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pCOLADuet-1

产品货号:P0430

产品规格:

    少量干粉质粒 大提液体质粒

产品数量:

- 1 +

产品价格:0.00

一键复制产品信息
名称: pCOLADuet-1
别称:
基因长:
质粒宿主: 大肠杆菌
质粒用途: 蛋白表达
片段类型: ORF
片段物种: 多框空载
原核抗性: Kan
筛选标记:
荧光标记:
启动子: T7
复制子: ColA
拷贝数:
感受态: DH5a
温度: 37度
背景载体:
正向引物: LacI-F:accgaagacagctcatgtt
反向引物:
诱导方式: IPTG诱导

1、本平台所有产品仅供科研使用,不能用于临床试验,包括人体口服、注射或者体外用药;
2、小包装质粒以模板价格出售,只保证基因部分测序正确,不保证质粒的表达等实验效果;
3、某些质粒即使是出品公司亦没有完整测过序,如关键部位的序列测序正确,亦认为是正确质粒;
4、小包装质粒产品的售后期为您收到产品之日起3个月,收到质粒后请及时转化操作,过期需重新购买;
5、质粒构建皆收取的是成本费用,所有质粒会分享给其他实验者,保密性质粒请提前告知并缴纳保密费用;
6、因科学研究为探索未知的活动,存在较大不确定性,故在任何情况下淼灵都不承担额外的连带责任;
7、发表[中文论文]请标注:产品名称(产品货号) 由武汉淼灵生物科技有限公司提供;
8、发表[英文论文]请标注:Product Name (Product Item Number) was obtained from MiaoLingBio,China.

操作说明

一、质粒干粉(负20度保存,保质期90天,常温运输)

1、收到干粉质粒后请先5000rpm离心1min,再加入20μl无菌水溶解质粒;

2、将相应的感受态于冰盒上解冻,取2μl质粒加至100μl感受态中,冰浴 30min;

3、42度热激60s,冰浴2min,加入900μl无抗LB培养基,180rpm震荡培养45min;

4、6000rpm离心3min,留100μl上清重悬,再涂至对应抗性的LB平板上;

5、倒置培养过夜后,如菌落过多则稀释质粒转化,如没有菌落则取10ul质粒转化;

6、挑单菌落至对应抗性的LB液体培养基中过夜震荡培养,根据需要提取质粒。


二、液体质粒(负20度保存,保质期90天,冰袋运输)

1、收到液体质粒后请甩动保存管,让液体质粒不要吸附在管壁上;

2、根据实验需求取适量质粒,其余保存于负20度冰箱。

三、甘油菌种(负80度保存,保质期90天,冰袋运输)

1、收到甘油菌种后请甩动保存管,让菌液不要吸附在管壁上;

2、用接种环在固体平板上四区划线,如有抗性就加对应抗性;

3、恒温培养箱倒置培养12~16h;

4、务必挑取单菌落接种于液体培养基中,如有抗性就加对应抗性;

5、摇床震荡培养过夜,根据实验需要培养菌种。

一键复制序列(有部分质粒是非全长序列)
1

GGGGAATTGT

GAGCGGATAA

CAATTCCCCT

GTAGAAATAA

TTTTGTTTAA

CTTTAATAAG

61

GAGATATACC

ATGGGCAGCA

GCCATCACCA

TCATCACCAC

AGCCAGGATC

CGAATTCGAG

121

CTCGGCGCGC

CTGCAGGTCG

ACAAGCTTGC

GGCCGCATAA

TGCTTAAGTC

GAACAGAAAG

181

TAATCGTATT

GTACACGGCC

GCATAATCGA

AATTAATACG

ACTCACTATA

GGGGAATTGT

241

GAGCGGATAA

CAATTCCCCA

TCTTAGTATA

TTAGTTAAGT

ATAAGAAGGA

GATATACATA

301

TGGCAGATCT

CAATTGGATA

TCGGCCGGCC

ACGCGATCGC

TGACGTCGGT

ACCCTCGAGT

361

CTGGTAAAGA

AACCGCTGCT

GCGAAATTTG

AACGCCAGCA

CATGGACTCG

TCTACTAGCG

421

CAGCTTAATT

AACCTAGGCT

GCTGCCACCG

CTGAGCAATA

ACTAGCATAA

CCCCTTGGGG

481

CCTCTAAACG

GGTCTTGAGG

GGTTTTTTGC

TGAAACCTCA

GGCATTTGAG

AAGCACACGG

541

TCACACTGCT

TCCGGTAGTC

AATAAACCGG

TAAACCAGCA

ATAGACATAA

GCGGCTATTT

601

AACGACCCTG

CCCTGAACCG

ACGACAAGCT

GACGACCGGG

TCTCCGCAAG

TGGCACTTTT

661

CGGGGAAATG

TGCGCGGAAC

CCCTATTTGT

TTATTTTTCT

AAATACATTC

AAATATGTAT

721

CCGCTCATGA

ATTAATTCTT

AGAAAAACTC

ATCGAGCATC

AAATGAAACT

GCAATTTATT

781

CATATCAGGA

TTATCAATAC

CATATTTTTG

AAAAAGCCGT

TTCTGTAATG

AAGGAGAAAA

841

CTCACCGAGG

CAGTTCCATA

GGATGGCAAG

ATCCTGGTAT

CGGTCTGCGA

TTCCGACTCG

901

TCCAACATCA

ATACAACCTA

TTAATTTCCC

CTCGTCAAAA

ATAAGGTTAT

CAAGTGAGAA

961

ATCACCATGA

GTGACGACTG

AATCCGGTGA

GAATGGCAAA

AGTTTATGCA

TTTCTTTCCA

1021

GACTTGTTCA

ACAGGCCAGC

CATTACGCTC

GTCATCAAAA

TCACTCGCAT

CAACCAAACC

1081

GTTATTCATT

CGTGATTGCG

CCTGAGCGAG

ACGAAATACG

CGGTCGCTGT

TAAAAGGACA

1141

ATTACAAACA

GGAATCGAAT

GCAACCGGCG

CAGGAACACT

GCCAGCGCAT

CAACAATATT

1201

TTCACCTGAA

TCAGGATATT

CTTCTAATAC

CTGGAATGCT

GTTTTCCCGG

GGATCGCAGT

1261

GGTGAGTAAC

CATGCATCAT

CAGGAGTACG

GATAAAATGC

TTGATGGTCG

GAAGAGGCAT

1321

AAATTCCGTC

AGCCAGTTTA

GTCTGACCAT

CTCATCTGTA

ACATCATTGG

CAACGCTACC

1381

TTTGCCATGT

TTCAGAAACA

ACTCTGGCGC

ATCGGGCTTC

CCATACAATC

GATAGATTGT

1441

CGCACCTGAT

TGCCCGACAT

TATCGCGAGC

CCATTTATAC

CCATATAAAT

CAGCATCCAT

1501

GTTGGAATTT

AATCGCGGCC

TAGAGCAAGA

CGTTTCCCGT

TGAATATGGC

TCATACTCTT

1561

CCTTTTTCAA

TATTATTGAA

GCATTTATCA

GGGTTATTGT

CTCATGAGCG

GATACATATT

1621

TGAATGTATT

TAGAAAAATA

AACAAATAGG

CATGCTAGCG

CAGAAACGTC

CTAGAAGATG

1681

CCAGGAGGAT

ACTTAGCAGA

GAGACAATAA

GGCCGGAGCG

AAGCCGTTTT

TCCATAGGCT

1741

CCGCCCCCCT

GACGAACATC

ACGAAATCTG

ACGCTCAAAT

CAGTGGTGGC

GAAACCCGAC

1801

AGGACTATAA

AGATACCAGG

CGTTTCCCCC

TGATGGCTCC

CTCTTGCGCT

CTCCTGTTCC

1861

CGTCCTGCGG

CGTCCGTGTT

GTGGTGGAGG

CTTTACCCAA

ATCACCACGT

CCCGTTCCGT

1921

GTAGACAGTT

CGCTCCAAGC

TGGGCTGTGT

GCAAGAACCC

CCCGTTCAGC

CCGACTGCTG

1981

CGCCTTATCC

GGTAACTATC

ATCTTGAGTC

CAACCCGGAA

AGACACGACA

AAACGCCACT

2041

GGCAGCAGCC

ATTGGTAACT

GAGAATTAGT

GGATTTAGAT

ATCGAGAGTC

TTGAAGTGGT

2101

GGCCTAACAG

AGGCTACACT

GAAAGGACAG

TATTTGGTAT

CTGCGCTCCA

CTAAAGCCAG

2161

TTACCAGGTT

AAGCAGTTCC

CCAACTGACT

TAACCTTCGA

TCAAACCGCC

TCCCCAGGCG

2221

GTTTTTTCGT

TTACAGAGCA

GGAGATTACG

ACGATCGTAA

AAGGATCTCA

AGAAGATCCT

2281

TTACGGATTC

CCGACACCAT

CACTCTAGAT

TTCAGTGCAA

TTTATCTCTT

CAAATGTAGC

2341

ACCTGAAGTC

AGCCCCATAC

GATATAAGTT

GTAATTCTCA

TGTTAGTCAT

GCCCCGCGCC

2401

CACCGGAAGG

AGCTGACTGG

GTTGAAGGCT

CTCAAGGGCA

TCGGTCGAGA

TCCCGGTGCC

2461

TAATGAGTGA

GCTAACTTAC

ATTAATTGCG

TTGCGCTCAC

TGCCCGCTTT

CCAGTCGGGA

2521

AACCTGTCGT

GCCAGCTGCA

TTAATGAATC

GGCCAACGCG

CGGGGAGAGG

CGGTTTGCGT

2581

ATTGGGCGCC

AGGGTGGTTT

TTCTTTTCAC

CAGTGAGACG

GGCAACAGCT

GATTGCCCTT

2641

CACCGCCTGG

CCCTGAGAGA

GTTGCAGCAA

GCGGTCCACG

CTGGTTTGCC

CCAGCAGGCG

2701

AAAATCCTGT

TTGATGGTGG

TTAACGGCGG

GATATAACAT

GAGCTGTCTT

CGGTATCGTC

2761

GTATCCCACT

ACCGAGATGT

CCGCACCAAC

GCGCAGCCCG

GACTCGGTAA

TGGCGCGCAT

2821

TGCGCCCAGC

GCCATCTGAT

CGTTGGCAAC

CAGCATCGCA

GTGGGAACGA

TGCCCTCATT

2881

CAGCATTTGC

ATGGTTTGTT

GAAAACCGGA

CATGGCACTC

CAGTCGCCTT

CCCGTTCCGC

2941

TATCGGCTGA

ATTTGATTGC

GAGTGAGATA

TTTATGCCAG

CCAGCCAGAC

GCAGACGCGC

3001

CGAGACAGAA

CTTAATGGGC

CCGCTAACAG

CGCGATTTGC

TGGTGACCCA

ATGCGACCAG

3061

ATGCTCCACG

CCCAGTCGCG

TACCGTCTTC

ATGGGAGAAA

ATAATACTGT

TGATGGGTGT

3121

CTGGTCAGAG

ACATCAAGAA

ATAACGCCGG

AACATTAGTG

CAGGCAGCTT

CCACAGCAAT

3181

GGCATCCTGG

TCATCCAGCG

GATAGTTAAT

GATCAGCCCA

CTGACGCGTT

GCGCGAGAAG

3241

ATTGTGCACC

GCCGCTTTAC

AGGCTTCGAC

GCCGCTTCGT

TCTACCATCG

ACACCACCAC

3301

GCTGGCACCC

AGTTGATCGG

CGCGAGATTT

AATCGCCGCG

ACAATTTGCG

ACGGCGCGTG

3361

CAGGGCCAGA

CTGGAGGTGG

CAACGCCAAT

CAGCAACGAC

TGTTTGCCCG

CCAGTTGTTG

3421

TGCCACGCGG

TTGGGAATGT

AATTCAGCTC

CGCCATCGCC

GCTTCCACTT

TTTCCCGCGT

3481

TTTCGCAGAA

ACGTGGCTGG

CCTGGTTCAC

CACGCGGGAA

ACGGTCTGAT

AAGAGACACC

3541

GGCATACTCT

GCGACATCGT

ATAACGTTAC

TGGTTTCACA

TTCACCACCC

TGAATTGACT

3601

CTCTTCCGGG

CGCTATCATG

CCATACCGCG

AAAGGTTTTG

CGCCATTCGA

TGGTGTCCGG

3661

GATCTCGACG

CTCTCCCTTA

TGCGACTCCT

GCATTAGGAA

ATTAATACGA

CTCACTATA

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