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pET-23b

产品货号:P0018

产品规格:

    少量干粉质粒 大提液体质粒

产品数量:

- 1 +

产品价格:0.00

一键复制产品信息
名称: pET-23b
别称: pET23b
基因长:
质粒宿主: 大肠杆菌
质粒用途: 蛋白表达,分泌表达
片段类型: ORF
片段物种: 空载体
原核抗性: Amp
筛选标记:
荧光标记:
启动子: T7
复制子: pBR322
拷贝数:
感受态: DH5a
温度: 37度
背景载体:
正向引物: T7:TAATACGACTCACTATAGGG
反向引物: T7ter:TGCTAGTTATTGCTCAGCGG
诱导方式: 组成型

1、本平台所有产品仅供科研使用,不能用于临床试验,包括人体口服、注射或者体外用药;
2、小包装质粒以模板价格出售,只保证基因部分测序正确,不保证质粒的表达等实验效果;
3、某些质粒即使是出品公司亦没有完整测过序,如关键部位的序列测序正确,亦认为是正确质粒;
4、小包装质粒产品的售后期为您收到产品之日起3个月,收到质粒后请及时转化操作,过期需重新购买;
5、质粒构建皆收取的是成本费用,所有质粒会分享给其他实验者,保密性质粒请提前告知并缴纳保密费用;
6、因科学研究为探索未知的活动,存在较大不确定性,故在任何情况下淼灵都不承担额外的连带责任;
7、发表[中文论文]请标注:产品名称(产品货号) 由武汉淼灵生物科技有限公司提供;
8、发表[英文论文]请标注:Product Name (Product Item Number) was obtained from MiaoLingBio,China.

操作说明

一、质粒干粉(负20度保存,保质期90天,常温运输)

1、收到干粉质粒后请先5000rpm离心1min,再加入20μl无菌水溶解质粒;

2、将相应的感受态于冰盒上解冻,取2μl质粒加至100μl感受态中,冰浴 30min;

3、42度热激60s,冰浴2min,加入900μl无抗LB培养基,180rpm震荡培养45min;

4、6000rpm离心3min,留100μl上清重悬,再涂至对应抗性的LB平板上;

5、倒置培养过夜后,如菌落过多则稀释质粒转化,如没有菌落则取10ul质粒转化;

6、挑单菌落至对应抗性的LB液体培养基中过夜震荡培养,根据需要提取质粒。


二、液体质粒(负20度保存,保质期90天,冰袋运输)

1、收到液体质粒后请甩动保存管,让液体质粒不要吸附在管壁上;

2、根据实验需求取适量质粒,其余保存于负20度冰箱。

三、甘油菌种(负80度保存,保质期90天,冰袋运输)

1、收到甘油菌种后请甩动保存管,让菌液不要吸附在管壁上;

2、用接种环在固体平板上四区划线,如有抗性就加对应抗性;

3、恒温培养箱倒置培养12~16h;

4、务必挑取单菌落接种于液体培养基中,如有抗性就加对应抗性;

5、摇床震荡培养过夜,根据实验需要培养菌种。

一键复制序列(有部分质粒是非全长序列)
1

TGGCGAATGG

GACGCGCCCT

GTAGCGGCGC

ATTAAGCGCG

GCGGGTGTGG

TGGTTACGCG

61

CAGCGTGACC

GCTACACTTG

CCAGCGCCCT

AGCGCCCGCT

CCTTTCGCTT

TCTTCCCTTC

121

CTTTCTCGCC

ACGTTCGCCG

GCTTTCCCCG

TCAAGCTCTA

AATCGGGGGC

TCCCTTTAGG

181

GTTCCGATTT

AGTGCTTTAC

GGCACCTCGA

CCCCAAAAAA

CTTGATTAGG

GTGATGGTTC

241

ACGTAGTGGG

CCATCGCCCT

GATAGACGGT

TTTTCGCCCT

TTGACGTTGG

AGTCCACGTT

301

CTTTAATAGT

GGACTCTTGT

TCCAAACTGG

AACAACACTC

AACCCTATCT

CGGTCTATTC

361

TTTTGATTTA

TAAGGGATTT

TGCCGATTTC

GGCCTATTGG

TTAAAAAATG

AGCTGATTTA

421

ACAAAAATTT

AACGCGAATT

TTAACAAAAT

ATTAACGTTT

ACAATTTCAG

GTGGCACTTT

481

TCGGGGAAAT

GTGCGCGGAA

CCCCTATTTG

TTTATTTTTC

TAAATACATT

CAAATATGTA

541

TCCGCTCATG

AGACAATAAC

CCTGATAAAT

GCTTCAATAA

TATTGAAAAA

GGAAGAGTAT

601

GAGTATTCAA

CATTTCCGTG

TCGCCCTTAT

TCCCTTTTTT

GCGGCATTTT

GCCTTCCTGT

661

TTTTGCTCAC

CCAGAAACGC

TGGTGAAAGT

AAAAGATGCT

GAAGATCAGT

TGGGTGCACG

721

AGTGGGTTAC

ATCGAACTGG

ATCTCAACAG

CGGTAAGATC

CTTGAGAGTT

TTCGCCCCGA

781

AGAACGTTTT

CCAATGATGA

GCACTTTTAA

AGTTCTGCTA

TGTGGCGCGG

TATTATCCCG

841

TATTGACGCC

GGGCAAGAGC

AACTCGGTCG

CCGCATACAC

TATTCTCAGA

ATGACTTGGT

901

TGAGTACTCA

CCAGTCACAG

AAAAGCATCT

TACGGATGGC

ATGACAGTAA

GAGAATTATG

961

CAGTGCTGCC

ATAACCATGA

GTGATAACAC

TGCGGCCAAC

TTACTTCTGA

CAACGATCGG

1021

AGGACCGAAG

GAGCTAACCG

CTTTTTTGCA

CAACATGGGG

GATCATGTAA

CTCGCCTTGA

1081

TCGTTGGGAA

CCGGAGCTGA

ATGAAGCCAT

ACCAAACGAC

GAGCGTGACA

CCACGATGCC

1141

TGCAGCAATG

GCAACAACGT

TGCGCAAACT

ATTAACTGGC

GAACTACTTA

CTCTAGCTTC

1201

CCGGCAACAA

TTAATAGACT

GGATGGAGGC

GGATAAAGTT

GCAGGACCAC

TTCTGCGCTC

1261

GGCCCTTCCG

GCTGGCTGGT

TTATTGCTGA

TAAATCTGGA

GCCGGTGAGC

GTGGGTCTCG

1321

CGGTATCATT

GCAGCACTGG

GGCCAGATGG

TAAGCCCTCC

CGTATCGTAG

TTATCTACAC

1381

GACGGGGAGT

CAGGCAACTA

TGGATGAACG

AAATAGACAG

ATCGCTGAGA

TAGGTGCCTC

1441

ACTGATTAAG

CATTGGTAAC

TGTCAGACCA

AGTTTACTCA

TATATACTTT

AGATTGATTT

1501

AAAACTTCAT

TTTTAATTTA

AAAGGATCTA

GGTGAAGATC

CTTTTTGATA

ATCTCATGAC

1561

CAAAATCCCT

TAACGTGAGT

TTTCGTTCCA

CTGAGCGTCA

GACCCCGTAG

AAAAGATCAA

1621

AGGATCTTCT

TGAGATCCTT

TTTTTCTGCG

CGTAATCTGC

TGCTTGCAAA

CAAAAAAACC

1681

ACCGCTACCA

GCGGTGGTTT

GTTTGCCGGA

TCAAGAGCTA

CCAACTCTTT

TTCCGAAGGT

1741

AACTGGCTTC

AGCAGAGCGC

AGATACCAAA

TACTGTCCTT

CTAGTGTAGC

CGTAGTTAGG

1801

CCACCACTTC

AAGAACTCTG

TAGCACCGCC

TACATACCTC

GCTCTGCTAA

TCCTGTTACC

1861

AGTGGCTGCT

GCCAGTGGCG

ATAAGTCGTG

TCTTACCGGG

TTGGACTCAA

GACGATAGTT

1921

ACCGGATAAG

GCGCAGCGGT

CGGGCTGAAC

GGGGGGTTCG

TGCACACAGC

CCAGCTTGGA

1981

GCGAACGACC

TACACCGAAC

TGAGATACCT

ACAGCGTGAG

CTATGAGAAA

GCGCCACGCT

2041

TCCCGAAGGG

AGAAAGGCGG

ACAGGTATCC

GGTAAGCGGC

AGGGTCGGAA

CAGGAGAGCG

2101

CACGAGGGAG

CTTCCAGGGG

GAAACGCCTG

GTATCTTTAT

AGTCCTGTCG

GGTTTCGCCA

2161

CCTCTGACTT

GAGCGTCGAT

TTTTGTGATG

CTCGTCAGGG

GGGCGGAGCC

TATGGAAAAA

2221

CGCCAGCAAC

GCGGCCTTTT

TACGGTTCCT

GGCCTTTTGC

TGGCCTTTTG

CTCACATGTT

2281

CTTTCCTGCG

TTATCCCCTG

ATTCTGTGGA

TAACCGTATT

ACCGCCTTTG

AGTGAGCTGA

2341

TACCGCTCGC

CGCAGCCGAA

CGACCGAGCG

CAGCGAGTCA

GTGAGCGAGG

AAGCGGAAGA

2401

GCGCCTGATG

CGGTATTTTC

TCCTTACGCA

TCTGTGCGGT

ATTTCACACC

GCATATATGG

2461

TGCACTCTCA

GTACAATCTG

CTCTGATGCC

GCATAGTTAA

GCCAGTATAC

ACTCCGCTAT

2521

CGCTACGTGA

CTGGGTCATG

GCTGCGCCCC

GACACCCGCC

AACACCCGCT

GACGCGCCCT

2581

GACGGGCTTG

TCTGCTCCCG

GCATCCGCTT

ACAGACAAGC

TGTGACCGTC

TCCGGGAGCT

2641

GCATGTGTCA

GAGGTTTTCA

CCGTCATCAC

CGAAACGCGC

GAGGCAGCTG

CGGTAAAGCT

2701

CATCAGCGTG

GTCGTGAAGC

GATTCACAGA

TGTCTGCCTG

TTCATCCGCG

TCCAGCTCGT

2761

TGAGTTTCTC

CAGAAGCGTT

AATGTCTGGC

TTCTGATAAA

GCGGGCCATG

TTAAGGGCGG

2821

TTTTTTCCTG

TTTGGTCACT

GATGCCTCCG

TGTAAGGGGG

ATTTCTGTTC

ATGGGGGTAA

2881

TGATACCGAT

GAAACGAGAG

AGGATGCTCA

CGATACGGGT

TACTGATGAT

GAACATGCCC

2941

GGTTACTGGA

ACGTTGTGAG

GGTAAACAAC

TGGCGGTATG

GATGCGGCGG

GACCAGAGAA

3001

AAATCACTCA

GGGTCAATGC

CAGCGCTTCG

TTAATACAGA

TGTAGGTGTT

CCACAGGGTA

3061

GCCAGCAGCA

TCCTGCGATG

CAGATCCGGA

ACATAATGGT

GCAGGGCGCT

GACTTCCGCG

3121

TTTCCAGACT

TTACGAAACA

CGGAAACCGA

AGACCATTCA

TGTTGTTGCT

CAGGTCGCAG

3181

ACGTTTTGCA

GCAGCAGTCG

CTTCACGTTC

GCTCGCGTAT

CGGTGATTCA

TTCTGCTAAC

3241

CAGTAAGGCA

ACCCCGCCAG

CCTAGCCGGG

TCCTCAACGA

CAGGAGCACG

ATCATGCGCA

3301

CCCGTGGCCA

GGACCCAACG

CTGCCCGAGA

TCTCGATCCC

GCGAAATTAA

TACGACTCAC

3361

TATAGGGAGA

CCACAACGGT

TTCCCTCTAG

AAATAATTTT

GTTTAACTTT

AAGAAGGAGA

3421

TATACATATG

GCTAGCATGA

CTGGTGGACA

GCAAATGGGT

CGGGATCCGA

ATTCGAGCTC

3481

CGTCGACAAG

CTTGCGGCCG

CACTCGAGCA

CCACCACCAC

CACCACTGAG

ATCCGGCTGC

3541

TAACAAAGCC

CGAAAGGAAG

CTGAGTTGGC

TGCTGCCACC

GCTGAGCAAT

AACTAGCATA

3601

ACCCCTTGGG

GCCTCTAAAC

GGGTCTTGAG

GGGTTTTTTG

CTGAAAGGAG

GAACTATATC

3661

CGGAT

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