名称: | pBAD24 |
---|---|
别称: | pBAD-24 |
基因长: | |
质粒宿主: | 大肠杆菌 |
质粒用途: | 蛋白表达 |
片段类型: | ORF |
片段物种: | 空载体 |
原核抗性: | Amp |
筛选标记: | |
荧光标记: | |
启动子: | BAD |
复制子: | pBR322 |
拷贝数: | 低 |
感受态: | DH5a |
温度: | 37度 |
背景载体: | |
正向引物: | PBAD30.F:AGATTAGCGGATCCTACCTG |
反向引物: | PBAD30.R:CACTTCTGAGTTCGGCATGG |
诱导方式: | 阿拉伯糖诱导 |
1、本平台所有产品仅供科研使用,不能用于临床试验,包括人体口服、注射或者体外用药;
2、小包装质粒以模板价格出售,只保证基因部分测序正确,不保证质粒的表达等实验效果;
3、某些质粒即使是出品公司亦没有完整测过序,如关键部位的序列测序正确,亦认为是正确质粒;
4、小包装质粒产品的售后期为您收到产品之日起3个月,收到质粒后请及时转化操作,过期需重新购买;
5、质粒构建皆收取的是成本费用,所有质粒会分享给其他实验者,保密性质粒请提前告知并缴纳保密费用;
6、因科学研究为探索未知的活动,存在较大不确定性,故在任何情况下淼灵都不承担额外的连带责任;
7、发表[中文论文]请标注:产品名称(产品货号) 由武汉淼灵生物科技有限公司提供;
8、发表[英文论文]请标注:Product Name (Product Item Number) was obtained from MiaoLingBio,China.
操作说明
一、质粒干粉(负20度保存,保质期90天,常温运输)
1、收到干粉质粒后请先5000rpm离心1min,再加入20μl无菌水溶解质粒;
2、将相应的感受态于冰盒上解冻,取2μl质粒加至100μl感受态中,冰浴 30min;
3、42度热激60s,冰浴2min,加入900μl无抗LB培养基,180rpm震荡培养45min;
4、6000rpm离心3min,留100μl上清重悬,再涂至对应抗性的LB平板上;
5、倒置培养过夜后,如菌落过多则稀释质粒转化,如没有菌落则取10ul质粒转化;
6、挑单菌落至对应抗性的LB液体培养基中过夜震荡培养,根据需要提取质粒。
二、液体质粒(负20度保存,保质期90天,冰袋运输)
1、收到液体质粒后请甩动保存管,让液体质粒不要吸附在管壁上;
2、根据实验需求取适量质粒,其余保存于负20度冰箱。
三、甘油菌种(负80度保存,保质期90天,冰袋运输)
1、收到甘油菌种后请甩动保存管,让菌液不要吸附在管壁上;
2、用接种环在固体平板上四区划线,如有抗性就加对应抗性;
3、恒温培养箱倒置培养12~16h;
4、务必挑取单菌落接种于液体培养基中,如有抗性就加对应抗性;
5、摇床震荡培养过夜,根据实验需要培养菌种。
ATCGATGCAT
AATGTGCCTG
TCAAATGGAC
GAAGCAGGGA
TTCTGCAAAC
CCTATGCTAC
TCCGTCAAGC
CGTCAATTGT
CTGATTCGTT
ACCAATTATG
ACAACTTGAC
GGCTACATCA
TTCACTTTTT
CTTCACAACC
GGCACGGAAC
TCGCTCGGGC
TGGCCCCGGT
GCATTTTTTA
AATACCCGCG
AGAAATAGAG
TTGATCGTCA
AAACCAACAT
TGCGACCGAC
GGTGGCGATA
GGCATCCGGG
TGGTGCTCAA
AAGCAGCTTC
GCCTGGCTGA
TACGTTGGTC
CTCGCGCCAG
CTTAAGACGC
TAATCCCTAA
CTGCTGGCGG
AAAAGATGTG
ACAGACGCGA
CGGCGACAAG
CAAACATGCT
GTGCGACGCT
GGCGATATCA
AAATTGCTGT
CTGCCAGGTG
ATCGCTGATG
TACTGACAAG
CCTCGCGTAC
CCGATTATCC
ATCGGTGGAT
GGAGCGACTC
GTTAATCGCT
TCCATGCGCC
GCAGTAACAA
TTGCTCAAGC
AGATTTATCG
CCAGCAGCTC
CGAATAGCGC
CCTTCCCCTT
GCCCGGCGTT
AATGATTTGC
CCAAACAGGT
CGCTGAAATG
CGGCTGGTGC
GCTTCATCCG
GGCGAAAGAA
CCCCGTATTG
GCAAATATTG
ACGGCCAGTT
AAGCCATTCA
TGCCAGTAGG
CGCGCGGACG
AAAGTAAACC
CACTGGTGAT
ACCATTCGCG
AGCCTCCGGA
TGACGACCGT
AGTGATGAAT
CTCTCCTGGC
GGGAACAGCA
AAATATCACC
CGGTCGGCAA
ACAAATTCTC
GTCCCTGATT
TTTCACCACC
CCCTGACCGC
GAATGGTGAG
ATTGAGAATA
TAACCTTTCA
TTCCCAGCGG
TCGGTCGATA
AAAAAATCGA
GATAACCGTT
GGCCTCAATC
GGCGTTAAAC
CCGCCACCAG
ATGGGCATTA
AACGAGTATC
CCGGCAGCAG
GGGATCATTT
TGCGCTTCAG
CCATACTTTT
CATACTCCCG
CCATTCAGAG
AAGAAACCAA
TTGTCCATAT
TGCATCAGAC
ATTGCCGTCA
CTGCGTCTTT
TACTGGCTCT
TCTCGCTAAC
CAAACCGGTA
ACCCCGCTTA
TTAAAAGCAT
TCTGTAACAA
AGCGGGACCA
AAGCCATGAC
AAAAACGCGT
AACAAAAGTG
TCTATAATCA
CGGCAGAAAA
GTCCACATTG
ATTATTTGCA
CGGCGTCACA
CTTTGCTATG
CCATAGCATT
TTTATCCATA
AGATTAGCGG
ATCCTACCTG
ACGCTTTTTA
TCGCAACTCT
CTACTGTTTC
TCCATACCCG
TTTTTTTGGG
CTAGCAGGAG
GAATTCACCA
TGGTACCCGG
GGATCCTCTA
GAGTCGACCT
GCAGGCATGC
AAGCTTGGCT
GTTTTGGCGG
ATGAGAGAAG
ATTTTCAGCC
TGATACAGAT
TAAATCAGAA
CGCAGAAGCG
GTCTGATAAA
ACAGAATTTG
CCTGGCGGCA
GTAGCGCGGT
GGTCCCACCT
GACCCCATGC
CGAACTCAGA
AGTGAAACGC
CGTAGCGCCG
ATGGTAGTGT
GGGGTCTCCC
CATGCGAGAG
TAGGGAACTG
CCAGGCATCA
AATAAAACGA
AAGGCTCAGT
CGAAAGACTG
GGCCTTTCGT
TTTATCTGTT
GTTTGTCGGT
GAACGCTCTC
CTGAGTAGGA
CAAATCCGCC
GGGAGCGGAT
TTGAACGTTG
CGAAGCAACG
GCCCGGAGGG
TGGCGGGCAG
GACGCCCGCC
ATAAACTGCC
AGGCATCAAA
TTAAGCAGAA
GGCCATCCTG
ACGGATGGCC
TTTTTGCGTT
TCTACAAACT
CTTTTGTTTA
TTTTTCTAAA
TACATTCAAA
TATGTATCCG
CTCATGAGAC
AATAACCCTG
ATAAATGCTT
CAATAATATT
GAAAAAGGAA
GAGTATGAGT
ATTCAACATT
TCCGTGTCGC
CCTTATTCCC
TTTTTTGCGG
CATTTTGCCT
TCCTGTTTTT
GCTCACCCAG
AAACGCTGGT
GAAAGTAAAA
GATGCTGAAG
ATCAGTTGGG
TGCACGAGTG
GGTTACATCG
AACTGGATCT
CAACAGCGGT
AAGATCCTTG
AGAGTTTTCG
CCCCGAAGAA
CGTTTTCCAA
TGATGAGCAC
TTTTAAAGTT
CTGCTATGTG
GCGCGGTATT
ATCCCGTGTT
GACGCCGGGC
AAGAGCAACT
CGGTCGCCGC
ATACACTATT
CTCAGAATGA
CTTGGTTGAG
TACTCACCAG
TCACAGAAAA
GCATCTTACG
GATGGCATGA
CAGTAAGAGA
ATTATGCAGT
GCTGCCATAA
CCATGAGTGA
TAACACTGCG
GCCAACTTAC
TTCTGACAAC
GATCGGAGGA
CCGAAGGAGC
TAACCGCTTT
TTTGCACAAC
ATGGGGGATC
ATGTAACTCG
CCTTGATCGT
TGGGAACCGG
AGCTGAATGA
AGCCATACCA
AACGACGAGC
GTGACACCAC
GATGCCTGTA
GCAATGGCAA
CAACGTTGCG
CAAACTATTA
ACTGGCGAAC
TACTTACTCT
AGCTTCCCGG
CAACAATTAA
TAGACTGGAT
GGAGGCGGAT
AAAGTTGCAG
GACCACTTCT
GCGCTCGGCC
CTTCCGGCTG
GCTGGTTTAT
TGCTGATAAA
TCTGGAGCCG
GTGAGCGTGG
GTCTCGCGGT
ATCATTGCAG
CACTGGGGCC
AGATGGTAAG
CCCTCCCGTA
TCGTAGTTAT
CTACACGACG
GGGAGTCAGG
CAACTATGGA
TGAACGAAAT
AGACAGATCG
CTGAGATAGG
TGCCTCACTG
ATTAAGCATT
GGTAACTGTC
AGACCAAGTT
TACTCATATA
TACTTTAGAT
TGATTTACGC
GCCCTGTAGC
GGCGCATTAA
GCGCGGCGGG
TGTGGTGGTT
ACGCGCAGCG
TGACCGCTAC
ACTTGCCAGC
GCCCTAGCGC
CCGCTCCTTT
CGCTTTCTTC
CCTTCCTTTC
TCGCCACGTT
CGCCGGCTTT
CCCCGTCAAG
CTCTAAATCG
GGGGCTCCCT
TTAGGGTTCC
GATTTAGTGC
TTTACGGCAC
CTCGACCCCA
AAAAACTTGA
TTTGGGTGAT
GGTTCACGTA
GTGGGCCATC
GCCCTGATAG
ACGGTTTTTC
GCCCTTTGAC
GTTGGAGTCC
ACGTTCTTTA
ATAGTGGACT
CTTGTTCCAA
ACTTGAACAA
CACTCAACCC
TATCTCGGGC
TATTCTTTTG
ATTTATAAGG
GATTTTGCCG
ATTTCGGCCT
ATTGGTTAAA
AAATGAGCTG
ATTTAACAAA
AATTTAACGC
GAATTTTAAC
AAAATATTAA
CGTTTACAAT
TTAAAAGGAT
CTAGGTGAAG
ATCCTTTTTG
ATAATCTCAT
GACCAAAATC
CCTTAACGTG
AGTTTTCGTT
CCACTGAGCG
TCAGACCCCG
TAGAAAAGAT
CAAAGGATCT
TCTTGAGATC
CTTTTTTTCT
GCGCGTAATC
TGCTGCTTGC
AAACAAAAAA
ACCACCGCTA
CCAGCGGTGG
TTTGTTTGCC
GGATCAAGAG
CTACCAACTC
TTTTTCCGAA
GGTAACTGGC
TTCAGCAGAG
CGCAGATACC
AAATACTGTC
CTTCTAGTGT
AGCCGTAGTT
AGGCCACCAC
TTCAAGAACT
CTGTAGCACC
GCCTACATAC
CTCGCTCTGC
TAATCCTGTT
ACCAGTGGCT
GCTGCCAGTG
GCGATAAGTC
GTGTCTTACC
GGGTTGGACT
CAAGACGATA
GTTACCGGAT
AAGGCGCAGC
GGTCGGGCTG
AACGGGGGGT
TCGTGCACAC
AGCCCAGCTT
GGAGCGAACG
ACCTACACCG
AACTGAGATA
CCTACAGCGT
GAGCTATGAG
AAAGCGCCAC
GCTTCCCGAA
GGGAGAAAGG
CGGACAGGTA
TCCGGTAAGC
GGCAGGGTCG
GAACAGGAGA
GCGCACGAGG
GAGCTTCCAG
GGGGAAACGC
CTGGTATCTT
TATAGTCCTG
TCGGGTTTCG
CCACCTCTGA
CTTGAGCGTC
GATTTTTGTG
ATGCTCGTCA
GGGGGGCGGA
GCCTATGGAA
AAACGCCAGC
AACGCGGCCT
TTTTACGGTT
CCTGGCCTTT
TGCTGGCCTT
TTGCTCACAT
GTTCTTTCCT
GCGTTATCCC
CTGATTCTGT
GGATAACCGT
ATTACCGCCT
TTGAGTGAGC
TGATACCGCT
CGCCGCAGCC
GAACGACCGA
GCGCAGCGAG
TCAGTGAGCG
AGGAAGCGGA
AGAGCGCCTG
ATGCGGTATT
TTCTCCTTAC
GCATCTGTGC
GGTATTTCAC
ACCGCATAGG
GTCATGGCTG
CGCCCCGACA
CCCGCCAACA
CCCGCTGACG
CGCCCTGACG
GGCTTGTCTG
CTCCCGGCAT
CCGCTTACAG
ACAAGCTGTG
ACCGTCTCCG
GGAGCTGCAT
GTGTCAGAGG
TTTTCACCGT
CATCACCGAA
ACGCGCGAGG
CAGCAAGGAG
ATGGCGCCCA
ACAGTCCCCC
GGCCACGGGG
CCTGCCACCA
TACCCACGCC
GAAACAAGCG
CTCATGAGCC
CGAAGTGGCG
AGCCCGATCT
TCCCCATCGG
TGATGTCGGC
GATATAGGCG
CCAGCAACCG
CACCTGTGGC
GCCGGTGATG
CCGGCCACGA
TGCGTCCGGC
GTAGAGGATC
TGCTCATGTT
TGACAGCTTA
TC