名称: | pCL-Eco |
---|---|
别称: | Plasmid#12371 |
基因长: | |
质粒宿主: | 哺乳细胞,逆病毒 |
质粒用途: | 包装辅助 |
片段类型: | ORF |
片段物种: | 病毒 |
原核抗性: | Amp |
筛选标记: | |
荧光标记: | |
启动子: | CMV |
复制子: | pUC |
拷贝数: | |
感受态: | Stbl3 |
温度: | 37度 |
背景载体: | |
正向引物: | CMV-F:CGCAAATGGGCGGTAGGCGTG |
反向引物: | PLCNX-R:ACCTACAGGTGGGGTCTTTCATTCCC |
诱导方式: |
1、本平台所有产品仅供科研使用,不能用于临床试验,包括人体口服、注射或者体外用药;
2、小包装质粒以模板价格出售,只保证基因部分测序正确,不保证质粒的表达等实验效果;
3、某些质粒即使是出品公司亦没有完整测过序,如关键部位的序列测序正确,亦认为是正确质粒;
4、小包装质粒产品的售后期为您收到产品之日起3个月,收到质粒后请及时转化操作,过期需重新购买;
5、质粒构建皆收取的是成本费用,所有质粒会分享给其他实验者,保密性质粒请提前告知并缴纳保密费用;
6、因科学研究为探索未知的活动,存在较大不确定性,故在任何情况下淼灵都不承担额外的连带责任;
7、发表[中文论文]请标注:产品名称(产品货号) 由武汉淼灵生物科技有限公司提供;
8、发表[英文论文]请标注:Product Name (Product Item Number) was obtained from MiaoLingBio,China.
操作说明
一、质粒干粉(负20度保存,保质期90天,常温运输)
1、收到干粉质粒后请先5000rpm离心1min,再加入20μl无菌水溶解质粒;
2、将相应的感受态于冰盒上解冻,取2μl质粒加至100μl感受态中,冰浴 30min;
3、42度热激60s,冰浴2min,加入900μl无抗LB培养基,180rpm震荡培养45min;
4、6000rpm离心3min,留100μl上清重悬,再涂至对应抗性的LB平板上;
5、倒置培养过夜后,如菌落过多则稀释质粒转化,如没有菌落则取10ul质粒转化;
6、挑单菌落至对应抗性的LB液体培养基中过夜震荡培养,根据需要提取质粒。
二、液体质粒(负20度保存,保质期90天,冰袋运输)
1、收到液体质粒后请甩动保存管,让液体质粒不要吸附在管壁上;
2、根据实验需求取适量质粒,其余保存于负20度冰箱。
三、甘油菌种(负80度保存,保质期90天,冰袋运输)
1、收到甘油菌种后请甩动保存管,让菌液不要吸附在管壁上;
2、用接种环在固体平板上四区划线,如有抗性就加对应抗性;
3、恒温培养箱倒置培养12~16h;
4、务必挑取单菌落接种于液体培养基中,如有抗性就加对应抗性;
5、摇床震荡培养过夜,根据实验需要培养菌种。
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CTATGGATGA
ACGAAATAGA
CAGATCGCTG
AGATAGGTGC
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GGGGGGCGGA
GCCTATGGAA
AAACGCCAGC
AACGCGGCCT
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TGCTGGCCTT
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GCGTTATCCC
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TGATACCGCT
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GCGCAGCGAG
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GGCAGCCAGC
TTACCTCCCG
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GGTGATGAGG
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GGAGGGGTCC
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AAGGCTTCCC
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GTAGGGGACC
TGGTCTGGGT
GTCCATGCGG
GCCAGGTGAA
AAGACCTTGA
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GGTGATGAGG
TCTCGGTTAA
AGGTGCCGTC
TCGCGGCCAT
CCGACGTTAA
AGGTTGGCCA
TTCTGCAGAG
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CCCAACGTCT
CTTCTTGACA
TCTACCGACT
GGTTGTGAGC
GATCCGCTCG
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GGTCAAACTT
AAGGGAGTGG
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TCAGACAAAT
ACAGAAACAC
AGTCAGACAG
AGACAACACA
GAACGATGCC
CAAGCTTGGC
CAGCTTACCT
CCCGGTGGTG
GGTCGGTGGT
CCCTGGGCAG
GGGTCTCCCG
ATCCCGGACG
AGCCCCCAAA
TGAAAGACCC
CCGCTGACGG
GTAGTCAATC
ACTCAGAGGA
GACCCTCCCA
AGGAACAGCG
AGACCACAAG
TCGGATGCAA
CTGCAAGAGG
GTTTATTGGA
TACACGGGTA
CCCGGGCGAC
TCAGTCAATC
GGAGGACTGG
CGCGCCGAGT
GAGGGGTTGT
GGGCTCTTTT
ATTGAGCTCT
GCTTATATAG
ACCTCCCACC
GTACACGCCT
ACCGCCCATT
TGCGTCAATG
GGGCGGAGTT
GTTACGACAT
TTTGGAAAGT
CCCGTTGATT
TTGGTGCCAA
AACAAACTCC
CATTGACGTC
AATGGGGTGG
AGACTTGGAA
ATCCCCGTGA
GTCAAACCGC
TATCCACGCC
CATTGATGTA
CTGCCAAAAC
CGCATCACCA
TGGTAATAGC
GATGACTAAT
ACGTAGATGT
ACTGCCAAGT
AGGAAAGTCC
CATAAGGTCA
TGTACTGGGC
ATAATGCCAG
GCGGGCCATT
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GGGGGCGTAC
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AGTGGGCAGT
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GGGGTCGTTG
GGCGGTCAGC
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CGCGGAACTC
CATATATGGG
CTATGAACTA
ATGACCCCGT
AATTGATTAC
TATTAATAAC
TAGTCAATAA
TCAATGTCAA
CGCGCTGGCG
TAATAGCGAA
GAGGCCCGCA
CCGATCGCCC
TTCCCAACAG
TTGCGCAGCC
TGAATGGCGA
ATGGCGCCTG
ATGCGGTATT
TTCTCCTTAC
GCATCTGTGC
GGTATTTCAC
ACCGCATATG
GTGCACTCTC
AGTACAATCT
GCTCTGATGC
CGCATAGTTA
AGCCAGCCCC
GACACCCGCC
AACACCCGCT
GACGCGCCCT
GACGGGCTTG
TCTGCTCCCG
GCATCCGCTT
ACAGACAAGC
TGTGACCGTC
TCCGGGAGCT
GCATGTGTCA
GAGGTTTTCA
CCGTCATCAC
CGAAACGCGC
GAGACGAAAG
GGCCTCGTGA
TACGCCTATT
TTTATAGGTT
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TAATAATGGT
TTCTTAGACG
TCAGGTGGCA
CTTTTCGGGG
AAATGTGCGC
GGAACCCCTA
TTTGTTTATT
TTTCTAAATA
CATTCAAATA
TGTATCCGCT
CATGAGACAA
TAACCCTGAT
AAATGCTTCA
ATAATATTGA
AAAAGGAAGA
GTATGAGTAT
TCAACATTTC
CGTGTCGCCC
TTATTCCCTT
TTTTGCGGCA
TTTTGCCTTC
CTGTTTTTGC
TCACCCAGAA
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AAGTAAAAGA
TGCTGAAGAT
CAGTTGGGTG
CACGAGTGGG
TTACATCGAA
CTGGATCTCA
ACAGCGGTAA
GATCCTTGAG
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CCGAAGAACG
TTTTCCAATG
ATGAGCACTT
TTAAAGTTCT
GCTATGTGGC
GCGGTATTAT
CCCGTATTGA
CGCCGGGCAA
GAGCAACTCG
GTCGCCGCAT
ACACTATTCT
CAGAATGACT
TGGTTGAGTA
CTCACCAGTC
ACAGAAAAGC
ATCTTACGGA
TGGCATGACA
GTAAGAGAAT
TATGCAGTGC
TGCCATAACC
ATGAGTGATA
ACACTGCGGC
CAACTTACTT
CTGACAACGA
TCGGAGGACC
GAAGGAGCTA
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TGCACAACAT
GGGGGATCAT
GTAACTCGCC
TTGATCGTTG
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CTGAATGAAG
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TGCCTGCAGC
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TGGCGAACTA
CTTACTCTAG
CTTCCCGGCA
ACAATTAATA
GACTGGATGG
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GCTCGGCCCT
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TGGTTTATTG
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TGGAGCCGGT
GAGCGTGGGT
CTCGCGGTAT
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CTGGGGCCAG
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