货号) 由武汉淼灵生物科技有限公司提供;
8、发表[英文论文]请标注:Product Name (Product Item Number) was obtained from MiaoLingBio,China.
操作说明
一、质粒干粉(负20度保存,保质期90天,常温运输)
1、收到干粉质粒后请先5000rpm离心1min,再加入20μl无菌水溶解质粒;
2、将相应的感受态于冰盒上解冻,取2μl质粒加至100μl感受态中,冰浴 30min;
3、42度热激60s,冰浴2min,加入900μl无抗LB培养基,180rpm震荡培养45min;
4、6000rpm离心3min,留100μl上清重悬,再涂至对应抗性的LB平板上;
5、倒置培养过夜后,如菌落过多则稀释质粒转化,如没有菌落则取10ul质粒转化;
6、挑单菌落至对应抗性的LB液体培养基中过夜震荡培养,根据需要提取质粒。
二、液体质粒(负20度保存,保质期90天,冰袋运输)
1、收到液体质粒后请甩动保存管,让液体质粒不要吸附在管壁上;
2、根据实验需求取适量质粒,其余保存于负20度冰箱。
三、甘油菌种(负80度保存,保质期90天,冰袋运输)
1、收到甘油菌种后请甩动保存管,让菌液不要吸附在管壁上;
2、用接种环在固体平板上四区划线,如有抗性就加对应抗性;
3、恒温培养箱倒置培养12~16h;
4、务必挑取单菌落接种于液体培养基中,如有抗性就加对应抗性;
5、摇床震荡培养过夜,根据实验需要培养菌种。
TTTTTATCCC
CGGAAGCCTG
TGGATAGAGG
GTAGTTATCC
ACGTGAAACC
GCTAATGCCC
CGCAAAGCCT
TGATTCACGG
GGCTTTCCGG
CCCGCTCCAA
AAACTATCCA
CGTGAAATCG
CTAATCAGGG
TACGTGAAAT
CGCTAATCGG
AGTACGTGAA
ATCGCTAATA
AGGTCACGTG
AAATCGCTAA
TCAAAAAGGC
ACGTGAGAAC
GCTAATAGCC
CTTTCAGATC
AACAGCTTGC
AAACACCCCT
CGCTCCGGCA
AGTAGTTACA
GCAAGTAGTA
TGTTCAATTA
GCTTTTCAAT
TATGAATATA
TATATCAATT
ATTGGTCGCC
CTTGGCTTGT
GGACAATGCG
CTACGCGCAC
CGGCTCCGCC
CGTGGACAAC
CGCAAGCGGT
TGCCCACCGT
CGAGCGCCAG
CGCCTTTGCC
CACAACCCGG
CGGCCGGCCG
CAACAGATCG
TTTTATAAAT
TTTTTTTTTT
GAAAAAGAAA
AAGCCCGAAA
GGCGGCAACC
TCTCGGGCTT
CTGGATTTCC
GATCCCCGGA
ATTAGAGATC
TTGGCAGGAT
ATATTGTGGT
GTAACGTTAT
CAGCTTGGTA
CGTACCCCCC
TACTCCAAAA
ATGTCAAAGA
TACAGTCTCA
GAAGACCAAA
GGGCTATTGA
GACTTTTCAA
CAAAGGGTAA
TTTCGGGAAA
CCTCCTCGGA
TTCCATTGCC
CAGCTATCTG
TCACTTCATC
GAAAGGACAG
TAGAAAAGGA
AGGTGGCTCC
TACAAATGCC
ATCATTGCGA
TAAAGGAAAG
GCTATCATTC
AAGATGCCTC
TGCCGACAGT
GGTCCCAAAG
ATGGACCCCC
ACCCACGAGG
AGCATCGTGG
AAAAAGAAGA
CGTTCCAACC
ACGTCTTCAA
AGCAAGTGGA
TTGATGTGAC
ATCTCCACTG
ACGTAAGGGA
TGACGCACAA
TCCCACTATC
CTTCGCAAGA
CCCTTCCTCT
ATATAAGGAA
GTCATTTCAT
TTGGAGAGGA
CAGCCCAAGC
TGAGCTCCAC
CGCGGTGGCG
GCCGCTCTAG
AACTAGTGGA
TCCCCCGGGC
TGCAGGAATT
CGATATCAAG
CTTATCGATA
CCGTCGACCT
CGAGGGGGGG
CCCGGTACCA
ATTCGGTACG
CTGAAATCAC
CAGTCTCTCT
CTACAAATCT
ATCTCTCTCT
ATTTTCTCCA
TAAATAATGT
GTGAGTAGTT
TCCCGATAAG
GGAAATTAGG
GTTCTTATAG
GGTTTCGCTC
ATGTGTTGAG
CATATAAGAA
ACCCTTAGTA
TGTATTTGTA
TTTGTAAAAT
ACTTCTATCA
ATAAAATTTC
TAATTCCTAA
AACCAAAATC
CAGTACTAAA
ATCCAGATCC
ACTAGCCTTG
ACAGGATATA
TTGGCGGGTA
AACTAAGTCG
CTGTATGTGT
TTGTTTGAGA
TCTCATGTGA
GCAAAAGGCC
AGCAAAAGGC
CAGGAACCGT
AAAAAGGCCG
CGTTGCTGGC
GTTTTTCCAT
AGGCTCCGCC
CCCCTGACGA
GCATCACAAA
AATCGACGCT
CAAGTCAGAG
GTGGCGAAAC
CCGACAGGAC
TATAAAGATA
CCAGGCGTTT
CCCCCTGGAA
GCTCCCTCGT
GCGCTCTCCT
GTTCCGACCC
TGCCGCTTAC
CGGATACCTG
TCCGCCTTTC
TCCCTTCGGG
AAGCGTGGCG
CTTTCTCATA
GCTCACGCTG
TAGGTATCTC
AGTTCGGTGT
AGGTCGTTCG
CTCCAAGCTG
GGCTGTGTGC
ACGAACCCCC
CGTTCAGCCC
GACCGCTGCG
CCTTATCCGG
TAACTATCGT
CTTGAGTCCA
ACCCGGTAAG
ACACGACTTA
TCGCCACTGG
CAGCAGCCAC
TGGTAACAGG
ATTAGCAGAG
CGAGGTATGT
AGGCGGTGCT
ACAGAGTTCT
TGAAGTGGTG
GCCTAACTAC
GGCTACACTA
GAAGAACAGT
ATTTGGTATC
TGCGCTCTGC
TGAAGCCAGT
TACCTTCGGA
AGAAGAGTTG
GTAGCTCTTG
ATCCGGCAAA
CAAACCACCG
CTGGTAGCGG
TGGTTTTTTT
GTTTGCAAGC
AGCAGATTAC
GCGCAGAAAA
AAAGGATCTC
AAGAAGATCC
TTTGATCTTT
TCTACGGGGT
CTGACGCTCA
GTGGAACGAA
AACTCACGTT
AAGGGATTTT
GGTCATGAGA
TTATCAAAAA
GGATCTTCAC
CTAGATCCTT
TTAAATTAAA
AATGAAGTTT
TAAATCAATC
TAAAGTATAT
ATGTGTAACA
TTGGTCTAGT
GATTAGAAAA
ACTCATCGAG
CATCAAATGA
AACTGCAATT
TATTCATATC
AGGATTATCA
ATACCATATT
TTTGAAAAAG
CCGTTTCTGT
AATGAAGGAG
AAAACTCACC
GAGGCAGTTC
CATAGGATGG
CAAGATCCTG
GTATCGGTCT
GCGATTCCGA
CTCGTCCAAC
ATCAATACAA
CCTATTAATT
TCCCCTCGTC
AAAAATAAGG
TTATCAAGTG
AGAAATCACC
ATGAGTGACG
ACTGAATCCG
GTGAGAATGG
CAAAAGTTTA
TGCATTTCTT
TCCAGACTTG
TTCAACAGGC
CAGCCATTAC
GCTCGTCATC
AAAATCACTC
GCATCAACCA
AACCGTTATT
CATTCGTGAT
TGCGCCTGAG
CGAGACGAAA
TACGCGATCG
CTGTTAAAAG
GACAATTACA
AACAGGAATC
GAATGCAACC
GGCGCAGGAA
CACTGCCAGC
GCATCAACAA
TATTTTCACC
TGAATCAGGA
TATTCTTCTA
ATACCTGGAA
TGCTGTTTTC
CCTGGGATCG
CAGTGGTGAG
TAACCATGCA
TCATCAGGAG
TACGGATAAA
ATGCTTGATG
GTCGGAAGAG
GCATAAATTC
CGTCAGCCAG
TTTAGTCTGA
CCATCTCATC
TGTAACAACA
TTGGCAACGC
TACCTTTGCC
ATGTTTCAGA
AACAACTCTG
GCGCATCGGG
CTTCCCATAC
AATCGGTAGA
TTGTCGCACC
TGATTGCCCG
ACATTATCGC
GAGCCCATTT
ATACCCATAT
AAATCAGCAT
CCATGTTGGA
ATTTAATCGC
GGCCTTGAGC
AAGACGTTTC
CCGTTGAATA
TGGCTCATAA
CACCCCTTGT
ATTACTGTTT
ATGTAAGCAG
ACAGTTTTAT
TGTTCATGAT
GATATATTTT
TATCTTGTGC
AATGTAACAT
CAGAGATTTT
GAGACACAAC
GTGGCTTTGT
TGAATAAATC
GAACTTTTGC
TGAGTTGAAG
GATCAGATCA
CGCATCTTCC
CGACAACGCA
GACCGTTCCG
TGGCAAAGCA
AAAGTTCAAA
ATCACCAACT
GGTCCACCTA
CAACAAAGCT
CTCATCAACC
GTGGCTCCCT
CACTTTCTGG
CTGGATGATG
GGGCGATTCA
GGCGATCCCC
ATCCAACAGC
CCGCCGTCGA
GCGGGCT